金黄色葡萄球菌的检测分析

曲 林

（吉林省农安县人民医院检验科，吉林 农安 130200）

金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）是可引起多种严重感染的一种重要病原菌，隶属葡萄球菌属（Staphylococcus）[1]。据路透社2005年7月15日报道，美国研究人员，大量实验发现金色的细菌比其它无色细菌更具杀伤力。全世界每年有上千万人死于葡萄球菌感染。在第二次世界大战之前尤为严重[2]。后来科学家用发明的抗生来治疗葡萄球菌的感染。直到80年代起，抵抗抗生素的菌株不断出现，致使特效的药物失灵[3]。一方面由于金色葡萄球菌是人体内最常见的细菌，被1/3的人口携带，它能够导致一系列疾病，也是主要的医院感染源。另一方面发现，金色葡萄球菌能够轻易地与其他葡萄状球菌交换基因，并能在很短的时间里重新获得更大抵抗抗生素的能力。因此对其深入专业的研究将会给全人类带来了巨大的福祉。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

随机选择2002年1月至2010年1月诊治的435例金黄色葡萄球菌患者的各类临床标本，包括痰液、脓液、尿液、血液、泌尿生殖道分泌物等。

1.2 菌株分离与鉴定

所采用的435例菌株均严格按照《全国临床检验操作规程》对其进行培养、分离、鉴定。

1.3 纸片扩散法的药敏检测试验

①培养基：冻干血浆、特定琼脂等适合葡萄球菌生长的适宜培养基，使其良好生长，更好的进行试验。②药敏纸片的选择：万霉素、利福平、头孢哌酮、丁胺卡那素、头孢唑林、 庆大霉素、 环丙沙星、青霉素G。以上的药物必须在保质期内使用，确保结果的准确性与科学性。③质控菌液、被检测菌：首先选取在纯培养平板上生长的菌落，再用准备好的无菌生理盐水调节被选中的菌液浓度，使用与麦氏比浊管0.5的比浊相同。菌落计数相当于1.5×108/mL。④试验操作：按照每张纸片都不少于29mm，纸片的中心距离平板不能少于18mm，将药敏纸片用无菌镊子夹起平贴于涂有菌液的培养基表面。⑤判断药敏的标准：参照国家临床实验室标准化正确无误的读取结果。

2 药敏试验结果

2.1 2002年1月至2010年1月的八年来，从临床选择的435例金黄色葡萄球菌培养的菌株中，耐甲基西林金黄色葡萄球菌为170株，占25.6%。甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株数为265，占总菌数的60.9%。①2002年1月至2010年1月的耐甲基西林金黄色葡萄球菌菌株分别为15、13、19、20、26、27、25、25。②2002年1月至2010年1月甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株数菌株分别为25、23、23、38、24、39、41、37。③耐药率分别为26.5%、26.7%、37.4%、33.9%、42.1%、41.5%、47.8%、48.9%。

2.2 金黄色葡萄球菌对万霉素、利福平、头孢哌酮、丁胺卡那素、头孢唑林、 庆大霉素、 环丙沙星、青霉素G的敏感率分别为99．5%、978%、77.8%、77.8%、70.1%、59.7%、2.1%。

3 讨 论

金黄色葡萄球菌是球菌中革兰阳性菌的一种最典型代表。它可以被结晶紫初染，碘液媒染，乙醇处理，沙黄（红色）复染后呈现紫红色。革兰阳性菌是由细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸组成[4]。由于其肽聚糖的网状结构比革兰阴性菌致密，造成了不同革兰阴性菌呈现红色的染色结果。

