兔尾草化学成分的研究

杨小良， 思秀玲， 曲 磊， 严紫成， 许学健， 韦 松

(广西中医学院，广西南宁530001)

兔尾草Uraria lagopodioides(Linn.)Desv.exDC.，又名狸尾草，大叶兔尾草，狐狸尾等，系豆科狸尾豆属植物［1-2］。该属植物约20种，我国有9种，分布于热带、亚热带地区，华南、西南和台湾省等地均出产，多数在北纬25°以南地区。广西民间将其全草用于小儿疳积、咳血、产后少乳、颈淋巴结核、毒蛇咬伤、痔疮等。药理实验结果证明，地上部分水煎液对大鼠子宫有收缩作用，抗着床作用;对毒蛇咬伤有一定治疗作用;University of Benin Niggeria的研究人员对大叶兔尾草的药理研究证明，该植物的总提物或部位提取物具有较好的杀螨活性［3］。化学成分研究 India的研究人员［4］运用气相色谱分析仪从大叶兔尾草根的醇提物中分离出16碳和28碳的脂肪酸;曾有报道分离出6个黄酮化合物，但均未确定其结构［5］。同属植物的气相分析中发现正十六碳酸和正廿八碳酸。陈艳［6］得到8个化合物分别鉴定为硬脂酸(Ⅰ)，正二十四烷酸(Ⅱ)，β-谷甾醇(Ⅲ)，正三十烷醇(Ⅳ)，水杨酸(Ⅴ)，β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)，当药黄酮(Swertisin，Ⅶ)，当药黄酮-2″-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅷ)。笔者在对兔尾草进行化学成分的研究，从全草的乙醇浸出物中又分离出6个化合物，经理化性质和波谱数据分析，确定其中3个化合物的化学结构，分别是皂草黄酮(Saponaretin，Ⅴ)，野漆树苷 (Rhoifolin，Ⅵ)，3β，16β，22α-三羟基齐墩果-12-烯(Ⅰ)。

1 仪器和材料

核磁共振谱用瑞士布鲁克公司AV400超导核磁共振仪测定;EI-MS用VG Autospec 3000有机磁质谱仪测定，IR用EQUINOX 55型傅里叶变换红外光谱仪(分辨率:优于0.2 cm-1;波数范围;7500～370 cm-1)，德国Bruker公司;UV用Agilent 8453紫外可见分光光度计(波长范围:190～800 nm，分辨率:0.1 nm)，美国安捷伦公司;熔点测定仪用XT4-100A型显微熔点测定仪(温度计未校正)，北京科仪电光仪器厂。

兔尾草采自广西天等、马山县，经本院药用植物教研室刘寿养教授鉴定为豆科植物大叶兔尾草［Uraria Legopodioides(L.)Desv.ex DC］。

2 提取和分离

大叶兔尾草干燥全草10 kg，粉碎，用70%乙醇提取。减压回收乙醇，得到约20 000 mL浓缩液，后加水稀释至澄清，趁热抽滤，滤液趁热上大孔树脂，用水洗至无色后依次用20%乙醇，70%乙醇和95%乙醇洗脱。其中得到20%乙醇部分约110 g，70%乙醇部分250 g。

将70%乙醇洗脱部分190 g，用氯仿:甲醇:水进行梯度洗脱，每个流份收集250 mL，TLC点样相同组分合并。9～48流份经反复柱层析，得到化合物(Ⅴ)15 mg和(Ⅵ)20 mg。

另取大叶兔尾草干燥全草14 kg，粉碎，用70%乙醇提取。减压回收乙醇，得到浓缩液，分别用石油醚(60～90℃)，乙酸乙酯，正丁醇进行液-液萃取，得到石油醚部位浸膏160 g，乙酸乙酯部位浸膏110 g，正丁醇部位浸膏500 g。取正丁醇部位浸膏240 g，与280 g聚酰胺拌样，用10%乙醇，30%乙醇和95%乙醇进行梯度洗脱，将30%乙醇洗脱部分70 g反复柱层析，得到化合物(Ⅰ)26 mg。

