归龙丸方对0级糖尿病足血清基质金属蛋白酶－9、血清同型半胱氨酸的影响研究

王文英，简小兵，伊 娜，邓伟明

归龙丸方对0级糖尿病足血清基质金属蛋白酶－9、血清同型半胱氨酸的影响研究

王文英，简小兵，伊 娜，邓伟明

目的 观察归龙丸方早期干预0级糖尿病足 (DF)的临床疗效及对周围神经传导速度、血管功能的影响。方法 将80例0级DF患者按随机数字表随机分为治疗组和对照组各40例。在基础治疗 (口服降糖药或胰岛素注射降糖等)的基础上，治疗组加用归龙丸方治疗，对照组加用西洛他唑口服治疗，观察两组患者治疗前后临床症状评分、踝/肱动脉比 (ABI)、双下肢腓总神经传导速度、血清基质金属蛋白酶－9(MMP－9)、血清同型半胱氨酸(Hcy)的变化。结果 两组患者临床症状评分治疗后与治疗前比较，差异均有统计学意义 (P＜0.05);治疗组优于对照组，差异有统计学意义 (P＜0.05)。治疗组治疗后ABI评分与治疗前比较，差异有统计学意义 (P＜0.05);对照组患者治疗前后ABI评分间差异无统计学意义 (P＞0.05);治疗组治疗后ABI评分与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。治疗后两组患者腓总神经感觉神经传导速度 (SCV)、运动神经传导速度 (MCV)与治疗前相比，差异均有统计学意义 (P＜0.05);治疗组与对照组比较，差异亦有统计学意义 (P＜0.05)。两组患者治疗后血清MMP－9、Hcy水平与治疗前比较，差异有显著统计学意义 (P＜0.01)，治疗组与对照组比较，差异亦有统计学意义 (P＜0.05)。结论 归龙丸方具有温阳养血、活血通络的作用，可以提升ABI评分，提高神经传导速度，降低血清MMP－9、Hcy水平，改善0级DF患者的临床症状，疗效优于西洛他唑。

糖尿病足;归龙丸方;踝肱指数;神经传导速度;基质金属蛋白酶－9;同型半胱氨酸

糖尿病足 (diabetic foot，DF)是糖尿病 (diabetic mellitus，DM)的一种主要慢性并发症，是导致截肢的主要原因，具有患病率高、危害性大、可防难治的特点。本课题以归龙丸方为主治疗0级DF，观察临床症状评分、神经传导速度、血管功能的变化等指标，初步探讨其作用机制，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2010年1月—2011年5月收集80例患者，为来自广州市中医医院内分泌科门诊和住院部的患者，糖尿病依照WHO诊断标准［1］，DF按Wagner分级为0级［2］，中医辨证符合《糖尿病中医防治指南》［3］DF辨证分型中“气血两虚，络脉瘀阻证”及“脾肾阳虚，瘀阻脉络证”。患者按随机数字表随机分为两组，治疗组40例，男23例，女17例，平均年龄 (65.62±5.74)岁，病程 (13.16±5.68)年;对照组40例，男21例，女19例，平均年龄 (67.13±4.77)岁，病程(12.84±6.15)年，两组患者性别、年龄、病程间差异均无统计学意义 (P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治疗方法 治疗组给予归龙丸方治疗 (归尾10 g，赤芍15 g，桂枝10 g，地龙12 g，路路通12 g，细辛6 g，银杏叶12 g)，由本院煎药室以自动煎药机 (南韩株式会社和印产物生产，型号HL－10)高压浓缩煎煮，每袋药液200 ml，口服，每次1袋，每日2次。对照组给予西洛他唑 (国药准字H20040579号，西安大恒制药厂生产)口服，每次50 mg，每日2次。2组患者治疗4周为1疗程，治疗3疗程后统计结果。两组患者基础治疗给予口服降糖药或胰岛素注射降糖，将血糖控制在良好水平。

1.3 观察项目 观察两组患者治疗前后临床症状评分 (间歇性跛行、疼痛感、麻木感、冷沉重感，以0～4分进行评分)、踝/肱动脉比 (ABI)、双下肢腓总神经传导速度、血清基质金属蛋白酶－9(MMP－9)、血清同型半胱氨酸 (Hcy)水平。两组患者均空腹抽取肘静脉血5 ml，置于乙二胺四乙酸 (EDTA)抗凝管，低温离心取上清液，Hcy水平以循环酶法用东芝TBA120全自动生化分析仪检测，试剂购自北京九强生物工程有限公司，MMP－9水平以酶联免疫吸附法 (ELISA)用芬兰Labsystems Dragon自动酶标仪测定，试剂购自上海森雄科技有限公司，均严格按说明书操作。

1.4 统计学方法 采用SPSS 10.0统计软件进行统计学分析。计数资料以频数 (构成比)表示，采用χ2检验，计量资料以(±s)表示，采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

两组患者治疗前症状评分 (间歇性跛行、疼痛感、麻木感、冷沉重感、总体感觉症状积分)间差异均无统计学意义(P＞0.05)，治疗12周后，症状评分间差异有统计学意义 (P＜0.05)，治疗组优于对照组，提示归龙丸方能更好地改善DF患者的临床症状。具体见表1。