典型的金黄色葡萄球菌对其所需的生长条件要求一般，为需氧或兼性厌氧，普通培养基便可使其良好生长。在最适温度37°C，pH7.4的干燥环境中即可存活数周的时间[5]。由于其较强的生长力和近年来抗生素的广泛应用，耐甲基西林金黄色葡萄球菌被检出率呈逐年上升的势态。八年来从随机的检测结果中就可以看出其耐药性的不断攀升，所呈趋势不容乐观。所被检测的地区的1985年至1986年的耐甲基西林金黄色葡萄球菌的分离率为26%，1993年至1994年的分离率上升至61%，1999年至2004年的分离率平均到达88.4%，较比1994年提高近27.4%，从这几组百分率的比中我们不难看出问题的严重性。2007年至2010年的分离率则更是达到93.2%。本院处于经济尚未发达，交通仍不十分发达的县城，在此处情况已经不够乐观，尚且不用说经济与人文发达的沿海等大众城市的形势会如何了，一定会更加的突出。

葡萄球菌病主要是由金黄色葡萄球菌引起的一种急性或慢性传染病。在临床上常可以表现为多种类化脓，由于此类疾病的特殊性给人们带去巨大的痛苦[6]。内脏器官感染如肺炎、脓胸、脑膜炎、等各种严重的病症，随时夺去人们的生命。葡萄球菌可通过多种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。新生儿各种的技能尚未发育完全，机体防御能力低严重受损时表皮葡萄球菌也可引起严重败血症。皮肤软组织感染主要有疖、痈、毛囊炎、麦粒肿伤口管的患者，切除前列腺的患者尤多见于。主要是因为大多菌株可以分解尿素和新生霉素的耐药因素导致。金葡菌可致急性化脓性骨髓炎，儿童及男性多见，可为血源性感染，亦可继发于外伤或化脓性关节炎，致残率极高。葡萄球菌尚还可以引起肝、脾、肾脓肿，肾周围脓肿等脏器疾病。

自青霉素在上世纪对治疗金黄色葡萄球菌发挥的巨大的作用起，到80年代的耐药菌株的被发现，都在表明耐药性的不断提高。在增加治疗难度的同时，也在提醒着我们医疗工作者们一个不可忽视的严峻问题;广泛的抗生素应用只会导致“滥用”。其用意是好的，但其结果却是事倍功半。所以我们要彻底改变普通的用药习惯，而是应该认真谨慎的，在不充分把握的情况下进行金黄色葡萄球菌的检测与分析，用科学来指导合理的用药原则。尤其是基层医生更要对其理解掌握。对实际的临床治疗具有的指导重要意义。影响也将必定是深远的。金黄色葡萄球菌的检验还可以应用3M快速金黄色葡萄球菌数测片或者是TD5A-WS台式低速离心机等多种方法进行检测。例如应用1TD5AWS台式低速离心机其检测，检测结果也较准确，但由于相对费用较昂贵，需要一定的技术和条件，不宜推广。而纸片扩散法简单易行、准确、经济，尤其适用于基层医院经金黄色葡萄球菌感染的检测。

综上所述，通过对金黄色葡萄球菌采用纸片扩散法检测可进行检测，可以准确、安全的选择用药，降低耐药性的发生率。有益于为千千万万的患者解除其病痛。值得在基层医院金黄色葡萄球菌的感染中推广应用。

[1] 刘晓霞,刘蓬蓬,孙运波.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的危险因素分析[J].齐鲁医学杂志,2009,24(5):447-450.

[2] 德忠,周文聪,饶冠利.脓毒症患者病原菌分布及耐药性分析[J].中国卫生检验杂志,2010,20(2):321-324.

[3] 白莉,李卫杰,王军花.127种葡萄球菌对抗生素的分析[J].华北国防医药,2007,19(1):55.

[4] 崔自慧.细菌耐药性临床分析[J].中国医药导报,2010,7(7):116-117.

[5] 朱佩琼,裘云庆.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药机制的研究近况[J].国外医学流行病学.传染病学分册,2004,31(5):55.

[6] 陈亮,方平.临床标本分离细菌耐药性监测分析[J].安徽医药,2004,8(3):206-207.