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湿法冶金中胞外聚合物(EPS)的研究进展

2011-04-14陶琴琴刘峙嵘

湿法冶金 2011年1期
关键词:胞外生物膜湿法

陶琴琴,刘峙嵘

(东华理工大学化学生物与材料科学学院,江西抚州344000)

湿法冶金中胞外聚合物(EPS)的研究进展

陶琴琴,刘峙嵘

(东华理工大学化学生物与材料科学学院,江西抚州344000)

针对当前国内外关于胞外聚合物在湿法冶金中的研究状况,介绍了胞外聚合物的来源、组成、物化性质和提取方法,以及胞外聚合物在湿法冶金中的应用现状。胞外聚合物在湿法冶金过程中的作用形式主要是帮助矿物在水溶液中溶解、改变矿物表面化学性质和吸附冶金废水中的金属离子。

湿法冶金;胞外聚合物(EPS);冶金废水;应用

目前,随着矿物贫杂化、能源危机及环境污染的加剧,传统的冶金技术面临巨大挑战。生物湿法冶金技术具有工艺成本低、污染小、能有效开发低品位、难处理矿产资源的特点而成为研究热点[1]。随着研究的不断深入,一些微生物的胞外聚合物(Extracellular Polymeric Substances,EPS)在湿法冶金过程中的作用受到关注,它介导细菌和矿物的接触[2],改变矿物表面化学性质,帮助矿物在水溶液中溶解,吸附冶金废水中的金属离子,在湿法冶金的选矿和废水处理中发挥着重要作用。

EPS是指附着在细菌表面或围绕在细菌周围,水道、孔隙穿通其间,具有蘑菇状膜结构,用于自我保护和相互黏附的天然物质[3-4]。EPS在自然界中广泛存在,在细菌的黏附聚集、空间构型、细菌间信息交流、耐药性、抗毒性及细菌与外界物质的吸附、沉降、絮凝、脱水等各方面,都起着重要作用[5]。如在湿法冶金中,EPS用作硫化矿物的抑制剂,通过改变硫化矿物表面性质而影响矿物的可浮性;在环境工程中用于处理工业废水;在食品工业中用作食品添加剂和保鲜剂等;在生物学上被用于疾病预防和保健等[6-10]。EPS的来源、组成、物化性质和提取方法等得到了较广泛的研究,此文综述了近年来EPS在湿法冶金领域中的研究和应用现状。

1 EPS概述

1.1 EPS来源

EPS是微生物在特定环境条件下产生的高分子物质(分子质量>10 000)[11],它们或附着在细胞壁上(胞囊多聚物),或以胶体或溶解状态围绕在细胞周围的液相主体中(粘滞多聚糖)[12],在细胞外形成保护层,保护细胞免受外部环境的影响,并在饥饿环境下为微生物生长提供碳源和能量。EPS的来源主要有2种:一种是来自于细菌细胞本身的新陈代谢、细胞自溶产生的聚合物;另一种是来自微生物所处的周围环境。

1.2 EPS的组成

EPS是由荚膜、黏液层及其他表面物质组成[4],其化学组成比较复杂,与细菌的种类及其生存环境有关[13]。目前研究处理生活污水细菌的EPS较多,而研究浸矿、矿物浮选和冶金废水处理的细菌的EPS很少。

废水处理系统中,细菌的EPS成分比较复杂。其主要成分为多糖和蛋白质,约占EPS质量的70%~80%[14],含量较低的腐殖质、核酸、糖醛酸、脂类和氨基酸等也是EPS中常见的物质[15]。刘久义[16]在研究基质对生物膜组成和含量的影响中发现糖类占有比例最高。可是一些学者在研究时也发现,这些浸矿细菌产生的EPS与用于污水处理的细菌产生的EPS成分不大相同。T.Gehrke[2]在研究氧化亚铁硫杆菌的EPS对生物浸出的重要性时,利用气相色谱分析,发现EPS主要由脂肪酸和一些单糖组成,另外还含有三价铁离子。K.Harneit[1]对A.f菌株、A.t菌株和L.f菌株的EPS的化学分析结果表明,EPS由中性糖、葡萄糖醛酸、饱和脂肪酸和三价铁离子(若以二价铁离子或黄铁矿中培养)等组成,氧化亚铁硫杆菌和氧化硫杆菌产生的EPS分别含有40%~50%的糖和40%~65%的脂肪酸,氧化硫杆菌产生的EPS组成主要是二十烷酸,糖几乎不能测到。造成这些差异的原因可能是因为微生物种类或微生物所处的环境不同,也可能是因为研究者选用的EPS提取方法不同。

