支气管肺泡灌洗液的细胞形态学检查

弓长丽,刁斌斌

（吉林省人民医院检验科,吉林长春 130021）

我院2年前开展了支气管肺泡灌洗液的细胞形态学检查[1,2],为间质性肺病及肺部创伤、感染的诊断提供了有效依据,现报道如下。

1 材料和方法

1.1 临床资料 本院2008年1月-2009年6月,43例门诊及住院患者,年龄21-73岁;男19例,女24例;其中特发性肺纤维化7例,过敏性肺泡炎6例,自身免疫病伴肺间质纤维化20例,支气管哮喘3例,开胸手术后肺损伤5例,嗜酸粒细胞增多综合征2例。

1.2 方法

1.2.1 BALF的采集 常规纤支镜气道检查后在活检刷检前做BAL。对弥漫性间质性肺疾病通常选择右肺中叶（B4或B5）、左肺舌叶,局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL。首先对拟在要灌洗肺段经活检孔注入2%利多卡因局部喷雾麻醉,将纤支镜嵌入右肺中叶,按20mL/次的灌注量,分3次注入37℃生理盐水,回收BALF,用双层无菌纱布过滤,记量。收集到的BALF立即放于周围被冰水包围（-4℃）的容器中,以避免细胞破坏,在30 min内送至实验室,通常在2-3 h内处理。

1.2.2 计数 冰袋包裹的BALF,温度计4℃左右,在普通离心机离心10 min;取少量BALF置于Neubauer计数台上进行总细胞计数。以每毫升回收液的细胞数和灌洗液回收细胞的绝对数表示。BALF的细胞学检查:用冰袋包裹温度计检测,达到4℃左右,在普通离心机离心10min,弃上清,制成细胞悬液。用瑞氏-姬姆萨染色液（BASO）铺满玻片上有膜的部分,染色1min后加入缓冲液,混匀2-3 min。水洗后自然干燥,封片。油镜下,计数 200个细胞进行细胞分类计数。

1.3 统计学处理 采用SPSSl1.0分析软件进行统计学分析,组间比较采用t检验。

2 结果

43例患者BALF的细胞学检查中,7例特发性肺纤维化及20例自身免疫病伴肺间质纤维化患者以巨噬细胞及中性粒细胞增高为主（P＜0.05）;6例过敏性肺泡炎以巨噬细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞增高为主（P＜0.05）;3例支气管哮喘患者几类细胞百分比均增高,其中以嗜酸性粒细胞增高为主（P＜0.05）;5例开胸手术后肺损伤以巨噬细胞增高为主（P＜0.05）;2例嗜酸粒细胞增多综合征以嗜酸性粒细胞增高为主（P＜0.01）。细胞分类百分比及细胞形态见表1及图1-3。

表1 43例患者BALF的细胞学分类检查（%）

3 讨论

间质性肺病是一组临床特征相似免疫病理过程各异的众多肺疾病组成的疾病谱,病因不明者占65%,其发病机理至今尚未完全清楚[3]。间质性肺病的早期表现为肺泡炎,晚期为弥漫性肺纤维化。此病的早期诊断、早期治疗是决定预后与转归的关键[4]。而通过BAL来收集检测直接获取患者肺内炎症免疫效应细胞,探讨肺局部炎症免疫过程是一个有效的检测方法[5],对间质性肺病的发病机制,免疫病理过程以及诊断、鉴别诊断和判定病变的活动性和预后估计都具有重要的临床价值。

细胞分类及计数是最基础的检查,可以为临床提供最可靠的原始资料。我们从研究中发现,特发性及继发性肺纤维化患者以巨噬细胞及中性粒细胞增高为主;过敏性肺泡炎以巨噬细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞增高为主;支气管哮喘患者几类细胞百分比均增高,其中以嗜酸性粒细胞增高为主;开胸手术后肺损伤以巨噬细胞增高为主;嗜酸粒细胞增多综合征以嗜酸性粒细胞增高为主。根据以上特点可以为疾病的诊断、鉴别诊断及判断预后提供依据。

有研究者将支气管肺泡灌洗液（BALF）检查称之为“液性肺活检”,表明它具有较重要的临床应用价值。近年来,无论从BALF检测范围和检测项目上都有了长足的发展。从BALF中细胞学、单克隆抗体标记T淋巴细胞细胞亚群、可溶性蛋白、酶类到细胞因子,生物活性介质方面等检测,提供了大量研究结果,这对某些肺疾病的发展机制、诊断、鉴别诊断和病变活动性、疗效及预后判定等已显示出重要的临床价值[6,7]。由于标本量较少,我们的研究结果可能会出现偏差,我们将在进一步的研究中扩大例数并进行细胞因子以及肿瘤标志物等的检测,更好的为临床提供有效的诊断依据。

[1]Garbino J,Soccal PM,Aubert JD,et al.Respiratory viruses in bronchoalveolar lavage:a hospital-based cohort study in adults[J].Thorax,2009,64（5）:399.

[2]Chang CC,Chen SH,Ho SH,et al.Proteomic analysis of proteins from bronchoalveolar lavage fluid revealsthe actionmechanism of ultrafine carbon black-induced lung injury in mice[J].Proteomics,2007,7（23）:4388.

[3]杨瑞红,何权瀛,栗占国.风湿病相关性间质性肺病临床特点及治疗分析[J].中华风湿病学杂志,2007,11（12）:736.

[4]马咏梅,王 阳,吴 崇.特发性肺纤维化患者肺泡灌洗液及血清中自细胞介素4、12水平变化的意义[J].临床肺科杂志,2009,14（01）:53.

[5]赵世龙,邢丽华.支气管肺泡灌洗在肺部疾病诊治中的应用[J].国际呼吸杂志,2010,30（21）:1341.

[6]黄 絮,李振华.结节病和特发性肺纤维化患者支气管肺泡灌洗液中IL-6和GM-CSF测定分析[J].中日友好医院学报,2004,18（03）:138.

[7]贾玉萍,林江涛,高春梅.IL-1β基因在哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液炎细胞中的表达[J].现代中西医结合杂志,2004,13（18）:2403.