吡虫啉对菇蝇蚊防效及对食用菌菌丝生长影响*

赵晓娜 ， 罗 佳 ，2**， 吴梅香 ，2， 廖慧东 ， 范青海 ，2，3

（1.福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室，福建 福州 350002；2.福建农林大学植物保护学院，福建 福州 350002；3.Plant Health&Environment Laboratory,MAF Biosecurity New Zealand,Auckland 1072）

我国是世界上主要的食用菌生产国和出口国，平菇、双孢蘑菇和香菇等的产量均居世界第一[1]。但随着食用菌产业的迅速发展，食用菌害虫发生的种类和数量日益增多，其中以双翅目害虫种类最多，危害最严重。据报道平菇厉眼蕈蚊可造成食用菌减产30%以上，黑腹果蝇危害木耳严重时可造成绝收[2，3]。对于食用菌双翅目害虫的防治，在国外，主要集中在化学药剂防治以及结合线虫和捕食螨等进行综合防治方面的研究应用[4-8]；我国虽遵循 “预防为主，防治结合”的原则，但化学防治以其见效快、杀虫彻底等优点仍是目前防治最直接有效的措施。目前我国已认证注册用于防治食用菌害虫的杀虫剂较少，且存在杀虫剂不规范使用等问题，在食用菌生产和出口上都产生了严重的问题。例如，在输日食用菌产品中甲氰菊酯、联苯菊酯和毒死蜱等农药残留被列为批批检查对象[9，10]等。吡虫啉作为一种广谱、高效杀虫剂正广泛应用于食用菌生产，但相关的研究报道较少，且多关于吡虫啉对食用菌害虫的防治效果，而很少涉及其残留以及对食用菌生长的影响。鉴于此，本研究选用食用菌生产上重要害虫厉眼蕈蚊和黑腹果蝇作为研究对象，针对吡虫啉对它们的室内防治效果，对平菇、秀珍菇和双孢蘑菇菌丝生长的影响，以及在食用菌上的残留做了一个较为全面的研究，以期为吡虫啉更好地应用于食用菌生产提供一定的科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

试虫：黑腹果蝇 （Drosophila melanogaster）和厉眼蕈蚊 （Lycoriella sp.），均于2007年下半年采自福建农林大学土地与资源学院食用菌菌物研究中心，并于9月在福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室建立实验室品系。

杀虫剂：由预实验确定70%吡虫啉 （Imidacloprid）水分散粒剂 （商品名：艾美乐，德国拜耳公司产品）的实验稀释的倍数分别为黑腹果蝇初孵3龄幼虫：5 000倍、10 000倍和20 000倍；厉眼蕈蚊3龄幼虫：200 000倍、300 000倍和400 000倍。

食用菌菌株：平菇 （Pleurotus ostreatus）、秀珍菇（Pleurotus geesteranus）、 双孢蘑菇 （Agaricus bisporus）和香菇 （Lentinus edodes）菌株，均由福建农林大学菌物研究中心提供。

供试菌袋：平菇和秀珍菇菌袋由福建省古田县食用菌研发中心提供。

1.2 实验方法

1.2.1 实验试虫的饲养

黑腹果蝇的饲养：将麦麸、白糖和酵母按照约6∶2∶1的比例混匀于保鲜盒中并加入适量的水，以不出现明水为宜，盖上带孔盒盖 （供成虫出入），并将其放入200目纱布制成的养虫笼中，在室温为 (25±0.1)℃的条件下饲养。

厉眼蕈蚊的饲养：参考王梓清的饲养方法[11]。

1.2.2 吡虫啉对黑腹果蝇和厉眼蕈蚊幼虫的室内防治

参考慕卫等的胃毒触杀联合法[12]，略有改动。在6 cm培养皿底部平铺1张中速定性滤纸 （杭州特种纸业有限公司），吸取相应浓度的药液滴加于滤纸表面，使其正好完全润湿。将大小约2 cm×2 cm×3 mm的苹果 （山药）切片在待测药液中浸渍1 min后，取出置于底部铺有同浓度药液处理的滤纸的培养皿内，用毛笔挑入大小一致的黑腹果蝇 （厉眼蕈蚊）3龄幼虫。每浓度处理60头，重复4次，以浸渍清水为对照。处理后置于 (25±0.1)℃、75%RH的无光培养箱中培养，药后24 h检查记录试虫死亡情况，以毛笔轻触虫体，虫体不动者视为死亡。计算其防治效果。

1.2.3 吡虫啉对食用菌菌丝生长的影响

采用平板加药法。选择药剂处理的倍数分别为5 000倍、10 000倍和20 000倍。无菌条件下，将吡虫啉用无菌水分别稀释成500倍、1 000倍和2 000倍，移液枪移取1 mL药液加入预先融化的99 mLPDA培养基中，摇匀后倒入直径为9 cm的无菌培养皿中，每皿约20 mL，冷却，凝固。用内径为7 mm的无菌打孔器在已接种食用菌平板上打取菌饼，并将其接种于含药培养基平板中央，每处理重复5次，对照加入等量的无菌水。置于25℃培养箱中培养。根据食用菌的生长特性，采用十字垂直交叉法分别于6 d、10 d和15 d后测量平菇、秀珍菇、双孢蘑菇和香菇的菌落直径。计算菌丝平均生长速率。

