高效液相色谱法测定替米沙坦胶囊中替米沙坦含量

林杭娟

(浙江省宁波市中医院药剂科，浙江 宁波 315010)

替米沙坦(telmisartan)属血管紧张素Ⅱ受体(AT1)拮抗剂，可选择性地、难以逆转地阻滞AT1受体，而对其他受体尤其是心血管系统的受体无影响，从而阻断血管紧张素Ⅱ引起的血管收缩和醛固酮分泌[1-3]。替米沙坦胶囊原由德国Boe-hringer Ingelheim公司开发，我国自行研制的替米沙坦胶囊属于国家Ⅱ类新药。为了对该制剂进行质量控制，笔者采用反相高效液相色谱法测定其中替米沙坦含量，效果满意，现报道如下。

1 仪器与试药

Aglient 1200型高效液相色谱系统(美国安捷伦科技有限公司)，配备G1322A在线脱气机、G1311A四元梯度泵、G1329A自动进样仪、G1316A柱温箱、Aglient色谱工作站。替米沙坦对照品(天津一方科技有限公司，含量98%以上，批号为713-200908);替米沙坦胶囊(江苏康缘药业股份有限公司，批号为20100713);乙腈(色谱纯)，其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱:依利特 C18柱(200 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:乙腈 -水 -冰醋酸(45∶55 ∶0.1)混合液;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min;检测波长:242 nm;进样量:20 μL。在此条件下，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.2 溶液制备

精密称取替米沙坦对照品适量，以流动相配制成含替米沙坦0.5 g/L的对照品溶液。精密称取替米沙坦胶囊内容物适量(约相当于替米沙坦10 mg)，置100 mL容量瓶中，加流动相适量，超声使溶解，定容，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。按处方比例称取除主药外的辅料，照供试品溶液同法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

线性关系考察:精密吸取对照品溶液 0.2，0.4，0.8，1.0，1.2，1.4，1.6 mL，分别置5 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。取每个质量浓度的稀释液20 μL进样，记录色谱图。以峰面积(A)为纵坐标、质量浓度(C)为横坐标进行线性回归，回归方程为 A=7.15×105C-2.17×104，r=0.999 8(n=7)。结果表明，替米沙坦质量浓度在20～160 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验:配置低、中、高 3 种质量浓度(60，100，140 μg/mL)的对照品溶液，于同日内测定3次，结果低、中、高3种质量浓度的日内 RSD分别为0.41%，0.35%，0.47%(n=3);连续测定3 d，结果低、中、高3种质量浓度的日间 RSD分别为0.56%，0.76%，0.81%(n=3)。结果表明，方法精密度良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，分别于 0，2，4，8，12，16，24 h时进样测定峰面积。结果的 RSD为0.71%(n=7)，表明供试品溶液在24 h内稳定，符合样品检测要求。

加样回收试验:取已知含量的样品内容物适量，精密称定5份，分别加入对照品溶液适量，按供试品溶液制备方法制备溶液，按拟订的色谱条件进行含量测定，并计算回收率。结果见表1。

表1 替米沙坦加样回收试验结果(n=5)

2.4 样品含量测定

取样品20粒，精密称定，倾出内容物，混匀，研细，精密称取适量(约相当于替米沙坦10 mg)，置50 mL量瓶中，加甲醇至刻度，超声溶解10 min，滤过，精密量取续滤液1 mL，置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取替米沙坦对照品，依法制成质量浓度为30 μg/mL的对照品溶液。对6批样品进行含量测 定 ，结 果 批 号 为 100516，100518，100520，100522，100524，100526的样品中替米沙坦含量分别为标示量的100.1%，100.4%，100.8%，99.8% ，101.2% ，102.3% 。

3 讨论

替米沙坦的生物样本分析方法主要有液相色谱-质谱法、紫外法和高效液相色谱法[4-6]。曾采用2005年版《中国药典(二部)》中吲达帕胺片含量测定项下的流动相甲醇-水-冰醋酸(45∶55∶0.1)，但替米沙坦在此条件下30 min内不出峰。考虑到乙腈有较强的洗脱能力，将甲醇换为乙腈，条件为乙腈-水-冰醋酸(45∶55∶0.1)，结果制剂中替米沙坦的出峰时间约为9.5 min，能达到基线分离，且保留时间适中、峰形对称，辅料和溶出介质不干扰测定。

所建立的高效液相色谱法用于测定替米沙坦胶囊的含量，方法简单、快捷、专一性强、重复性好，为该产品的含量测定及质量控制提供了一种高效、可靠的方法。

[1]Wenzel P，Schulz E，Oelze M，et al.AT1-receptor blockade by telmisartan upregulates GTP-cyclohydrolase I and protects eNOS in diabetic rats[J].Free Radic Biol Med，2008，45(5):619-626.

[2]Fujimoto M，Masuzaki H，Tanaka T，et al.An angiotensin Ⅱ AT1receptor antagonist，telmisartan augments glucose uptake and GLUT4 protein expression in 3T3-L1 adipocytes[J].FEBS Lett，2004，576(3):492-497.

[3]McGill JB，Reilly PA.Telmisartan plus hydrochlorothiazide versus telmisartan or hydrochlorothiazide monotherapy in patients with mild to moderate hypertension:a multicenter，randomized，double-blind，placebocontrolled，parallel-group trial[J].Clin Ther，2001，23(6):833-850.

[4]司梁宏，张 梅，王呈吴.用HPLC法测定复方替米沙坦胶囊中替米沙坦和叫达帕胺的溶出度[J].药学服务与研究，2007，7(2):140-141.

[5]孙 玲，张岱州.替米沙坦胶囊的含量测定[J].齐鲁药事，2005，24(5):279-280.

[6]李国成，余晓霞，陈广惠，等.国产替米沙坦胶囊在健康人体内的药动学[J].中国医院药学杂志，2006，26(5):568-570.