国外兔人工授精技术介绍

蒋美山，蒲华靖

（1.重庆市开县畜牧技术推广站，重庆 开县，405400；2.重庆市开县农业委员会，重庆 开县 405400）

1 所需的材料

1.1 试剂 凡士林，精液稀释液（4°C保存），促排3号。

1.2 设备 硅胶安全套，血细胞计算器，输精枪，集精瓶，输精管，显微镜，载玻片，烘箱，吸管，PVC管，注射器，带针头注射器，集精杯，保温箱，水浴锅，恒温箱，保温箱、试管架。

2 方法

2.1 组装假阴道

2.1.1 用玻璃棒将硅胶避孕套插入PVC管中。

2.1.2 翻转硅胶避孕套使其包裹在PVC管的两端，不断调整硅胶避孕套使其内部成“一”字型。

2.1.3 如果假阴道是冷的，须用50mL的注射器向避孕套和PVC管之间的空间注入 40～45mL 55℃温水。

2.1.4 把集精杯套在假阴道上。

2.1.5 立即使用或保存在55℃的烘箱备用。收集精液时，假阴道的温度应该在41～42℃，如果温度太冷，公兔将不会射精或者排尿。

2.2 收集精液

2.2.1 抓住台兔颈背皮肤将其送到公兔笼中，公兔将立即爬跨台兔。

2.2.2 将假阴道靠近公兔的阴茎，让其插入假阴道并射精。在交配结束时公兔从台兔背部翻滚下来说明射精成功，否则反之。

2.2.3 采精结束后，竖直采集器，取下集精杯，放到保温箱的试管架中。

2.3 精液检测 通过以下指标评估精液质量。

2.3.1 射精量。如果精液中有果冻样凝结物存在，须在测定前，用吸管将其移除。通过精液收集管上的刻度线可以直接读出精液的体积。标准值在0.3～2mL，平均值为0.8mL。

2.3.2 外观。精液呈乳白色表明是正常的，像水样的精液说明精子的浓度低，呈黄色说明有尿液存在，有棕色、红色或者颗粒存在说明精液被血污染。

2.3.3 活力。将吸管吸一滴精液在预热到38℃的载玻片上，再用盖玻片盖上，通过显微镜观察直线活动精子占精子总数的比例。正常精液精子的活力在0%～100%，但是仅仅活力在70%以上的精液可以用于人工授精。

2.4 精液稀释

2.4.1 在人工授精前1h，将精液稀释液在水浴锅里加热到35℃。

2.4.2 根据精液的质量（浓度和活力），用稀释液将精液稀释4-10倍（即加入3～9倍体积的稀释液），并装入在15mL的管子中。稀释过程注意：应以逐滴添加的方式向精液中加入稀释液，每次滴加完后，应轻柔地摇动混合，直到初始体积的2倍；加入更大剂量的稀释液直到想要的体积。

2.4.3 精液在稀释液中的质量评估。

2.4.4 评估稀释后精液的质量。注意在精液稀释后不要立即评估其质量，因为稀释本身会对精液产生短暂的不良影响，否则容易引起误判导致质量好的精液被丢弃。

2.5 人工授精

2.5.1 将稀释好的精液装入输精瓶，然后装载到输精枪上，再把输精管套在输精枪的前端。

2.5.2 输精前肌肉注射促排3号 0.8μg。

2.5.3 助手一手抓住母兔的耳朵和颈皮，另一只手轻轻按住背部，把母兔保定在桌面上。

2.5.4 输精者一手抓紧兔尾根皮肤，缓慢抬起母兔后驱并悬空，使外阴尽可能高地暴露，另一只手用枪头拨开母兔外阴，沿着脊背方向进枪输精。

2.5.5 缓慢按压输精枪活塞将精液注入（0.5mL），然后缓慢将输精枪拔出，并顺势在母兔臀部轻拍一下。