活络效灵丹对异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血的影响*

仰 薇，施 婧，韩向东

心肌缺血是指各种原因引起冠状动脉血流量降低，致使心肌氧等物质供应不足和代谢产物清除减少的临床状态。活络效灵丹是活血化瘀的经典方剂，出自清代名医张锡纯的《医学衷中参西录》，具有活血祛瘀、通络止痛的作用，主治气血瘀滞、心腹疼痛、腿臂疼痛、跌打瘀肿、内外疮疡以及癥瘕积聚等，多用于伤科病证。但近年开始应用与治疗冠心病等心肌缺血性心脏病，但尚缺乏系统的抗心肌缺血实验。本论文采用异丙肾上腺素诱导的急性心肌缺血大鼠模型，考察活络效灵丹对抗心肌缺血的作用。

1 材料与方法

1.1 动物

SD雄性大鼠，清洁级，体质量200g～250g，由上海中医药大学实验动物中心提供(许可证号SCXK(沪)2005-2007)。

1.2 药物

活络效灵丹水煎液，上海中医药大学方剂实验室制备;血栓心脉宁片，吉林华康药业股份有限公司(批号080909);0.9%生理盐水，上海长江富民金山制药有限公司(批号08102104);盐酸异丙肾上腺素注射液，上海禾丰制药有限公司(批号080402);肌酸激酶(CK)测试盒、乳酸脱氢酶(LDH)测试盒，南京建成生物工程研究所(批号20100427)。

1.3 仪器

BS124S型电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司);XS105DU型电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司);HHS型电热恒温水浴锅(上海博迅实业有限公司);海尔 SC-329型防爆冰箱(青岛海尔集团);台式高速离心机，centrifuge 5804R，德国EPPENDORF公司;电热恒温水浴锅，DK-S22型，上海精宏实验设备有限公司;XW-80A型旋涡混合器，Q/DAAK2-2000，上海医大仪器厂;冰箱，BCD-458W，Haire公司;紫外/可见光分光光度计，UV754N型，上海精密科学仪器厂;Powerlab/8SP八通道生物信号记录系统，Model:ML785，Serial:SP9825;精密移液器，Finnpipette Digital，Finland。

1.4 活络效灵丹对异丙肾上腺素致心肌缺血大鼠的影响实验

1.4.1 主要试剂的配制 精确称量当归、乳香、丹参、没药各95g。加蒸馏水浸泡3h，水煎2次，滤去水煎液压榨药渣，合并2次水煎液。用纱布反复过滤水煎液，滤去不溶性杂质。直火浓缩至352ml，得到浓度为108%g/ml的高剂量受试药。用蒸馏水梯度等比稀释高浓度药液，制得54%g/ml的中剂量受试药 200ml，27%g/ml的低剂量受试药200ml。取片重0.4g的血栓心脉宁中成药片剂10片，加200ml蒸馏水完全溶解，制得2%g/ml的阳性药溶液。

1.4.2 实验方法 取200g～250g SD大鼠雄性48只，随机分为活络效灵丹高剂量组、活络效灵丹中剂量组、活络效灵丹低剂量组、阳性对照组、模型组及正常组6组。高剂量组灌胃给予活络效灵丹大剂量(10.8g/kg)，中剂量组给予活络效灵丹中剂量(5.4g/kg)，低剂量组给予活络效灵丹小剂量(2.7g/kg)，阳性对照组给予心脉宁(0.2g/kg)，以上各给药组均用双蒸水配制成溶液按10 mL/kg剂量灌服，模型对照组、正常对照组用蒸馏水10mL/kg灌服。各组灌胃均每日1次，连续7 d。第7天晚上禁食不禁水。第8天测量体重，末次给药30 min后用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，背位固定，将针状电极插入四肢皮下，用Powerlab/4SP生理信号采集与分析系统(Adinstru—ments，Australia)描记标准肢体Ⅱ导联心电图(ECG)，记录正常时段的心电图，然后除正常组外的其他各组腹腔注射盐酸异丙肾上腺(ISO)4mg/kg。记录注射 ISO 后 2、5、10、15、20、30 min时间点的心电图，测量给ISO后ST段高度，计算ST段偏移的总毫伏数(ΣST)作为心肌缺血指标(S－T段偏移的绝对值(S－T)ΣST=(2min时ST段毫伏数－0min时 ST段毫伏数)+(5min时 ST段毫伏数 －0min时 ST段毫伏数)+(10min时 ST段毫伏数－0min时 ST段毫伏数)+……(30min时ST段毫伏数－0min时 ST段毫伏数)。记录心电参数后，大鼠腹主动脉取血并处死大鼠，立即取出心脏，以冰生理盐水洗去残留血液，除去大血管、结缔组织，滤纸吸干(一部分戊二醛固定，一部分福尔马林固定)。离心并分离血清，用试剂盒测定肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷草转氨酶(AST)含量。

