VEGF和Ki-67在膀胱移行细胞癌中的表达和临床意义

杨宏 雷永虹 秦扬 他同生 杨承纲

为探讨膀胱癌中癌基因的表达与其生物学行为的关系，采取免疫组化SP法对68例膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell cancer，BTCC)组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和核增殖相关抗原 Ki-67的表达进行测定，同时结合对患者的随访，对其病理分级、局部浸润(临床分期)、复发转移及预后等情况进行分析，并在此基础上探讨二者的关系及其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我科2001年1月至2005年6月间首次手术切除并经病理证实的BTCC组织石蜡标本68例，其中男54例，女14例;年龄33～80岁，平均年龄62.16岁;病理分级按WHO标准:Ⅰ级16例，Ⅱ级31例，Ⅲ级21例;临床分期按UICC-TNM标准:表浅性肿瘤(Tis～T1期)46例，浸润性肿瘤(T2～T4期)22例;术后随访至2008年6月，随访时间4个月～7年不等，复发25例，未复发43例。另取10例正常膀胱黏膜作对照。

1.2 方法 病理标本4 μm厚石蜡切片，65℃烘烤，脱蜡，水化后微波修复抗原，继以SP法检测。

1.3 统计学分析 计数资料比较采用χ2检验，P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 VEGF和Ki-67在正常膀胱黏膜和BTCC中的表达 正常膀胱黏膜VEGF和Ki-67无阳性表达，阳性率为0%，BTCC组织中VEGF和Ki-67阳性表达分别为50例(73.53%)和48例(70.59%)，二者VEGF和Ki-67阳性率表达差异有统计学意义(P＜0.01)。VEGF和Ki-67在BTCC中的阳性表达率随病理分级的升高而升高，差异有统计学意义(P＜0.05)。浸润性肿瘤阳性表达率明显高于表浅性肿瘤，差异有统计学意义(P＜0.05)。复发组阳性表达率明显高于未复发组，差异有统计学意义(P ＜0.01)。见表1。

表1 VEGF和Ki-67在正常膀胱黏膜和BTCC中的表达

2.2 VEGF与Ki-67在BTCC中表达的关系 VEGF和Ki-67共同阳性43例，共同阴性12例，两者在BTCC中表达一致的符合率达80.88%，在 VEGF表达较高的区域，Ki-67表达亦较强，在VEGF表达++或+++的35例中，同时Ki-67++有26例，占74.29%，两者协同强阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.01)。见表 2。

表2 VEGF与Ki-67在BTCC中表达的关系 例

2.3 转归 本研究结果发现，在VEGF和Ki-67共同阳性43例中，有22例复发，占复发组(25例)的88%。对有完整随访资料的患者研究表明，VEGF和Ki-67的阳性表达患者术后易复发或转移，预后差，生存期明显低于VEGF和Ki-67的阴性表达者。

3 讨论

膀胱癌在我国是泌尿系统中最常见的恶性肿瘤，其发病率和病死率居第一位，术后复发或转移是导致治疗失败的常见原因。BTCC生物学行为复杂多变，异质性强，具有易复发性，其复发规律及其与生物学特性的关系至今仍不清楚，寻找生物学标志对了解膀胱移行细胞癌的发生发展、浸润具有重要意义。其次，由于目前采用经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)的患者较多，原位膀胱手术日益成熟，通过分析其生物学行为会对指导临床选择最佳治疗方案有一定的帮助。

肿瘤细胞的增殖和播散有赖于丰富的血管支持，血管新生是肿瘤生长、转移和表达肿瘤生物学特征的基础。膀胱癌与所有实体肿瘤一样，生长与转移依赖于血管新生，目前已知，内皮细胞增殖是血管新生的首要环节，VEGF是迄今发现的针对内皮细胞特异性最高、促肿瘤血管构建作用最强的调节因子［1］。