1.2.4 农药残留测定

配制稀释倍数为5 000倍的吡虫啉药液备用。待食用菌菌袋长出大小一致的食用菌菌棒时，喷施药液，每处理菌袋20袋，重复3次。于施药后4 d采集样品500 g送福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心，按照GB/T 20769－2008标准方法测定吡虫啉在平菇和秀珍菇中的残留。参考浙江省标准化研究院和潘灿平有关农药残留限量标准进行分析[10，13]。

1.2.5 数据处理

死亡率 （S）公式、防治效果 （P）公式如下：

注：N1为死亡试虫数；N2为处理试虫数；S1为处理死亡率；S2为对照死亡率。

平均生长速率的计算：采用 SPSS 15.0 for Windows Evaluation Version统计软件中的One－way ANOVA进行处理，并选用LSD法分析各处理与对照的差异显著性。

2 结果与分析

2.1 70%吡虫啉对试虫的室内防治效果

吡虫啉对黑腹果蝇和厉眼蕈蚊幼虫的室内防治效果见表1。

表1 吡虫啉对黑腹果蝇和厉眼蕈蚊幼虫的室内防治效果

吡虫啉对黑腹果蝇幼虫和厉眼蕈蚊幼虫的室内防治效果差异较大。当药剂浓度达到140 μg·mL－1时，对黑腹果蝇幼虫室内防治效果达到90%以上，而当药剂浓度仅为3.5 μg·mL－1时， 对厉眼蕈蚊幼虫的室内防治效果就已达到90%以上。

2.2 70%吡虫啉对平菇、秀珍菇、双孢蘑菇和香菇菌丝生长的影响

吡虫啉对4种食用菌菌丝生长速率的影响见表2。

表2 吡虫啉对4种食用菌菌丝生长速率的影响

在预设的药剂浓度下，与对照相比，吡虫啉基本不影响平菇和秀珍菇菌丝的生长，但显著影响双孢蘑菇和香菇菌丝的生长。即使当药剂浓度降至 35 μg·mL－1时对双孢蘑菇和香菇菌丝的生长与对照相比仍具有显著的抑制作用。

2.3 70%吡虫啉在平菇和秀珍菇中的残留测定

吡虫啉在香菇和秀珍菇上的农药残留测定结果见表3。

表3 吡虫啉在香菇和秀珍菇上的农药残留测定

70%吡虫啉在施药4 d后在平菇和秀珍菇中均检测到残留， 分别为 0.04 mg·kg－1和 0.08 mg·kg－1， 但均未超过国内外相关的标准。

3 讨论

实验结果表明， 当吡虫啉浓度达到 140 μg·mL－1时，可以很好地控制厉眼蕈蚊和黑腹果蝇的危害，且对平菇和秀珍菇菌丝生长的影响不大；同时有报道，当吡虫啉浓度为 100 μg·mL－1时， 对另一种食用菌重要害虫黑粪蚊（Scatopse sp.）的防治效果在80%以上[14]，由此可以看出吡虫啉是一种良好的防治食用菌双翅目害虫的杀虫剂。但当吡虫啉浓度在35 μg·mL－1以上时，即显著抑制双孢蘑菇和香菇菌丝的生长，这可能与食用菌自身的耐药性等有很大的关系，因此可以通过降低吡虫啉的使用浓度研究其对双孢蘑菇和香菇菌丝生长的影响，找到一个合适的使用浓度，在厉眼蕈蚊发生为害较为严重时，用以控制该虫的为害，或者当双孢蘑菇和香菇上蚊蝇类害虫发生比较严重时，考虑在出菇间歇期使用该药剂。

本研究测定70%吡虫啉5 000倍液在平菇中4 d后的残留为 0.04 mg·kg－1， 而李怡萍等测定了 10%吡虫啉稀释1 500 倍在平菇中 5 d 后的残留为 0.041 mg·kg－1[14],胡清秀等测定10%吡虫啉稀释2 000倍液在平菇上的残留结果为未检出[15]，这些结果虽不矛盾，但可以看出它们之间存在一定的差异，这可能与残留检测的时间、检测方法、药剂残留动态和药剂来源等存在较大的关系，有待于进一步的研究。

本实验于室内条件下进行，与自然条件存在一定的差异，可能导致害虫防治效果与实际生产应用效果存在一定的差异。同时，本研究仅针对食用菌菌丝生长的影响做了相关研究，其对子实体分化以及产量等方面的影响有待更进一步的探究。

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