1.3 EPS物化性质

1)表面负电荷性。EPS中含有多种有机官能团,如羟基、羧基等,这些官能团在溶液中呈负电荷性。

2)吸附性。组成EPS的都是一些大分子物质,表面积很大,加上表面的多种极性和非极性基团,使EPS具有吸附能力。

3)絮凝性。组成EPS的官能团分子量较大,在适宜条件下,一个分子可以同时与几个悬浮颗粒通过离子键、氢键作用相结合,形成网状结构而迅速沉淀,从而表现出絮凝能力[17-18]。

4)亲水疏水性。蛋白质、腐殖质、尿酸是EPS中的疏水性组分,而糖类则是亲水性的主要成分[19]。

此外,EPS对其所附着的生物膜具有很多功能,如移动性、保护和维持作用等[20]。

1.4 EPS提取方法

作为研究EPS的重要前提,提取方法一直备受关注。好的EPS提取方法应具有3个特征:1)提取效率高,能够将EPS完全提取出来;2)提取过程中细胞分解少;3)不改变EPS的性质。经过多年的探索与尝试,现已研究出10多种提取方法。这些方法可大致分为2类:物理提取法和化学试剂提取法。

1.4.1 物理提取法

物理提取法主要是利用各种外力来增强EPS中各种成分在溶液中的溶解度,常用的有超声波法、超声离心法、蒸汽提取法、常规离心提取法等。由于EPS与细胞壁结合得很紧密,因而物理提取法的提取效率很低。

1)超声波法[21-22]。超声波法是利用超声波造成空穴,产生压力冲击,在冲击力作用下,提取生物膜的胞外聚合物。生物膜样品在超声波浴中超声处理10 min,在2 kg下离心10 min,可以除去细胞。

2)超声离心法[21,23]:该方法是超声法与离心法的结合。生物膜胞外聚合物在超声冲击力和重力场共同作用下,加速其各成分的溶解。活性污泥样品先被超声10 min后,在4℃、33 kg下离心10 min,可获取胞外聚合物。

3)蒸汽提取法[21]:蒸汽提取法是利用蒸汽提供的热量与压力增大活性污泥中各成分的运动速度,从而增大其在溶液中的溶解度,达到提取与分离目的。将生物膜样品置于高压消毒锅内10 min,趁热将其在8 kg下离心10 min。离心过程中,样品的温度降至15℃。

4)常规离心提取法[21-22]:离心法是在离心产生的重力场作用下,加速颗粒沉降速度。增大胞外聚合物各成分在水溶液中的溶解度,之后再把生物膜样品离心。

1.4.2 化学提取法

化学提取法主要是利用试剂中的离子或分子通过生物膜的内传质作用进入生物膜与EPS相接触,使EPS的大分子成为水溶性成分而被提取出来。常用的有氢氧化钠提取法、乙醇提取法、乙二胺四乙酸(EDTA)提取法、磷酸缓冲溶液提取法、三羟甲基氨基甲烷/盐酸(Tris/HCl)提取法、阳离子交换树脂提取法、甲醛-氢氧化钠提取法、戊二醛提取法等。

1)氢氧化钠提取法[24]:向离心管中加入5 mL处理后的活性污泥样品和2 mL、浓度为2 mol/L的NaOH溶液,定容至10 mL,于振荡器中20℃下振荡2.5 h,离心(8 kg,20 min)后,将上清液用0.45μm醋酸纤维滤膜过滤,则滤液中为分离得到的生物膜胞外聚合物。

2)乙醇提取法[25]:活性污泥样品中加入适量乙醇,混合均匀后放入密闭容器中,放置1~16 d,然后置于离心机中低速(1.8 kg)离心10 min,取上清液。

3)乙二胺四乙酸(EDTA)提取法[26]:向离心管中加入5 mL处理后的活性污泥样品和2 mL、2%的EDTA溶液,定容至10 mL,于振荡器中20℃条件下振荡5 h,离心20 min后,将上清液用0.45μm醋酸纤维素滤膜过滤,则滤液中为分离得到的生物膜胞外聚合物。

4)磷酸缓冲溶液提取法[27]:生物膜样品中加入一定量的磷酸缓冲溶液,在70℃的水浴中以100 r/min速度轻搅2~4 h。

5)三羟甲基氨基甲烷/盐酸(Tris/HCl)提取法:生物膜样品先加入一定量的Tris/HCl缓冲液,然后置于80℃水浴中1 h,以10 000 r/min转速离心30 min,将上清液用0.45μm膜过滤,得EPS溶液。

