饲料中添加女贞子对镜鲤生长性能、消化酶活性以及肌肉品质的影响

唐玲,徐奇友,许红,王常安,王洋,张桐

(1.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070;2.上海海洋大学水产与生命学院,上海201306)

饲料中添加女贞子对镜鲤生长性能、消化酶活性以及肌肉品质的影响

唐玲1、2,徐奇友1,许红1,王常安1,王洋1、2,张桐1、2

(1.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070;2.上海海洋大学水产与生命学院,上海201306)

研究了饲料中添加女贞子Ligustrum lucidum对镜鲤Cyprinus carpio var.Specularis的生长性能、消化酶活性及肌肉品质的影响。试验共设5个处理组:A组为基础饲料空白对照组;B组,在基础饲料中添加200 mg/kg的大蒜素(纯度为25%);C、D、E组,在基础饲料中分别添加质量分数为0.5%、1.0%、1.5%的女贞子粉。每个处理组设置3个重复,每个重复组放10尾鱼(初始体质量为125.55 g±19.14 g)。试验共进行12周。结果表明:与空白组相比,添加女贞子粉试验组镜鲤的特定生长率和增重率显著降低(P＜0.05);女贞子粉对镜鲤中肠和后肠消化酶的活性均没有显著影响(P＞0.05);除D组外,其它试验组镜鲤前肠淀粉酶的活性显著提高(P＜0.05);各试验组镜鲤前肠蛋白酶的活性均无显著差异(P＞0.05);女贞子试验组镜鲤肌肉的持水能力和D组的pH1值显著降低(P＜0.05),对肌肉营养成分无显著影响。

镜鲤;女贞子;生长性能;消化酶活性;肌肉品质

近年来,随着水产养殖业规模化、集约化的普及,养殖中所使用的水产动物饲料添加剂种类和数量(抗生素、促生长剂、化学合成物)不断增加,一些具有副作用的添加剂既危害人类健康,又污染环境。寻找能替代抗生素、激素的无公害绿色饲料添加剂已成为生产无公害水产品的当务之急[1]。中药女贞子系木犀科植物女贞子Ligustrum lucidum的干燥成熟果实,是中国传统的扶正固本药物,分布较广,主要产于华东、中南、西南等地区。《神农本草经》将女贞子列为上品,谓其“味苦平,主补中,安五脏,养精神,除百病”。李时珍谓其“果实强阴健腰膝,变白发,明目”。《中国药典》2005版记载其功能与主治“滋补肝肾,明目乌发。用于眩晕耳鸣,腰膝酸软,须发早白,目睛不明”[2]。女贞子中含有多种化学成分:齐墩果酸、木樨草素-葡萄糖苷、槲皮苷、甘露醇及己六醇等,另外还含有多糖、挥发油及多种微量元素等[3]。据石莎莉等[4]报道,饲料中添加质量分数为0.5%和1.0%的女贞子能促进产蛋鸡生长性能和提高免疫能力。马得莹等[5]的研究表明,饲料中添加质量分数为1.0%的女贞子能显著提高产蛋鸡的抗应激能力和产蛋率。目前关于饲料中添加女贞子对水产动物影响的研究尚未见报道。本试验中,作者用添加女贞子的饲料饲喂镜鲤Cyprinus carpio var.Specularis 12周,研究了女贞子对镜鲤的生长性能、消化生理以及肉质的影响,旨在为综合评价女贞子对镜鲤的药用价值和营养价值,为开发和利用女贞子提供参考资料。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用镜鲤取自黑龙江水产研究所松浦实验站,体质量为(125.55±19.14)g。

女贞子购于哈尔滨中药材批发市场。经测定,女贞子中粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分的质量分数分别为8.15%、12.41%和5.49%。

