隐孢子虫病的中药防治研究进展

2011-02-13沈克飞

中国兽药杂志 2011年10期

陈静，沈克飞

(重庆市畜牧科学院，重庆 400015)

隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是由隐孢子虫(Cryptosporidium)引起的一种呈世界性分布的机会致病性人兽共患原虫病，主要临床症状表现为腹泻，在免疫正常的个体引起自限性腹泻，在免疫功能低下或缺陷的个体则引起渐进性致死性腹泻。自Tyzzer于1907年首次发现小鼠隐孢子虫(Cryptosporidium muris)以来，相继在人、哺乳动物、禽类、爬行类和鱼类等体内发现隐孢子虫病原。目前隐孢子虫病已被列为引起人类最常见的6种腹泻病之一，美国疾病预防控制中心将其列为B类病原［1-2］。

对于隐孢子虫病的治疗药物，国内外学者做了大量的筛选研究，但到目前为止，该病仍无特效治疗药物［1］。由于化学药物在治疗隐孢子虫病时疗效不显著或疗效有限，我国科研人员致力于中草药抗隐孢子虫病方面的研究，并取得了一定的成绩。以下对中药抗隐孢子虫病方面的研究做简单介绍，以期对防治有所帮助。

1 单味中药提取物

1.1 大蒜素大蒜素(Allicin)是大蒜鳞茎中的主要功能成分，是多种烯丙基有机硫化物复合体，具有多种生物学功能。药理和临床研究表明，大蒜素具有广谱抗菌、增强机体免疫系统功能、抗癌、防治心脑血管疾病、抗氧化、保肝、抗原虫等作用［3］。近年研究发现其对隐孢子虫病具有较好的治疗作用。

张珍等［4］研究表明，大蒜素能减少免疫抑制合并隐孢子虫感染小鼠粪便排出卵囊的数量，可以提高地塞米松磷酸钠注射液(DEX)致免疫功能低下小鼠的CD+4T细胞水平，提高机体CD+4/CD8比值，促进肠道粘膜sIgA的产生，降低外周血sIL-2R水平。刘锦华等［5］在对大蒜素抗隐孢子虫的免疫机制观察研究中发现大蒜素胶囊50 mg/kg灌胃给药4次，或注射液腹腔注射给药4次，均明显提高小鼠吞噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数，使小鼠巨噬细胞吞噬功能具有增强作用，说明大蒜素能够增强患病小鼠的免疫功能。沈玲君等［6］、杨硕平等［7］分别用大蒜素治疗婴幼儿隐孢子虫感染性腹泻，取得满意疗效。吴位珩等［8］研究结果表明大蒜素与恩诺沙星合并用药治疗山羊隐孢子虫病，治愈率较单用大蒜素治愈率高。

1.2 苦参碱苦参碱(Matrine)是苦参的主要有效成分，还存在于苦豆子(Sophora alopecuroides L.)、广豆根(S.subprostrata Chun et T.Chen)中［9］。研究发现苦参碱具有抗心律失常、抗炎、抗肿瘤、抗纤维化、升高白细胞等多种药理活性，其制剂已被广泛应用于临床。章刚等［10］研究了苦参碱对隐孢子虫体内外感染的抑制作用，体外药效试验发现0.3 mg/mL的苦参碱无细胞毒性且体外抑虫率为56.64%，体内药效试验发现50(mg·kg-1)/d的苦参碱显著降低了小鼠的排隐孢子卵囊数，结果证明苦参碱对微小隐孢子虫有明显的治疗作用。

1.3 黄芪黄芪味甘，性微温，可生用或炙用，为常用的补虚中药，具有补气固表，利尿排毒、提高机体免疫力，抵御疾病，增强体质，抗氧化延缓衰老，改善心功能状态，抗病毒，抗癌等功能［11］。高庚渠等［12］探讨了黄芪对雏鸡隐孢子病的治疗作用，研究发现黄芪煎液0.1 mL/只(1 mL黄芪煎液中含1 g黄芪原药)减轻了雏鸡隐孢子虫病的临床症状，

降低了隐孢子虫病的发病率和死亡率，使总排卵囊量减少及显露期缩短;可以促进雏鸡法氏囊和脾脏发育，提高雏鸡的免疫力，对雏鸡隐孢子虫病有一定防治作用。

1.4 银杏酸银杏酸(Ginkgolic acids，GAs)是从银杏外种皮中提取的天然化合物，前期研究已证明其具有抗菌、抗虫、抗肿瘤的功效。吴亮［1］采用Real-time PCR技术和透射电子显微镜研究GAs体外抗隐孢子虫增殖效果，发现GAs抗隐孢子虫体外增殖效果显著。虫体经5 μg/mL GAs作用48h后，虫体数仅为未加药对照组的0.66%，并且多数虫体已趋于萎缩，HCT-8细胞形态未见明显改变。并且GAs与硝唑尼特(Nitazoxanide，NTZ—美国FDA唯一批准的口服抗隐孢子虫药物)抗隐孢子虫增殖效果相似。

2 复合制剂

2.1 苦参合剂苦参合剂主药均为苦参，但组方不一。史长松等［13］研究报道一定剂量的苦参合剂(组方:苦参、秦皮、黄柏、麦芽)对大鼠隐孢子虫感染有预防作用。抗虫机制可能为:①苦参合剂直接作用于虫体。研究报道，苦参合剂能进入隐孢子虫卵囊内，可能对隐孢子虫卵囊内的子孢子具有一定杀灭作用。②苦参总碱抑制隐孢子虫DNA合成，使宿主细胞膜的结构和功能得以恢复，细胞膜的通透性降低，细胞膜代谢功能改善。③提高机体免疫力。崔巍等［14］用苦参合剂(组方:苦参、黄芪、百部、槟榔和葛根等)治疗儿童隐孢子虫病患者，用药后发现患者临床腹泻症状消失，排虫转阴，CD3、CD4淋巴细胞转化值显著升高。研究说明该合剂对隐孢子虫的感染有较好的驱虫效果，并能增强细胞免疫力。

