饲粮蛋白质水平对冬毛期水貂部分血清生化指标的影响

张铁涛 张志强 刘汇涛 高秀华＊ 杨福合 邢秀梅

(1.中国农业科学院饲料研究所,北京 100081;2.吉林省特种经济动物分子生物学省部共建实验室,吉林 1321093;3.中国农业科学院特产研究所,吉林 132109)

水貂是一种严格的肉食性动物,其消化道短,对饲粮中蛋白质的需求较高,以动物性饲料为主[1-2]。蛋白质是动物体内除水分外含量最多的物质,它不仅是生物体的组成部分,而且在体内执行着各种各样的生物学功能。蛋白质是影响水貂生长发育、皮毛成熟的重要营养因素,血清生化指标能够适当反映水貂对饲粮蛋白质的利用情况[3-4],因而测定水貂在饲喂不同蛋白质水平饲粮下血清生化指标的变化有助于研究动物机体内的代谢变化规律。国内外专家以新鲜饲料饲喂水貂进行了部分研究[1-4],而以干粉料作为饲粮来研究蛋白质水平对水貂血清生化指标的影响还未见报道。因此,本试验基于冬毛生长期水貂对蛋白质的需求,拟以干粉料替代新鲜饲料,研究饲粮蛋白质水平对水貂血清含氮物质、氮代谢和抗氧化能力的影响。

1 材料与方法

1.1 试验饲粮

参照 NRC(1982)[5]水貂和狐狸营养需求量设计饲粮的蛋白质水平分别为 28%、30%、32%、34%、36%和 38%。试验饲粮组成及营养水平见表1。

表 1 试验饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the experimental diets(air-dry basis) %

1)每千克预混料含有 Contained the following per kg of prem ix：VA 1 000 000 IU,VD3200 000 IU,VE 6 000 IU,VB1600mg,VB2800m g,VB6300mg,VB1210mg,VK3100mg,VC 40 000mg,烟酸 niacin acid 4 000mg,泛酸 pantothenic acid 1 200mg,生物素 biotin 20mg,叶酸 folic acid 80mg,胆碱 choline 30 000m g,Fe 8 200mg,Cu 800 mg,Mn 1 200m g,Zn 5 200mg,I 50mg,Se 20mg,Co 50mg。

2)粗蛋白质、钙、总磷为测定值,其他为计算值。CP,Ca and TPweremeasured values,while others were calculated values。

1.2 试验动物与饲养管理

选择 90日龄、平均体重为(1.13±0.14)kg的健康公貂 60只,随机分为 6组,每组 10个重复,每个重复 1只,单笼饲养。6组水貂分别饲喂蛋白质水平为 28%(Ⅰ组)、30%(Ⅱ组)、32%(Ⅲ组)、34%(Ⅳ组)、36%(Ⅴ组)和 38%(Ⅵ组)的试验饲粮。预试期 7 d,正试期 90 d。试验开始前,对水貂进行常规免疫接种,每天 08：00和 15：00各饲喂 1次,自由饮水。

1.3 血清制备

养殖试验结束后,各试验组分别选择 6只水貂,心脏采血,并用盐酸琥珀胆碱心脏注射处死。采血时间为 07：40—09：30,每只采血 10m L,装于促凝管中,静置析出血清后 3 500 r/m in、4～8℃离心 10min,血清分装于 1.5m L的 Eppendorf管中,于 -80℃保存备用。

1.4 测定指标及方法

尿素氮(UN)采用二乙酰一肟法测定,总蛋白(TP)采用双缩脲法测定,白蛋白(ALB)采用溴甲酚绿法测定,球蛋白(GLOB)采用总蛋白与白蛋白的差值表示,谷草转氨酶(GOT)采用赖氏法测定,谷丙转氨酶(GPT)采用赖氏法测定,总氨基酸(TAA)采用铜离子络合法测定,超氧化物歧化酶(SOD)采用抽提法测定,丙二醛(MDA)采用硫代巴比妥酸法测定,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)采用非酶促反应法测定。测定仪器主要有奥普森AM S-18全自动生化分析仪和 Analytik jena Specord 50分光光度计。

1.5 数据处理

结果以平均值 ±标准差表示,试验数据采用SPSS 16.0软件进行统计分析,采用 One-way ANOVA进行差异显著性检验,其中 P＜0.05为差异显著,P＜0.01为差异极显著。

2 结 果

2.1 血清含氮物质

由表 2可以看出,Ⅲ组水貂的血清白蛋白含量极显著高于Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ组(P＜0.01),显著高于Ⅰ和Ⅵ组(P＜0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组间差异不显著(P＞0.05);血清球蛋白和总蛋白含量的差异性趋势变化相同,均为Ⅲ组极显著高于其他试验组(P＜0.01),其他试验组间差异均不显著(P＞0.05);在血清总氨基酸含量上,Ⅳ组极显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组(P＜0.01),Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组间以及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ和Ⅵ组间差异均不显著(P＞0.05)。

表 2 血清含氮物质Table 2 Nitrogen heterocyclic compounds in serum

2.2 血清氮代谢指标

由表 3可以看出,Ⅲ组水貂的血清尿素氮显著高于Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ组(P＜0.05),其他试验组间差异不显著(P＞0.05);Ⅴ组水貂的血清谷草转氨酶活性显著高于Ⅱ和Ⅳ组(P＜0.05),与Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ组相比差异不显著(P＞0.05),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅵ组间差异亦不显著(P＞0.05);Ⅳ组水貂的血清谷丙转氨酶活性显著高于Ⅲ组(P＜0.05),与Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ组相比差异不显著(P＞0.05)。