1.2 方法

1.2.1 试验设计及日粮组成 试验前先将300尾

大小相近、体质健康的镜鲤暂养两周,开始试验前停食24 h,称量每尾鱼的体质量并测定体长。选择120 g左右的镜鲤150尾,随机放到水族箱(100 cm×50 cm×50 cm)中。试验分为5组:A组为基础饲料空白对照组;B组,在基础饲料中添加200 mg/kg的大蒜素(纯度为25%);C、D、E组,在基础饲料中分别添加质量分数为0.5%、1.0%、1.5%的女贞子粉。每组设3个重复,每个重复组放10尾鱼。基础饲料的配方(均为质量分数,%)为次粉42.00,鱼粉6.00,豆粕17.50,棉粕12.50,玉米蛋白12.00,豆油+鱼油4.00, NaH2PO42.00,羧甲基纤维素钠0～1.50,添加剂0～1.50,微量元素0.20,维生素0.30,胆碱0.20,MgSO40.30。

每千克日粮微量元素和维生素预混料中包括:维生素C 0.1 mg,维生素E 60 mg,维生素K 5 mg,维生素A 15 000 IU,维生素D33 000 IU,维生素B115 mg,维生素B230 mg,维生素B615 mg,维生素B120.5 mg,Fe 25 mg,Cu 3 mg,Mn 15 mg, I 0.6 mg,Mg 0.7 g,烟酸175 mg,叶酸5 mg,肌醇1 000 mg,生物素2.5 mg,泛酸钙50 mg,防霉剂0.05 mg。

基础饲料的营养成分(均为质量分数):粗蛋白29.01%,粗脂肪5.21%,粗灰分5.54%,Ca 0.59%,P 1.11%,Lys 1.43%,Met 0.42%。

将饲料原料充分混匀后用绞肉机制成5 mm左右的颗粒,置于阴凉通风处晾干,室温下保存待用。饲养试验共进行12周,每两周称量一次试验鱼的体质量。每天投喂2次(9:00和15:00),按鱼体质量的3%投饵。试验在黑龙江水产研究所水产车间室内循环的水族箱中进行,24 h不间断充气供氧。每天换水量为1/2,注入已曝气处理的自来水。试验期间,水温为24℃左右,溶氧为5.5～6.5 mg/L。

1.2.2 样品采集及分析 饲养试验结束停食24 h后采样,每一个处理组随机取12尾鱼,称量每尾鱼的体质量并测定体长。解剖鱼体腹部取出内脏,分别将肠道、肝胰脏、脾脏、肾脏剥离出来,用质量分数为0.65%的生理盐水冲洗,用吸水纸将表面液体吸干,称重并分别计算脏器指数。将肠道分离成前、中、后肠三段,加入预冷的生理盐水,按1∶9稀释,用高速匀浆机匀浆,再以4 000 r/min离心15 min,弃沉淀,将组织上清液于-40℃下保存,用于测定消化酶的活性。剥去鱼体表面鱼皮,取两侧背肌用于营养成分和肉质的测定。

1.2.3 指标的测定方法 肠道消化酶活性的测定:用双缩脲试剂测定酶液中总蛋白质的含量;用碘-淀粉比色法测定淀粉酶的活性;用福林-酚法测定蛋白酶的活性;用甘油三酯被分解浊度减低法测定脂肪酶的活性。

淀粉酶活力单位的定义:组织中每毫克蛋白在37℃下与底物作用30 min,水解10 mg淀粉为1个淀粉酶活力单位。

蛋白酶活力单位的定义:在37℃下每分钟水解酪蛋白产生1 μg酪氨酸为一个酶活力单位。

脂肪酶活力单位的定义:在37℃条件下,每毫克蛋白在反应体系中与底物反应1 min,每消耗1 μmol底物为一个酶活力单位。

肌肉品质的测定:采用105℃烘箱干燥法测定肌肉中的初水分;用凯氏定氮法(总氮×6.25)测定粗蛋白质含量;用索氏抽提法(以乙醚为抽提液)测定粗脂肪含量;用马福炉灼烧法(550℃)测定粗灰分含量。

将新鲜鱼肉用质量分数为0.65%的生理盐水按1∶9稀释,然后用高速匀浆机粉碎成糜烂状,用pHS-25型pH计测定肉样的pH(记为pH1),将余下的肉样置于冰箱(4℃)中贮存24 h后再测定pH(记为pH24)。