两组患者治疗前ABI评分间差异无统计学意义 (P＞0.05)，治疗12周后，治疗组ABI评分与治疗前比较差异有统计学意义 (P＜0.05)，对照组与治疗前比较差异无统计学意义 (P＞0.05);治疗后组间比较，差异有统计学意义 (P＜0.05)，治疗组在改善患者ABI上优于对照组，能更好地改善DF患者的ABI评分。具体见表2。

治疗前两组间腓总神经感觉神经传导速度 (SCV)、运动神经传导速度 (MCV)间差异均无统计学意义 (P＞0.05);治疗12周后，两组患者腓总神经SCV、MCV与治疗前比较以及组间比较，差异均有统计学意义 (P＜0.05)，治疗组优于对照组，提示归龙丸方能更好地改善周围神经功能。具体见表3。

表1 两组患者治疗前后症状评分比较(±s，分)Table 1 Comparison of clinical symptom scores before and after treatment between the two groups

表1 两组患者治疗前后症状评分比较(±s，分)Table 1 Comparison of clinical symptom scores before and after treatment between the two groups

注:治疗前比较，*P＜0.05，治疗后组间比较，△P＜0.05

组别 例数 间歇性跛行 疼痛感 麻木感 冷沉重感 总分治疗组 40 治疗前 2.75±0.69 2.70±0.77 2.69±0.73 2.71±0.61 10.63±1.66治疗后 1.07±0.71＊△ 1.12±0.81＊△ 1.16±0.76＊△ 1.11±0.79＊△ 4.58±1.83＊△对照组 40 治疗前 2.72±0.66 2.77±0.84 2.73±0.80 2.68±0.58 10.68±1.57治疗后 1.83±0.63* 1.78±0.78* 1.75±0.83* 1.88±0.86* 7.27±1.76*

表2 两组患者治疗前后ABI比较(±s)Table 2 Comparison of ABI before and after treatment between the two groups

表2 两组患者治疗前后ABI比较(±s)Table 2 Comparison of ABI before and after treatment between the two groups

注:治疗前比较，*P＜0.05，治疗后组间比较，△P＜0.05;ABI=踝/肱动脉比

组别 例数 ABI治疗前 ABI 治疗后治疗组 40 0.77±0.13 1.03±0.15＊△对照组 40 0.79±0.17 0.86±0.18

表3 两组患者治疗前后神经传导速度比较(±s，m/s)Table 3 Comparison of nerve conduction velocity before and after treatment between the two groups

表3 两组患者治疗前后神经传导速度比较(±s，m/s)Table 3 Comparison of nerve conduction velocity before and after treatment between the two groups

注:治疗前比较，*P＜0.05，治疗后组间比较，△P＜0.05;SCV=感觉神经传导速度，MCV=运动神经传导速度

组别 例数 腓总神经SCV MCV治疗组 40 治疗前 31.7±2.6 37.7±2.8治疗后 42.4±2.4＊△ 49.1±2.2＊△对照组 40 治疗前 32.2±2.8 37.5±2.6治疗后 36.8±2.2* 41.0±2.7*

两组治疗前MMP－9、Hcy水平间差异无统计学意义 (P＞0.05);治疗12周后，两组患者MMP－9、Hcy水平与治疗前比较，差异均有统计学意义 (P＜0.01)，治疗组与对照组比较，差异有统计学意义 (P＜0.05)，且治疗组优于对照组，能更好地改善MMP－9、Hcy水平。具体见表4。

表4 两组患者治疗前后MMP－9、Hcy比较(±s)Table 4 Comparison of MMP－9 and Hcy levels before and after treatment between the two groups

表4 两组患者治疗前后MMP－9、Hcy比较(±s)Table 4 Comparison of MMP－9 and Hcy levels before and after treatment between the two groups

注:治疗前比较，*P＜0.01，治疗后组间比较，△P＜0.05;MMP－9=血清基质金属蛋白酶－9，Hcy=血清同型半胱氨酸

组别 例数 MMP－9(μg/l) Hcy(mmol/l)治疗组 40 治疗前 386.7±88.3 18.06±2.24治疗后 174.8±52.6＊△ 11.76±1.85＊△对照组 40 治疗前 394.6±91.1 18.36±2.54治疗后 268.3±57.8* 14.21±2.16*

3 讨论

0级DF是指具高危因素、没有伤口的DF，下肢溃疡和坏疽是DF发展的严重阶段。目前我国的DF临床工作往往重治疗、轻预防，忽视了对0级DF的诊断及治疗。DF的防治以预防溃疡发生为主［4－7］，DF的病变基础包括神经和血管的病变，其中血管病变起关键性作用。MMP－9又称明胶酶B，是基质金属蛋白酶家族成员之一，通过降解血管壁细胞外基质，促进血管平滑肌细胞由中膜向内膜迁移、增殖，导致平滑肌增生，促成动脉粥样硬化形成［8－9］，而过度表达可引起高Hcy血症［10］。研究表明:Hcy是一种含硫基的血管损伤性氨基酸，高Hcy血症与糖尿病大血管病变明显相关，Hcy可通过直接或间接损伤血管内皮细胞，造成内皮细胞功能障碍，促进血管平滑肌细胞增殖，改变血液凝固状态及血小板功能等多方面机制引起血管病变［11］。高Hcy血症是动脉硬化的一个独立危险因素。本研究也发现，0级DF患者血清MMP－9、Hcy显著升高。