VEGF是一种功能强大且能产生多种生物学效应的细胞因子，是目前已知的一族最强的促血管形成物质，其对肿瘤的作用有:(1)促进血管内皮细胞增殖;(2)增强血管通透性，使肿瘤细胞外渗，转向临近组织器官;(3)改变细胞外基质表达及基因的表达;(4)显著影响免疫功能，使肿瘤细胞逃脱机体免疫监测作用引起肿瘤细胞的扩散和转移［2］。肿瘤自肿瘤血管从宿主获得营养，并通过不成熟的肿瘤血管向宿主输出大量恶性细胞，导致肿瘤不断生长和转移。由此可见，VEGF在肿瘤血管生长和调节肿瘤细胞增殖过程中起着十分关键的作用。

核增殖相关抗原Ki-67是目前较为肯定的核增殖标志基因，反映细胞的增殖活性，在人增殖细胞的G1、S、G2、M期表达，M期达最大表达峰，而G0期无表达。传统的细胞增殖标记物如PCNA等，在许多静止期细胞亦有高水平的表达［3］，而Ki-67在G0期无表达，因此Ki-67较前者更能准确地评价细胞增殖活性。

本研究结果发现，VEGF和Ki-67在BTCC中呈高表达，而在正常膀胱黏膜中则不表达(P＜0.01)。二者在BTCC中的阳性表达率随病理分级的升高而升高(P＜0.05)，且复发明显升高(P＜0.05);浸润性肿瘤VEGF阳性表达率明显高于表浅性肿瘤(P＜0.05)，说明二者的表达与BTCC的侵袭力有关。本研究结果提示:VEGF和Ki-67的表达与BTCC的病理分级、临床分期、肿瘤复发和预后呈明显相关性，即二者在BTCC中表达越强，癌细胞分化越差，恶性程度越高，越易向深层浸润，越容易复发，预后越差。这说明VEGF和Ki-67与BTCC的生物学行为关系密切，可能对膀胱癌的发生进展起促进作用。进一步证实VEGF和Ki-67在BTCC中的表达可作为判断膀胱肿瘤恶性程度、侵袭能力及预后较理想的两项指标。

另外，在本研究中VEGF和Ki-67在BTCC中表达一致的符合率达80.88%，在 VEGF表达较高的区域，Ki-67表达亦较强，两者协同强阳性表达率差异有统计学意义(P＜0.01)。结合本研究结果可进一步说明:VEGF和Ki-67之间可能有着某种联系，VEGF既可刺激肿瘤血管形成，还可促进肿瘤细胞增殖，它们在促进肿瘤新生血管形成和肿瘤细胞过度增殖的机制中可能存在协同作用。本研究对有完整随访资料的患者研究表明，VEGF和Ki-67的阳性表达患者术后易复发或转移，预后差，生存期明显低于VEGF和Ki-67的阴性表达者，提示VEGF和Ki-67的阳性表达尤其是联合阳性表达对判断膀胱癌复发、评估预后具有重要意义，能较准确地评估膀胱移行细胞癌的生物学行为，二者不仅为测定肿瘤的恶性潜力提供了客观指标，而且可帮助选择治疗。

因此，同时检测VEGF和Ki-67，研究肿瘤血管形成和肿瘤细胞增殖机制对了解恶性肿瘤的发生发展、侵袭和转移的生物学特性和机制，以及抗肿瘤血管生成靶向治疗有着重要的理论意义和临床应用价值。

1 Katoh R，Miyagi E，Kawai A，et al.Expression of vascular endothelial growth factor in human thyrioid neoplasms.Hum Pathol，1999，30:891.

2 梁建清.膀胱癌诊断新发展.中国综合临床杂志，2005，21:380-381.

3 Hall PA，Levison DA，Woods AL，et al.Proliferating cell nuclear antigen(PCNA)im-munolocalization in paraffin sections:an index of cell proliferation with evidence of deregulat-ed expression in some neoplasms.J Pathol，1990，162:285.