表 3 血清氮代谢指标Table 3 Nitrogen metabolism indices in serum

2.3 血清抗氧化指标

由表 4可以看出,各试验组间血清丙二醛含量差异不显著(P＞0.05);在血清超氧化物歧化酶活性上,Ⅴ组极显著高于Ⅱ和Ⅲ组(P＜0.01),Ⅳ和Ⅵ组显著高于Ⅱ组(P＜0.05),Ⅲ组极显著低于Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ组(P＜0.01);Ⅳ组水貂的血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于Ⅵ组(P＜0.05),其他试验组间差异均不显著(P＞0.05)。

表 4 血清抗氧化指标Table 4 Antioxidant indices in serum

3 讨 论

3.1 饲粮蛋白质水平对血清含氮物质含量的影响

本试验中,饲粮蛋白质水平增加到 32%后,血清白蛋白、球蛋白和总蛋白含量不再随着饲粮蛋白质水平的增加而提高。血清总蛋白是机体蛋白质的一个来源,用于修补组织和提供能量,在一定程度上也代表了饲粮的蛋白质水平以及动物对蛋白质的消化吸收程度。血清蛋白质(白蛋白和球蛋白以及总蛋白)的含量与动物对饲粮蛋白质的摄取量有关,同时受内源蛋白质分解代谢、血管内外及细胞外液增加等众多因素的影响[6]。余红心等[7]的研究表明,云南武定鸡血清总蛋白、白蛋白含量随着饲粮蛋白质水平的增加而提高。水貂在饲粮营养水平不足或禁食条件下,血液中的单核细胞和淋巴细胞数量下降,出现免疫抑制现象[8],免疫球蛋白是组成血清总蛋白的一部分,免疫球蛋白的含量降低也能导致血清总蛋白含量的降低。Tuitoek等[9]研究表明,饲粮中氨基酸比值一定时,降低饲粮中蛋白质水平会对试验动物的蛋白质代谢产生明显影响。本试验中,32%蛋白质饲粮组水貂的血清蛋白质含量显著高于其他试验组,可能是由于蛋白质的氧化分解引起的;28%蛋白质饲粮组水貂除与 32%蛋白质饲粮组水貂差异显著外,与其他试验组未有显著差异,表明 28%蛋白质饲粮组水貂未出现营养失衡现象。何欣等[10]以氨基酸平衡饲粮对猪进行试验,结果发现,提高饲粮中蛋白质水平有可能打破了原有的氨基酸的平衡模式。本试验中,水貂血清总氨基酸含量在饲粮蛋白质水平达到 34%时达到最高值,这可能是由于其氨基酸比例适宜所致。

3.2 饲粮蛋白质水平对血清氮代谢的影响

血清尿素氮是衡量动物体内蛋白质代谢和氨基酸平衡的一个重要指标。通常,较低的尿素氮含量表明氨基酸平衡较好,机体蛋白质合成率较高[11]。血清尿素氮过高,则会使氮通过尿液排出体外,降低饲粮中氮的利用率,其含量可以反映动物蛋白质代谢状况,并可作为蛋白质沉积的一个指标[12]。在可消化氨基酸适当范围内,增加氨基酸的水平能够降低血清尿素氮含量,继续增加氨基酸采食量,血清尿素氮含量增加[13]。谷草转氨酶和谷丙转氨酶是动物体内重要的转氨酶,在非必需氨基酸的合成和蛋白质分解中起着重要的中介作用,其活性反映了蛋白质合成和分解代谢的状况[14]。转氨酶在机体主要起转氨基作用,使氨基酸生成相应的 α-酮酸后转变成糖、脂、氨基化以及氧化供能等。转氨作用引起的谷氨酰胺浓度升高会增加 N-乙酰谷氨酸的合成,从而激活氨基甲酰磷酸合成酶Ⅰ,加速氨基甲酰磷酸合成,推动尿素循环。谷草转氨酶和谷丙转氨酶较高的活性与氨基酸的代谢强度相关[15]。本试验中,34%蛋白质饲粮组水貂血清尿素氮含量较低,而谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性较高,表明该组水貂的氨基酸代谢强度高,有利于蛋白质的合成过程。

3.3 饲粮蛋白质水平对血清抗氧化能力的影响

机体在代谢过程中产生大量超氧阴离子自由基(O2-◦),该自由基是一种强氧化剂,会对机体产生损伤,而超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶可催化◦还原为减少◦对机体的损伤[16]。丙二醛是 O-2◦攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化反应后产生的。丙二醛的量常可以反映机体内脂质氧化的程度,间接的反映出细胞损伤的程度。超氧化物歧化酶和谷胱甘肽氧化酶是消除自由基的重要物质,其活性的高低间接反映了机体清除氧自由基的能力。本试验中,各试验组水貂的超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性与丙二醛含量呈现一定的相关性,饲粮蛋白质水平达到 34%时,抗氧化物质活性相对较高,细胞损伤程度相对较低。

4 结 论

冬毛期水貂的饲粮蛋白质水平达到 34%时,机体具有相对较高的蛋白质合成效率和较强的抗氧化能力。

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