3 结构鉴定

化合物Ⅴ:黄色粉末，mp 227～228℃，盐酸-镁粉反应显红色，Molish反应阴性，但酸水解未能检出糖，锆盐-枸橼酸反应，黄色减退，在通过Gibb's反应阳性，Emerson反应阳性，示其8位未取代。Ⅴ在甲醇中测得UV光谱，最大吸收峰270 nm(带Ⅱ)和333 nm(带Ⅰ)，为典型黄酮类化合物的紫外吸收光谱。IRcm-1∶1 658(C=O)，1 499，1 450，1 138，1 076，835。FAB-MS(-，m/z):431［M-H］-，311。1H-NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ ∶13.13(1H，S，5-OH);6.92(2H，d，J=8.5，H-3′，H-5′);7.96(2H，d，J=8.5，H-2′，H-6′);6.26(1H，S，3-H);6.78(1H，S，8-H)，10.86(1H，S，7-OH)，10.37(1H，S，4′-OH);13C-NMR(DMSO-d6)δ ∶163.99(C-2)，102.47(C-3)，182.13(C-4)，160.42(C-5)，108.90(C-6)，162.59(C-7)，93.60(C-8)，156.03(C-9)，104.63(C-10)，121.64(C-1')，128.99(C-2'，C-6')，115.84(C-3'，C-5')，161.16(C-4')。糖上碳核:73.40(C-1'')，70.88(C-2'')，78.69(C-3'').70.58(C-4'')，81.86(C-5'')，61.33(C-6'')。以上数据与文献［7-8］记载的 Saponare tin 相符，顾鉴定化合物Ⅴ为:5，7，4′-三羟基-黄酮-6-C-葡萄糖苷，即皂草黄酮(Saponaretin)。

化合物Ⅵ:黄色粉末，mp 234～236℃，盐酸-镁粉反应显红色，示其为黄酮类化合物，锆盐-枸橼酸反应，黄色减退，示5-OH存在;通过Gibb's反应阳性，Emerson反应阳性，示其8位未取代。Ⅴ在甲醇中测得UV光谱，最大吸收峰270 nm(带Ⅱ)和333 nm(带Ⅰ)，为典型黄酮类化合物的紫外吸收光谱。IRcm-1:3 404(OH)，1 658(C=O)，1 606，1 503，1 448，1 127，1 080，835。FAB-MS m/z:577 ［M-H］-，1HNMR(CD3OD，400 MHz)δ ∶6.85(2H，d，J=6 Hz，H-3′，H-5′);7.77(2H，d，J=6Hz，H-2′，H-6′)，6.55(1H，S，3-H)，6.32(1H，S，6-H)，6.66(1H，S，8-H);3.45-3.94(m，糖基氢)，5.13(1H，d，J=7.8Hz ，C1″-H);3.68(1H，t，J=9.0 Hz，C2″-H);3.63(1H，d，J=9.0 Hz，C3″-H);3.38(1H，d，J=9.0 Hz，C4″-H);3.52(1H，t，J=6.0，9.0Hz ，C5″-H);3.71(1H，d，J=6.0 Hz，C6″-H1)，3.91(1H，br，C6″-H2);5.27(1H，br，C1‴-H);3.61(1H，d，J=9.0 Hz，C2‴-H);3.94(1H，br，C3‴-H);3.40(1H，d，J=9.0 Hz，C4‴-H);3.93(1H，br，C5‴-H);1.31(3H，d，J=3.0 Hz，C6‴-H)。13C-NMR(CD3OD，δ)∶167.06(C-2)，104.56(C-3)，184.39(C-4)，163.30(C-5)，101.42(C-6)，164.77(C-7)，96.34(C-8)，159.30(C-9)，107.44(C-10)，123.37(C-1′)，130.13(C-2′，C-6′)，117.50(C-3′，C-5′)，163.36(C-4′)，糖上碳核:100.18(C-1″)，79.49(C-2″)，78.48(C-3″)，71.87(C-4″)，78.76(C-5″)，62.92(C-6″)，103.01(C-1‴)，72.69(C-2‴，C-3‴)，74.48(C-4‴)，70.48(C-5‴)，18.79(C-6‴)。以上数据与文献［9-10］记载的 Rhoifolin一致，故鉴定Ⅵ为:芹菜素-7-O-新橙皮糖苷，即野漆树苷(Rhoifolin)。

化合物Ⅰ灰色粉末mp 293～296℃，溶于甲醇，吡啶，二甲亚砜，Ⅰ在甲醇中测得UV光谱，最大吸收峰205 nm，13CNMR(C5D5N，600 MHz)δ ∶38.81(C-1)，26.45(C-2)，78.21(C-3)，39.50(C-4)，55.79(C-5)，18.47(C-6)，33.08(C-7)，39.98(C-8)，47.87(C-9)，36.76(C-10)，23.82(C-11)，122.50(C-12)，144.84(C-13)，42.33(C-14)，33.08(C-15)，77.77(C-16)，46.61(C-17)，41.86(C-18)，46.77(C-19)，30.90(C-20)，42.28(C-21)，75.55(C-22)，28.19(C-23)，15.76(C-24)，16.85(C-25)，17.13(C-26)，23.82(C-27)，28.66(C-28)，33.32(C-29)，21.21(C-30)。δ122.50(C12)，δ 144.83(C13)为典型的齐墩果酸型骨架构型。根据以上数据［11］确定化合物Ⅰ的结构是 3β，16β，22α-三羟基齐墩果-12-烯。

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