用嫩度仪(型号CLM-3B)在肌肉相同部位进行剪切,测定肌肉的嫩度。每尾鱼取1 g左右的肌肉先称重(W1),然后放入铺有吸水纸的一次性试验管中,用离心机以3 500 r/min离心5 min,取出肌肉块吸干表面水分称重(W2),按以下公式计算持水能力:

1.3 计算公式及数据处理

生长指标与生物学性状的计算公式如下:

增重率=(Wt-W0)/W0×100%,

肥满度=Wt/L3t×100,

饲料系数=Wf/(Wt-W0),

蛋白质利用效率=(Wt-W0)/(Wf×P),

内脏指数=Wv/Wt×100%,

其中:Wt为试验结束时鱼体质量(g);W0为试验开始时鱼体质量(g);Wf为饲料投喂总量(g); Wv为鱼内脏质量(g);Lt为试验结束时的鱼体体长(cm);P为饲料中所含蛋白质量分数(%);t

为饲养时间(d)。

试验数据采用平均值±标准差表示,采用SPSS 11.5软件进行统计分析,用Duncan’s进行多重比较。

2 结果

2.1 女贞子对镜鲤生长性能的影响

从表1可见:对照组镜鲤的终质量为286.31 g,特定生长率为0.98%/d,增重率为128.69%,大蒜素组(B组)与对照组均没有显著差异(P＞0.05),添加女贞子的3个试验组(C、D、E组)镜鲤试验结束后体质量、特定生长率、增重率均显著降低(P＜0.05),其增重率分别降低17.9%、 11.09%、15.95%;C、D、E组的饲料系数与对照组没有显著差异(P＞0.05),B组的饲料系数比对照组显著降低(P＜0.05);各试验组蛋白质利用率以及内脏指数均无显著差异(P＞0.05)。

表1 女贞子对镜鲤生长性能的影响Tab.1 Effects of Fructus Ligustri Lucidi on growth performance in mirror carp

2.2 女贞子对镜鲤消化酶活性的影响

女贞子对镜鲤消化酶活性的影响结果见表2。从表2可见:饲料中添加女贞子对镜鲤中肠和后肠消化酶活性均无显著影响(P＞0.05),仅对前肠消化酶有影响,其中D组镜鲤前肠淀粉酶活性与对照组没有显著差异(P＞0.05),C、E组前肠淀粉酶活性显著提高(P＜0.05);各试验组镜鲤前肠的蛋白酶和脂肪酶活性与对照组均无显著差异(P＞0.05)。

表2 女贞子对镜鲤消化酶活性的影响Tab.2 Effects of Fructus Ligustri Lucidi on digestive enzyme activities in mirror carpU/mg

2.3 女贞子对镜鲤肌肉品质的影响

女贞子对镜鲤肌肉营养成分以及肉质的影响见表3。与对照组相比,各试验组镜鲤肌肉中的持水能力显著降低(P＜0.05);D组镜鲤肌肉的pH1值显著降低(P＜0.05);各试验组镜鲤肌肉中的基本营养成分均无显著差异(P＞0.05)。

3 讨论

3.1 女贞子对镜鲤生长性能的影响

女贞子中含有的多糖、维生素、挥发油、苷类、生物碱、有机酸等生物活性成分,可刺激畜禽生长,维持动物体内环境正常平衡,从根本上保

护、协调畜禽的整体健康,调节体内有益微生物群落,充分发挥和提高机体本身预防疾病的潜在能力。女贞子中含有氨基酸、矿物元素、蛋白质、未知生长调节因子等多种营养物质,可补充饲料的营养价值。从上述两方面为动物生长提供营养物质,促进生长,提高生产性能。王安琪等[6]的研究表明,在饲料中添加质量分数为0.2%的女贞子提取物,能提高母鸡的生产性能,提高产蛋率和入孵蛋重,通过母体营养调控提高雏鸡早期的免疫功能。郭晓秋等[7]研究发现,在日粮中添加质量分数为0.2%和0.4%的女贞子提取物,均可提高1～4周和5～7周肉仔鸡的日增重,降低料肉比,但差异均不显著。