6)阳离子交换树脂提取法[28]:在生物膜样品中先加入一定量的提取缓冲液,然后加入Dowex离子交换树脂,在-4℃下搅动2 h,以10 000 r/min转速离心30 min,上清液经0.45μm膜过滤后便得到EPS溶液。

7)甲醛-氢氧化钠提取法[29]:首先加入少量甲醛对细胞进行巩固,有效阻止细胞自溶,再用氢氧化钠提取EPS,提取效果较好。甲醛-氢氧化钠提取法是目前普遍认为比较好的EPS提取方法,应用较广泛。

8)戊二醛提取法[30]:根据生物膜样品菌种的不同,加入适量3%的戊二醛溶液,在4℃下搅拌(100 r/min)过夜。以10 000 r/min转速离心30 min,将上清液用0.45μm膜过滤后便得EPS溶液。

化学提取法可以提高产率,却造成较多细胞死亡,使胞内物质外流并污染样品。目前并没有一种国际上公认的EPS提取标准方法。

2 EPS在湿法冶金中的应用

EPS在湿法冶金中主要有3种作用形式:1)帮助矿物在水溶液中溶解;2)改变矿物表面化学性质;3)吸附冶金废水中的金属离子。

2.1 帮助矿物在水溶液中溶解

有关EPS在湿法冶金中的应用研究,国外起步较早,研究的也比较多。研究发现:在A.f菌EPS与矿物作用时,EPS能降低矿物表面的疏水性,EPS中存在的某种特殊蛋白能作为初始吸附的受体,可促进细菌对矿物的吸附[31-32]。Hameit等[17]在研究生物浸矿过程中发现,胞外聚合物能够促使菌体细胞吸附到矿物表面,以Fe2+或黄铁矿培养的细菌所产生的EPS能够加快金属硫化物的溶解。细菌细胞吸附在金属硫化物表面,EPS充填在细胞的外膜和金属硫化矿物表面层之间,形成了10~100 nm的反应空间,在这里,EPS通过络合Fe3+与金属硫化矿物表面发生氧化还原作用,从而使金属硫化矿物的溶解过程得以发生[33]。傅建华等[34]首次采用电镜细胞化学法证实了T.f菌EPS的存在;T.f菌表面存在脂类、多糖和蛋白质等物质,由它们所形成的EPS是细菌的真正功能表面;EPS在细菌与矿物之间的复杂界面作用中起着极其重要的作用。王利等[13]在研究胞外聚合物对金属硫化矿物的生物作用时发现,糖醛酸残基与Fe3+的络合体对金属硫化矿的溶解起至关重要的作用,络合Fe3+的EPS在电子传递过程中可促使电子转移进入到细胞酶系统,使Fe2+更容易被氧化,从而使氧化还原过程持续进行,加速金属硫化矿物的溶解。目前,对EPS在生物氧化过程中是否起关键作用仍存在争议,但研究者对EPS是金属硫化物溶解、细菌代谢和发生(电)化学过程的公共媒介已达成共识。

2.2 改变矿物表面化学性质

细菌的EPS可以改变矿物表面的一些化学性质,在矿物浮选中可用作矿物抑制剂、絮凝剂。朱长亮等[5]从汉堡大学菌株收集中心得到的20株嗜酸氧化亚铁硫杆菌菌株中的4株分离出EPS,分别采用纯矿物和矿物混合物进行浮选试验,结果表明,提取的EPS对所研究的全部硫化物(黄铁矿、黄铜矿、方铅矿和闪锌矿)具有抑制作用。V.沃克德[35]研究了采用细菌胞外聚合物作抑制剂浮选硫化矿,其基本思路是,利用细菌胞外聚合物替代矿物浮选中的金属盐类和氰化物作为抑制剂,这样可以显著降低金属盐类和氰化物的消耗,不仅可以获得较好的经济效益,而且解决了使用金属盐类和氰化物带来的环境污染问题。卡伍德[36]利用羧甲基纤维素研究了多聚物从滑石表面上被解吸,被利用于浮选天然可浮性矿物。索马桑达兰等[37]研究指出,细菌及EPS可增强方解石的絮凝。

2.3 吸附冶金废水中的金属离子

与其他方面相比,近年来在环境工程中有关EPS的理论性研究较为深入。EPS在环境工程中的应用主要是去除废水中的重金属离子。我国硫化矿厂每年产生大量废水。在浮选工段,为了有效进行浮选和分离,往往在不同的作业中加入大量浮选药剂,如:捕收剂、起泡剂、活化剂、抑制剂、分散剂和絮凝剂。这些药剂在浮选排出的废水中均有所残留。另外,硫化矿在浮选过程中其金属离子和S2-会水解、氧化而以各种形式进入废水中,从而使浮选废水的成分相当复杂,外排后会影响周围水体。因此,如何合理利用冶金废水是我国矿物开采业面临的巨大难题。这些冶金废水具有水量大、悬浮物浓度高、重金属离子浓度高、p H值高、有机浮选药剂浓度高、废水起泡性强等明显特征[38]。

