金银花和干姜对小鼠的毒性研究

蒲含林，姜 华，陈蓉蓉

中药的化学成分决定中药的作用和性质，微量元素是中药的重要有效成分，与中药的性质关系密切［1］。本研究以寒性中药金银花［2］、热性中药干姜［3］、平性中药甘草［4］为实验材料，制备其水提取物给小鼠饮用，观察其发生的生理病理变化，测定不同组织中相关元素的含量变化。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器 Perkin Elmer公司的电感耦合等离子体发射光谱(OPTIMA 2000 DV)。盐酸和高氯酸等试剂均为国产分析纯。中药金银花、干姜和甘草购自广州石牌百康源平价药房，实验用NIH小鼠(21±2)g，雌性，购自广东省医学实验动物中心，合格证号:2009A011。

1.2 动物分组及给药 将实验用的动物按体质量随机分成4组:正常对照组、金银花组、干姜组和甘草组，每组20只。正常对照组饮用自来水，其他实验组分别饮用自来水浸取的金银花、干姜和甘草的水溶液(浓度均为2 g/100 mL，80℃水浴2 h后过滤出溶液)，每2天换一次水和新浸取的各中药的水浸取液，连续饮用2周，饲料按正常饲养投放。

1.3 现象观察 每天下午定时观察试验动物的健康、进食和生存情况，并做好记录。

1.4 取材 于实验前的最后一天，停止给予饲料。开始实验时，脱颈处死小鼠，并取小鼠肝脏大叶的相同部位，用预冷的生理盐水洗净后，再用滤纸吸干;肾脏取出后，用预冷的生理盐水洗净，小心剥除外膜，从根部减去连接的血管，再用滤纸吸干;心脏取出后，用预冷的生理盐水洗净，再用滤纸吸干。

1.5 样品处理 在万分之一电子天平上精确称量所需样品的重量，尽可能使同一类样品的重量接近一致，用3∶1高氯酸比盐酸消化至澄清透明。金银花、干姜、甘草样品用去离子水洗净晾干后消化测定。

1.6 数据测定及处理 元素含量的测定用外标法，用电感耦合等离子体发射光谱测定。测定的元素有 Mn、Fe、Cu、Zn、Mg、Ca、P，用相同的方法测定中药金银花、干姜、甘草和饲料中相应元素的含量。数据用±s表示，采用组间t检验。

2 结果

2.1 试验动物存活数量变化趋势 对照组、金银花组、干姜组和甘草组小鼠的存活数量见图1。

2.2 试验动物的存活率 对4组小鼠的成活率进行统计，结果见表1。

2.3 试验小鼠不同组织中元素含量 结果见表2。

图1 不同条件下小鼠的存活数量

表1 试验小鼠的成活率统计

2.4 试验用药材和饲料中元素含量 见表3。

表2 小鼠饮用不同寒热属性中药水提液后，组织器官中部分元素的变化(±s，n=5)

表2 小鼠饮用不同寒热属性中药水提液后，组织器官中部分元素的变化(±s，n=5)