表3 女贞子对镜鲤肌肉品质的影响Tab.3 Effects of Fructus Ligustri Lucidi on muscle quality of mirror carp

本试验结果表明,添加女贞子的试验组未能促进镜鲤的生长,这与以上报道不一致。由于女贞子在鱼类饲料中的应用尚未见报道,因此本试验添加剂量仅参考前人对畜禽的研究而设定。然而结果显示,在饲料中添加质量分数为0.5%、1.0%、1.5%的女贞子粉并不能促进镜鲤的生长,可能是由于女贞子的添加剂量超出了促进镜鲤生长的范围,也可能是由于女贞子中有效成分与饲料中某些营养成分发生了拮抗作用。如果饲料中添加女贞子的质量分数小于0.5%,是否会促进镜鲤得生长,还有待进一步研究。

3.2 女贞子对镜鲤消化酶活性的影响

本试验结果表明,添加女贞子对镜鲤消化道中肠和后肠消化酶活性各组均无显著影响。仅对前肠消化酶有影响,其中C、E组(女贞子添加量为0.5%和1.5%)镜鲤前肠的淀粉酶活性显著提高。女贞子仅能提高前肠淀粉酶的活性,促进消化道中淀粉的消化,但由于鱼体对糖类的利用效果不佳[8],因此并不能达到促进镜鲤生长的效果。总体来说,女贞子未能提高消化酶活性,这可能与镜鲤的体质、年龄及体质量等有关。由于水生动物生存环境的特殊性,其摄食要受天气、温度、水体环境等多种因素的影响[9]。

3.3 女贞子对鱼体肌肉品质的影响

大量研究表明,女贞子可以显著提高鸡肉鲜味,改善鸡肉口感。在基础饲料中添加女贞子水提取物可改善肉鸡的部分营养成分(蛋白质、脂肪),降低肉鸡的腹脂率;饲料中添加质量分数为0.1%、0.2%的女贞子提取物,可缓解鸡肉中pH的下降程度,而添加质量分数为0.4%的女贞子水提物可改善鸡肉的剪切力[10]。王环宇[11]的研究结果表明,饲料中添加质量分数为0.2%的女贞子萃取物,可显著增加鸡肉中肌苷酸的含量,改善鸡肉的风味和口感。

动物为了正常的生理活动必须建立具有适合酸碱度的体液环境,机体在代谢过程中,通过血液缓冲系统的作用调节体内环境的pH值,使其维持在正常范围。当动物放血后,其机体平衡被打破,血液缓冲系统逐渐失去作用,约1 h肌肉组织的pH值逐渐减低。这是由葡萄糖在酵解酶的作用下产生乳酸以及ATP在肌凝蛋白酶的作用下释放出正磷酸引起的[12]。本试验结果表明,添加女贞子并未能改善鱼体的营养成分,反而显著降低了肌肉的持水能力,D组(女贞子添加量为1.0%)镜鲤肌肉的pH1值比其它试验组显著降低。这表明饲料中添加质量分数为1.0%的女贞子,其有效成分进入鱼体之后可能加速了鱼体肌肉的糖酵解以及ATP的分解,使肌肉的pH降低;在发生这些化学反应的同时也消耗了鱼体内的水分,从而使肌肉持水能力下降。这与以上的报道结果不一致。可能是由于女贞子的成分复杂,各种成分综合发挥作用,且在不同季节、地区和不同时期采集的女贞子其有效成分相差很大,因而难以对其进行准确的药效评

价[13-14]。加之前人报道的均是对畜禽的研究,对鱼类的研究仍属于探索性试验。

女贞子作为天然植物添加剂对其水产动物的生长是否有促进作用,还有待进一步研究。

[1] 吴梅秀.中草药在水产养殖中的应用前景[J].畜牧兽医杂志, 2008,27(2):64-66.

[2] 杨曦,蒋桂华.女贞子的研究开发现状与展望[J].时珍国医国药,2008,19(12):2987-2990.

[3] 卢晓沅,陈志良,王春霞.女贞子化学成分及其药理作用研究概况[J].中药材,2006,29(6):625.