DF属中医“消渴脱疽”范畴，笔者认为0级DF的病因病机是，消渴病久迁延，致阴阳气血俱虚，气虚无力推动血行，血脉瘀滞，不通则痛，出现肤色黯淡，肢端疼痛等症;另一方面阳气不足，四末不温，筋脉失养，出现手足麻痹，皮温下降等表现。治疗予具有温阳养血、活血通络作用的归龙丸方。前期研究表明，归龙丸方对于0级DF有较好的临床疗效，明显改善患者下肢麻痹、疼痛等临床症状，能提高其腓总神经SCV、MCV，改善血液黏稠度及高凝状态，改善ABI值及下肢彩超评分［12－14］。归龙丸方为当归四逆汤加减，去掉苦寒有毒之木通而改用银杏叶，另去甘草、大枣，加地龙、路路通，以加强活血通络作用。全方以当归、赤芍为君，当归补血活血止痛、赤芍清热凉血，祛瘀止痛;桂枝温通经脉，与地龙、路路通共为臣药，且地龙为虫类药物，通络力犹强;佐以银杏叶清热散结;细辛芳香气浓，性善走窜为使药。诸药合用，活血通络而无伤阴之弊，寒温并用既不温燥耗津，又不寒凉留滞，共奏温阳养血，活血通络之功。本研究近一步发现两组患者治疗后血清MMP－9、Hcy水平显著降低，差异有统计学意义 (P＜0.01)，而以归龙丸方为主的治疗组变化更显著，差异有统计学意义 (P＜0.05)。这表明归龙丸方治疗0级DF可能是通过改善血管内皮功能，促进局部血液循环而起到良好作用，其确切作用机制尚需从多层次、多角度加以研究分析。

1 钱荣立摘译.关于糖尿病的新诊断标准与分型 ［J］.中国糖尿病杂志，2000，8(1):5.

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12 邓琢，王志辉，高景波.糖尿病足的中医发病机制和治疗体会［J］.中国误诊学杂志，2009，9(9):2108.

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Impact of Guilong Pill Formulation in on MMP－9 and Hcy Levels in Patients with Wagner Grade 0 Diabetic Foot

WANG Wen－ying，JIAN Xiao－bing，YI Na，et al.Department of Endocrine，Guangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine，Guangzhou510130，China

ObjectiveTo observe the therapeutic effects and influence on peripheral nerve conduction velocity and the blood vessel function of Guilong Pill Formulation in early intervention of patients with WagResuner grade 0 diabetic foot(DF).MethodsEighty cases suffered from Wagner grade 0 DF were randomized into treatment group and control group，with forty cases each.In addition to basic therapy(blood sugar control with oral western medication or insulin injection)，the treatment group was treated with Guilong Pill Formulation while the control group was treated with cilostazol.Changes of clinical symptom scores，ankle brachial index(ABI)，nerve conduction velocity of common peroneal nerves，serum matrix metalloproteinases－9(MMP－9)levels and serum homocysteine(Hcy)levels before and after treatment were compared between the two groups.ResultsClinical symptoms scores improved in both groups after treatment(P＜0.05)with the treatment group superior to the control group(P＜0.05).ABI scores improved obviously after treatment in the treatment group(P＜0.05)while no significant improvement was observed in the control group(P＞0.05);ABI scores increased significantly in the treatment group in comparison to the control group after treatment(P＜0.05).Sensory nerve conduction velocity(SCV)and motor nerve conduction velocity(MCV)of common peroneal nerve improved after treatment in both groups(P＜0.05)，with the treatment group superior to the control group(P＜0.05).Levels of serum MMP－9 and Hcy were significantly reduced after treatment in both groups(P＜0.01)，with more remarkable changes in the treatment group compared to the control group(P＜0.05).ConclusionGuilong Pill Formulation exhibits the functions of warming Yang－nourishing blood and activating blood dredging collaterals，which increases ABI scores，improves peripheral nerve conduction velocity，reduces serum MMP －9 and Hcy levels and thus improves the clinical symptoms of patients with Wagner grade 0 diabetic foot.Guilong Pill Formulation is more effective than cilostazol.

Diabetic foot;Guilong pill formulation;Ankle brachial index;Nerve conduction velocity;Matrix metalloproteinases－9;Homocysteine

R 587.1

A

1007－9572(2011)－3979－03

广州市卫生局立项课题 (2009－B－07)

510130广东省广州市，广州市中医医院内分泌科

2011－06－18;

2011－10－26)

(本文编辑:崔沙沙)