注:与正常组比较 *P＜0.05，＊＊ P＜0.01

器官 组别Mn Fe Cu Zn Mg Ca P肝脏 正常对照 1.18±0.47 396.8±19.5 3.69±0.38 21.07±1.62 226.0±12.50 37.14±2.40 2 818±101.8金银花 1.32±0.28 347.6±60.09* 4.15±0.38 26.29±4.20* 267.5±28.34＊＊ 37.72±2.56 3 578±180.9＊＊干姜 1.59±0.22* 331.3±25.11* 3.51±0.37 25.80±1.62* 231.7±10.88 37.97±3.31 3 018±168.9甘草 1.06±0.57 360.8±75.56 3.32±0.76 19.17±4.82 212.9±44.81 36.85±16.07 2 833±153.5肾脏 正常对照 1.49±0.17 173.5±27.21 4.35±0.16 20.71±0.66 208.0±6.33 57.53±3.36 3 213±93.55金银花 1.39±0.11 181.6±31.79 4.53±0.43 23.25±6.42 216.6±14.43 62.11±7.42 3 287±196.4干姜 1.56±0.08 168.4±29.20 4.25±0.19 23.07±2.64 218.1±4.48 64.2±6.10 3 257±154.9甘草 1.41±0.15 185.2±10.32 4.26±0.36 18.96±3.09 202.3±10.15 40.14±3.27 3 260±186.1心脏 正常对照 0.71±0.16 89.55±4.73 7.01±0.57 29.19±8.70 255.3±12.62 114.8±22.68 2 478±318.6金银花 0.62±0.05 92.10±5.32 7.03±0.87 35.24±3.65 246.8±10.54 56.87±11.05 2 576±213.7干姜 0.62±0.17 93.53±9.49 6.67±0.44 33.46±5.85 252.7±13.07 60.77±10.90 2 742±209.9甘草 0.62±0.06 89.45±7.59 6.65±0.36 23.10±0.79 240.6±7.95 36.95±10.06 2 690±137.2

表3 实验材料中相应元素的含量

3 讨论

本试验的目的是观察小鼠较长时间连续饮用金银花、甘草和干姜的水溶液是否会产生毒性反应。预实验中，金银花和干姜的浓度为3 g/100 mL以上时，干姜组小鼠饮水很少，3～5 d死亡率达到70%;金银花组饮水较干姜组稍多，但也大大少于空白对照组和甘草组，金银花组的死亡率在5 d前后达到90%。选用2 g/100 mL的浓度给予自由饮用时，试验小鼠的饮水量约为空白对照组和甘草组的1/2，在2周的试验周期中能保证动物存活数量。

笔者观察发现，开始分别饮用水提液后，金银花组和干姜组小鼠毛色开始暗淡，体质量明显下降。饮用干姜水提液的小鼠嘴部周围及鼻部明显发干发白，体毛干燥泛白;饮用金银花组的动物体毛暗黄，体形变瘦弱，活动减少。连续饮用提取液5 d左右时，金银花组和干姜组开始有小鼠死亡，且死亡率较高;正常对照组和饮用甘草组的小鼠生长存活情况正常。元素含量测定表明，小鼠体内肝、肾和心的部分元素含量发生了变化。饮用金银花后，肝脏组织中铜、锌、镁和磷的含量都显著增高，锰含量略增高，铁含量显著降低，肝脏的颜色明显变暗，形态无明显变化，脾脏明显变小。饮用干姜后，肝脏组织中锌、锰的含量显著增高，铁的含量显著下降，其余元素的含量变化不大，肝脏的颜色变灰，形态无明显变化，脾脏明显变小。饮用甘草后，肝脏组织中锰、铁、铜、锌、镁、钙、磷的含量变化均较小，与正常对照组比较，差异无统计学意义，肝脏、脾脏的颜色和形态均无明显变化。饮用金银花、干姜和甘草后，小鼠肾脏和心脏组织中锰、铁、铜、锌、镁、钙、磷的含量均有一定的变化，但与对照组比较，差异无统计学意义。结果显示，寒性中药金银花和热性中药干姜连续使用时，可能对机体有一定的毒性，其他寒性和热性中药是否有此结果尚待研究。

［1］ 黎晓敏，贾仁勇，王健，等.中药不同药性与无机元素关系的研究［J］.中国中药杂志，1997，22(8):502-504.

［2］ 何晶.金银花的药理作用及临床应用［J］.天津药学，2008，20(5):74-76.

［3］ 王梦，钱红美，苏简单.干姜醇提物的毒性研究［J］.中医药学报，2000，2:60-62.

［4］ 郑占虎，董泽红，佘靖.中药现代研究与应用(第3卷)［M］.北京:学苑出版社，1998:2568-2606.