采用生物方法处理冶金废水大多是传统的活性污泥法和生物膜法,采用EPS的报道还比较少。EPS具有大量的阴离子基团,对重金属离子具有很强的亲和吸附性,有毒金属离子可以沉淀在细胞的不同部位或结合到EPS上,或被轻度螯合在可溶性或不溶性EPS上。M.Tsezos[39]利用死的微生物和胞外聚合物作为吸附剂分离226镭,试验发现,节杆菌属Viscosus产生的EPS对重金属离子的吸附能力比细胞内部积累大2~3倍,比不产生胞外聚合物的细菌吸附能力大几倍甚至十几倍[39]。张道勇等[40]研究了用藻菌生物膜去除污水中的Cd2+,结果表明,EPS主要由丝藻产生,Cd2+的去除效率及生物膜中Cd2+的积累量与EPS的含量之间相关性良好。董德明等[41]研究了长春南湖水中优势菌种的胞外聚合物对Pb2+、Cd2+、Mn2+的吸附规律,指出3种金属离子在胞外聚合物上的吸附均遵从Langmuir和Freundlich热力学方程,并指出Mn2+的存在会影响EPS对Pb2+、Cd2+的吸附。Liu Y.等[42]研究发现,从活性污泥中提取出的胞外聚合物对Zn2+、Cu2+和Cd2+有很强的吸附能力。因为绝大部分细菌的EPS都具有吸附重金属离子的能力,所以如果能够从剩余污泥中提取EPS治理冶金废水,不但可以治理冶金废水,还可以使剩余活性污泥减容减量,以废治废,意义重大。

3 结语

EPS在冶金和环境污染治理中扮演着十分重要的角色。目前,对于EPS的研究大多集中在其降污效应、提取方法、自凝絮效果方面,对于EPS的作用机制还不是很明确。在EPS的研究和运用方面还存在很多问题:1)作为EPS研究的基础,EPS的提取还没有统一标准,还没有找到一个EPS提取的标准方法;2)EPS的组分和结构非常复杂,目前还不能详尽阐明EPS的功能及每一组分在冶金中的具体作用,这就阻碍了对EPS在湿法冶金中作用机制的认识;3)目前国内普遍采用的生物湿法冶金法是微生物菌体冶金法,对于EPS的研究和应用还不是很广泛。

随着冶金技术的不断发展和对EPS研究的不断深入,EPS在湿法冶金领域的作用会越来越大,主要体现在:

1)更加全面了解EPS的成分、结构及其在湿法冶金和环境污染治理中的作用机制;

2)利用基因技术培育合适的菌株,获得大量的EPS;

3)EPS在冶金中代替微生物菌体,回收有价金属;

4)作为环保、廉价的生物药剂代替既昂贵又高污染的化学矿物浮选药剂;

5)除去矿物中的杂质,如除去煤中的硫、钢渣和锰矿石中的磷等;

6)从剩余污泥中提取EPS处理冶金废水,回收有价金属;

7)处理低品位难处理矿石、废水和回收有价金属等。

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Abstract:In accordance with the process of extracellular polymeric substances(EPS)in hydrometallurgy at home and abroad,the source,composition,physicochemical properties and extraction methods of EPS were described and the research status of EPS in hydrometallurgy was summarized.The functions of EPS in hydrometallurgy include helping minerals to dissolve,changing chemical properties of mineral surface,adsorbing metal ions in metallurgical wastewater.

Key words:hydrometallurgy;EPS;metallurgical wastewater;application

Progress of Extracellular Polymeric Substances(EPS)in Hydrometallurgy

TAO Qin-qin,LIU Zhi-rong
(Faculty of Chemistry,Biology and Materials Science,East China Institute ofTechnology,Fuzhou,J iangxi344000,China)

Q73

A

1009-2617(2011)01-0001-05

2010-05-11

江西省青年科学家(井冈之星)培养对象计划资助(2009DQ01600);江西省教育厅科学技术项目资助(GJJ10496);东华理工大学研究生创新基金资助,项目编号DYCA10022。

陶琴琴(1987-),女,江西进贤人,硕士研究生,主要研究方向为水体修复。

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