1.4.3 统计学方法所有数据用珋x±s表示;用组间q检验进行统计学处理，比较有无显著性差异。

2 结果

2.1 活络效灵丹对异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠心电图ST的影响

表1 活络效灵丹对异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠ΣST的影响(珋x±s，n=8)

表2显示，模型组的ΣST比正常组明显增高(P＜0.05);活络效灵丹各给药组与模型组相比，ΣST明显降低，差异具有显著意义(P＜0.05)，其中中剂量组效果最明显。

表2 活络效灵丹对异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠血清CK、AST、LDH的影响(珋x±s，n=8)

2.2 活络效灵丹对异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠血清CK、AST、LDH的影响

表2显示，与正常组比较，模型组血清 CK、LDH、AST明显增高(P＜0.05)。活络效灵丹高中低剂量组与模型组比较，血清 LDH、AST明显降低(P＜0.05);活络效灵丹中低剂量组与模型组比较，血清CK明显降低(P＜0.05)，其中高剂量血清CK与模型组相比有所降低，但差异不显著(P＞0.05)。

3 讨论

心肌缺血是指各种原因引起冠状动脉血流量降低，致使心肌氧等物质供应不足和代谢产物清除减少的临床状态［1］。临床心肌缺血的发生主要与冠状动脉血流量减少相关，任何引起冠状动脉灌注压下降和/或冠状血管阻力增高的因素均可引起冠状动脉供血不足和心肌缺血［2］。

冠状动脉粥样硬化是引起临床心肌缺血的最常见(95%以上)和最重要的病因，取决于粥样斑块生长速度和冠脉重构的平衡。而冠状动脉痉挛也可引起心肌缺血、缺氧损伤，冠状动脉严重痉挛者可引发心肌梗死甚至猝死［3］。心绞痛及心肌梗死时儿茶酚胺增多，引起心脏血液动力学改变，心肌耗氧量增加，导致心肌缺氧甚至坏死［4］。心肌厚度增加时，心供血/心肌比值不足，毛细血管间距增加，导致心肌营养不良［5］。心肌缺血时心肌能量利用发生障碍，可引起左室舒张不全［6］。左室舒张期顺应性降低或左室僵硬是引起左室舒张功能衰竭的重要原因之一［7］。

心肌缺血引起的心脏疾患及心前区疼痛属中医“胸痹”、“心痛”范畴，同时结合现代医学和中药药理学的研究选择用药［8］。活血化瘀是当前治疗心肌缺血的重要手段，中药复方特别是具有活血化瘀作用的中药复方在治疗心肌缺血中发挥了重要的作用，常用的活血化瘀方剂有血府逐瘀汤［9］、丹参饮［9］、失笑散［11］、桃红四物汤［12］等。

CK、LDH、AST是心肌缺血、心肌细胞损伤所释放的介质，可以反映心肌缺血及损伤程度。通过以上实验我们发现，活络效灵丹能有效降低异丙肾上腺素诱导的急性心肌缺血大鼠ΣST的升高，降低其血清CK、LDH、AST含量，从而达到减轻心肌耗氧量和心肌缺血的作用。结果表明，活络效灵丹对大鼠心肌缺血具有明显的保护作用，能够显著降低心肌损伤程度，改善缺血心肌供氧-需氧失衡的状态，其机制可能是通过改善心肌代谢及血流动力学，减轻心肌细胞受损程度等多途径发挥抗心肌缺血作用。

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