坎离砂中当归川芎的鉴别

郭 允,赵春杰,赵 旻,洪 博

(1.郑州市卫生学校,河南郑州 450005;2.沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳 110016)

坎离砂为经验方,来自北京市西域加工厂[1],由当归(3.75 g)、川芎(5 g)、防风(5 g)、透骨草(5 g)四味中药组成。该方是我国民间传统的一种外用热疗敷剂,主要利用其在使用过程中产生的热力,达到祛风散寒、活血止痛效应。用于风寒湿痹、四肢麻木、关节疼痛、脘腹冷痛等症。因制法简便、疗效好、无不良反应等优点,一直被《中华人民共和国药典》收录,在《中国药典》(2005)一部中仅用薄层色谱法对当归和川芎进行了鉴别[2],未见对该方质量控制方法研究的文献报道。该文对药典方法进行了改进,对当归、川芎同时进行鉴别,报告如下。

1 材料及方法

1.1 仪器 RE-52AA旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),BS110型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司),TG332A型微量分析天平(上海分析天平厂),TGL-16C台式离心机(上海安亭科学仪器厂),HH-2恒温水浴锅(金坛市新航仪器厂)。

1.2 材料 无水乙醇、冰醋酸、甲酸、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、乙醚等(分析纯,天津市康科德科技有限公司),实验用水为三重蒸馏水,阿魏酸标准品、当归、川芎对照药材均购自中国药品生物制品鉴定所。所用药材当归、川芎、防风、透骨草均购自沈阳成大方圆药房,并经沈阳药科大学中药学院孙启时教授鉴定。按处方自制三批坎离砂样品(批号071121、071122、071123)。

1.3 方法

1.3.1 供试品溶液的制备 取处方量样品18.75 g,用 8倍量的 80%乙醇溶液提取 2次,每次 1 h,合并两次提取液,过滤浓缩,浸膏用 50 ml蒸馏水完全溶解,转移至250m l分液漏斗中,用二氯甲烷萃取3次(60/40/30 ml),合并萃取液并用1 mol·m l-1HCL调pH约3[3],浓缩残渣用甲醇定容至2 m l,摇匀,离心3min(10 000 r·min-1),取上清液即得。

1.3.2 对照药材溶液的制备 取当归、川芎对照药材各1 g,分别加乙醚40m l,超声提取20min,过滤,挥干,残渣用甲醇定容至1ml,摇匀即得。

1.3.3 对照品溶液的制备 精密称取FA对照品适量,用甲醇溶解并稀释至0.2mg·L-1,即得。

1.3.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例取除当归、川芎外的其他药材,照“2.1”项下方法制备缺当归、川芎的阴性对照溶液。

1.3.5 操作方法 照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》2005年版一部附录ⅥB)实验,吸取上述 5种溶液各4μl,分别点于同一以0.3%羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以正己烷 -乙酸乙酯-甲酸(5∶5∶0.4)为展开剂,展开、取出、晾干,置紫外灯(365 nm)下检视。

2 结果 见图1。

图1 当归、川芎薄层色谱图

由图 1可知,供试品色谱中,在与当归、川芎对照药材及FA对照品色谱相应位置上,显相同颜色的斑点;阴性对照溶液色谱在相应位置上无斑点。结果表明,处方中其他药材不干扰当归、川芎鉴别,方法专属性强。

3 讨论

为得到较好的鉴别效果,比较了多种展开剂[4-6],如①甲苯-乙酸乙酯 -甲酸(5∶1∶0.1),②正己烷-乙酸乙酯(9︰1),③正己烷-乙酸乙酯-甲酸(4∶3∶0.1),④正己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(5︰5︰0.4),⑤正己烷-乙酸乙酯-甲酸(5︰5︰ 0.4)等。结果显示上述②展开系统供试品各斑点数明显少,不清晰,且 FA的斑点没显示出来;上述④展开系统 FA斑点有点拖尾;而以上述⑤为展开剂的TLC图谱,在紫外灯(365 nm)下检视,可以观察到当归、川芎对照药材所显的特征荧光斑点,其Rf值较适宜,斑点清晰圆整,分离情况良好。

该文定性方法快速、准确、专属性强、重现性好,可用于坎离砂的质量控制,也为其新剂型的研究开发奠定基础。

[1] 中医研究院中药研究所.中药制剂手册[M].北京:人民卫生出版社,1973.

[2] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)[S].2005年版.北京:化学工业出版社,2005.

[3] 宋金春,王杨杨,杨 鹤,等.高效液相色谱法同时测定古方生化汤中阿魏酸和川芎嗪的含量[J].中国医院药学杂志,2004, 24(7):419.

[4] 蒲晓辉,赵 辉,周玉新,等.肝宁颗粒中川芎的TLC鉴别与阿魏酸的HPLC测定[J].中国药房,2007,18(18):1 406.

[5] 张冬丽,王春蕾.除脂生发片的薄层鉴别[J].黑龙江中医药, 2006,49(3):51.

[6] 罗 毅,罗顺德,周本宏.益母草煎液中一种类阿魏酸成分的色谱鉴别[J].中药材,2002,25(10):713.