2.2 补骨脂与双氢青蒿素合剂双氢青蒿素为青蒿素的衍生物，能治疗疟疾、弓形虫病、血吸虫病等，也能调节机体免疫力［15］。陈玉凤等［15］用补骨脂与双氢青蒿素合剂治疗小鼠隐孢子虫病，发现该合剂可通过调节血清IFN-γ、全血CD+4、CD+3T细胞比例，以及提高肠组织NO浓度，参与宿主免疫应答和炎症反应过程，抑杀虫体，治疗小鼠隐孢子虫病。车頔等［16］观察补骨脂及双氢青蒿素杀灭隐孢子虫的效果，发现中药补骨脂和双氢青蒿素对隐孢子虫均有抑杀作用，后者杀虫效果明显，但合剂疗效明显优于单剂疗效，二者协同作用，共同参与宿主的免疫调节和炎症修复过程。潘微［2］研究了补骨脂及双氢青蒿素对隐孢子虫感染小鼠抗原呈递细胞功能调节作用，结果发现其单用和二者配伍均可通过提高抗原呈递细胞的活性，使MHC-Ⅱ类抗原的表达增强，提高血清中IL-12p70的含量，进而增强机体对隐孢子虫感染的免疫应答反应，清除隐孢子虫感染，以达到治疗目的。并且试验发现双氢青蒿素抑杀虫体效果最好。

2.3 当归补血汤当归补血汤是金元时代李东恒所创的益气补血方剂，由黄芪和当归两味药以5∶1比分组成，多用于治劳倦内伤，气血虚，阳浮于外之虚热证。现代医学研究发现其具有促进造血、调节免疫功能、保护心脑血管等作用。姬云丽等［17］研究发现当归补血汤及其多糖能不同程度促进隐孢子虫感染小鼠肠道粘膜 IL-2、IFN-γ、IL-4及sIgA的分泌;肠道粘膜病理改变明显好转。证明当归补血汤及其多糖可调节小鼠肠道局部免疫并抑制隐孢子虫感染。张晓莉等［18］研究报道该方剂使实验小鼠粪便卵囊排出数量明显减少，肠粘膜损伤较模型组轻，提高小鼠CD+4T细胞水平，同样促进肠道粘膜sIgA的分泌，降低外周血sIL-2R水平。同样得出结论该方剂对免疫抑制合并隐孢子虫感染的小鼠的治疗作用是通过提高机体免疫功能发挥的。

3 结语

隐孢子虫病在多个国家的大范围暴发，造成巨大的恐慌，而隐孢子虫病的治疗一直是世界性难题。目前公认最佳的抗隐孢子虫药物硝唑尼特是美国FDA唯一批准的口服抗隐孢子虫药物，可以用于治疗1岁以上免疫功能正常的隐孢子虫病患者［1］。但现有抗隐孢子虫药物仍存在毒副作用大，对免疫功能缺陷患者并发的严重隐孢子虫病无治疗效果等不足。我国使用中药治疗感染性疾病历史悠久，许多中草药中的活性成分都具有不错的抗菌和抗虫效果，在抗隐孢子虫病方面也表现出相当的应用潜力，通过深入全面的研究，可望开发出新型抗隐孢子虫病有效产品。

［1］吴亮.隐孢子虫虫种鉴定及安氏隐孢子虫体外培养研究［D］.镇江:江苏大学，2009.

［2］潘微.补骨脂及双氢青蒿素对隐孢子虫感染小鼠抗原呈递细胞功能调节作用的观察［D］.大连:大连医科大学，2009.

［3］章稳宏，李钰皓，汪明，等.大蒜素在医药和畜牧业中的应用研究进展［J］.江苏农业科学，2009，6:24-25.

［4］张珍，郭立东，耿丽，等.大蒜素对免疫抑制合并隐孢子虫感染小鼠的治疗与免疫功能的作用观察［J］.时珍国医国药，2009，20(3):718-719.

［5］刘锦华，陈秀春，周世昌.大蒜素抗隐孢子虫免疫机制观察［J］.泰山医学院学报，2002，23(2):141-142.

［6］沈玲君，戈建军，沈京培.大蒜素治疗婴幼儿隐孢子虫病(附202 例报告)［J］.江苏医药，1997，23(8):571.

［7］杨硕平，戈建军，沈京培.大蒜素治疗婴幼儿隐孢子虫感染性腹泻172 例临床报告［J］.中国医药学报，1994，9(3):49.

［8］吴位珩，徐洪忠，张连兵，等.大蒜素及合并用药治疗山羊隐孢子虫病的试验效果［J］.贵州农业科学，2002，30(5):24-25.

［9］薛爱华，宋文静.苦参碱药理作用研究概况［J］.天津药学，2010，22(5):62.

［10］章刚，黄克和，陈甫，等.苦参碱对微小隐孢子虫体内外感染的抑制作用［J］.畜牧与兽医，2009，41(7):67-68.

［11］张建环.黄芪药理作用的体会［J］.健康必读杂志，2010，10:195.

［12］高庚渠，黄磊，张素梅，等.黄芪对雏鸡隐孢子病的治疗作用研究［J］.中国人兽共患病学报，2009，25(8):794-797.