[4] 石莉莎,单安山,张玮,等.女贞子对蛋鸡育成期生长发育和免疫功能的影响[J].东北农业大学学报,2009,40(10):79-84.

[5] 马得莹,单安山.女贞子、五味子、四君子汤、大豆黄酮和黄霉素对蛋鸡脂质稳定性的影响[J].动物营养学报,2004,16(4): 39-43.

[6] 王安琪,单安山,陈鹏.日粮中女贞子提取物对母鸡生产性能和子代新城疫抗体效价的影响[J].饲料工业,2008,29(22):1 -3.

[7] 郭晓秋,单安山,赵云,等.女贞子水提物对AA肉仔鸡抗氧化指标的影响[J].动物营养学报,2007,19(1):81-85.

[8] 林浩然.鱼类生理学[M].广州:广东高等教育出版社,2004.

[9] 伍莉,陈鹏飞,罗绍禄,等.不同添加剂对斑点叉尾鮰肠道蛋白酶、淀粉酶活力的影响[J].饲料研究,2002(1):4-7.

[10] 杨银平,单安山.女贞子作为饲料添加剂应用于畜禽的研究[J].黑龙江畜牧兽医,2009(6):76-77.

[11] 王环宇.女贞子萃取物对肉仔鸡抗氧化机能及肉质风味的影响[D].哈尔滨:东北农业大学,2007.

[12] 苏建军.肌肉pH的变化及其意义[J].肉类工业,1997(2): 43-45.

[13] 郑秋珊,徐奇友.紫丁香叶对史氏鲟生长及血浆生化指标的影响[J].大连水产学院学报,2009,24(2):171-176.

[14] 李群道,单安山,马得莹,等.女贞子、五味子与寡糖配伍对肉鸡抗氧化功能和血液生化指标的影响[J].动物营养学报, 2005,17(1):45-48.

Effects of dietary Fructus Ligustri Lucidi on growth performance, digestive enzyme activities and flesh quality in mirror carp

TANG Ling1,2,XU Qi-you1,XU Hong1,WANG Chang-an1,WANG Yang1,2,ZHANG Tong1,2
(1.Heilongjiang River Fisheries Research Institute,Chinese Academy of Fishery Sciences,Harbin 150070,China; 2.Fisheries and Life Science College,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China)

This trial was investigated the effects of dietary Fructus Ligustri Lucidi(Ligustrum lucidum)on growth performance,digestive enzyme activities and flesh quality in mirror carp(Cyprinus carpio var.Specularis).The fish with initial body weight of(125.55±19.14)g were fed five diets including the basic diet(Group A),addition of 200 mg/kg 25%allicin(Group B),addition of 0.5%(Group C),1.0%(Group D),and 1.5%Group E) Fructus Ligustri Lucidi powder for 12 weeks with triplicate groups of each 10 individuals.The results showed that there were significantly lower final weight,specific growth rate and weight gain rate in the carp fed the diets containing Fructus Ligustri Lucidi powder than those in the fish of the control group(P＜0.05).The fish fed the diet containing Fructus Ligustri Lucidi powder had significantly higher amylase activity in the foregut(P＜0.05)except in Group D,and significant difference in digestive enzyme activity in midgut and hindgut were observed(P＞0.05). There was no significant differences in protease activity among the trial groups.The fish fed the diets containing Fructus Ligustri Lucidi powder had significantly lower moisture and pH1 value in the muscle of Group D(P＜0.05),and no significant difference in the nutritional composition of the flesh among groups were obtained(P＞0.05).

mirror carp;Ligustrum lucidum;growth performance;digestive enzyme activity;flesh quality

S963.73

A

2095-1388(2011)06-0560-05

2010-12-15

现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(Nycytx-49-10);黑龙江省科技支撑项目(GA07B201);黑龙江水产研究所基本科研专项(2009HSYZX-YZ-01);黑龙江博士后科研启动基金资助项目(LBH-Q09001)

唐玲(1985-),女,硕士研究生。E-mail:tangling2008v@yahoo.cn

徐奇友(1969-),男,博士,研究员。E-mail:xuqiyou@sina.com