海洛因依赖者血清中IL-9、IL-17水平的研究

何 军 左 丽 （贵阳医学院免疫学教研室,贵阳 550004）

·实用临床免疫学·

海洛因依赖者血清中IL-9、IL-17水平的研究

何 军 左 丽 （贵阳医学院免疫学教研室,贵阳 550004）

目的:通过检测IL-9、IL-17在海洛因依赖者血清中水平的变化,为进一步认识海洛因对机体免疫功能的影响提供依据。方法:93例海洛因依赖者按吸食海洛因时间长短分为三组（2年以内、5～10年、10年以上）,31例正常人血清作为对照组,用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组血清IL-9、IL-17水平。结果:2年以内组和5～10年组海洛因依赖者血清IL-9较正常对照升高（P＜0.05）、各组IL-17水平较正常对照组降低（P＜0.05）;从2年以内组到 5～10年组到 10年以上组,IL-9水平先升高后降低[（334.92±144.41）pg/ml、（353.47±176.93）pg/m l、（287.38±129.94 pg/ml）],IL-17水平先降低后相对升高[（53.38±26.08）pg/ml、（45.87±16.81）pg/m l、（68.18±39.26）pg/m l）]。结论:IL-9、IL-17在海洛因依赖者血清中水平改变明显,吸食海洛因可刺激IL-9水平升高而抑制机体IL-17的水平表达。

海洛因依赖者;IL-9;IL-17;免疫功能

阿片类物质滥用现象已成为一个全球性健康和社会问题,越来越引起人们的重视。阿片类物质影响机体神经、内分泌、免疫、循环、代谢等各个器官系统的功能状态,长期吸食海洛因可导致机体免疫功能的降低[1,2]。

细胞因子作为细胞间信号传递分子,主要参与调节免疫应答、免疫细胞分化发育、介导炎症反应等。我们根据本组设计方案研究了海洛因依赖者血清中Th1和Th2细胞产生主要细胞因子IFN-γ和IL-4水平,证明海洛因依赖者存在Th1/Th2功能紊乱,特别是吸食海洛因5～10年间以Th1亢进、Th1降低为主[3]。IL-9主要由Th9细胞分泌,是抗病毒免疫的关键分子,调节T细胞和B细胞应答。IL-17主要由Th17细胞分泌,是一种促炎症因子,在适应性免疫和固有免疫中有很强的调节作用。通过排除常见血源传播病原体,根据吸食海洛因时间长短检测IL-9、IL-17水平来了解海洛因对机体免疫功能的影响报道较少,本文做了相关研究,报道如下:

1 材料与方法

1.1 材料 受检对象:海洛因依赖组:收集2009年1～12月贵州省第二人民医院美沙酮维持治疗门诊就诊的海洛因依赖者共93例,其中男69例,女24例,年龄20～52岁,平均38.2岁。吸食海洛因时间平均8.0年,海洛因日均用量0.25～5.20克。全部患者海洛因滥用史明确,符合DSM-Ⅲ-R关于阿片类药物依赖诊断标准。各例均排除HBsAg、HCV、HIV、TP阳性,排除肝功能异常（AlT＞40）,肾功能异常（BUN、CRE、UA在参考范围外）,排除接受过美沙酮治疗及6月内使用免疫制剂。对照组:来自贵州省第二人民医院体检中心正常健康体检者31例,其中男22例,女9例,年龄在21～50岁,平均年龄37岁。各例排除内容同上。

1.2 主要试剂和仪器 IL-9、IL-17检测用ElISA试剂盒为美国GBD公司原装试剂,批号分别为I056-00,I073-00。-40℃低温冰箱（青岛海尔公司）,德国Eppendorf微量移液器,美国BIO-TEK ElX800UV酶联免疫检测仪,北京普朗DNX-9620A洗板机,恒温水浴箱（上海医疗器械七厂600型）。

1.3 研究方法 标本收集:提供血样者均空腹采集静脉血 4 ml于真空采血管,37℃水浴 30分钟后3 000 r/min离心15分钟,取血清1.5 ml于Ep管,-40℃冰箱保存待测。测定方法:双抗体夹心ELISA法检测血清IL-9、IL-17水平,按照试剂说明书操作。

2 结果

海洛因依赖者血清中IL-9水平,2年以内组、5～10年组均高于正常对照组（P＜0.05）,而10年以上组与正常对照组间无统计差异（P＞0.05）,各时间组间无统计差异（P＞0.05）;IL-17水平,各时间组均低于正常对照组（P＜0.05）,且10年以上组较5～10年组相对升高（P＜0.05）。见表1,图1、2。

图1 吸食海洛因2年内、5～10年、10年以上和正常对照IL-9、IL-17水平比较Fig.1 Comparison of concentrations of IL-9 and IL-17 in sera between the groups ofheroin addicts of within 2 years,5-10 years,over 10 years and thenormal group

图2 各组海洛因依赖者血清IL-9、IL-17水平与正常对照组比较Fig.2 The levelof IL-9,IL-17 in sera from the heroin addicts of different periods of time,which were compared with thenormal group

表1 各组海洛因依赖者血清中IL-9和IL-17水平的比较（±s,pg/m l）Tab.1 Comparisons among the concentrations of IL-9,IL-17 in sera from the heroin addicts of different periods of time（±s,pg/m l）

表1 各组海洛因依赖者血清中IL-9和IL-17水平的比较（±s,pg/m l）Tab.1 Comparisons among the concentrations of IL-9,IL-17 in sera from the heroin addicts of different periods of time（±s,pg/m l）

Note:1）P＜0.05,vsnormalgroup;2）P＜0.05,vsover 10 yearsgroup.

Cytokines Heroin addictsgroups Within 2 years 5-10 years Over 10 years Normal group IL-9 334.92±144.411）353.47±176.931）287.38±129.94 217.96±41.51 IL-17 53.38±26.081） 45.87±16.8112） 68.18±39.261）92.06±15.73

3 讨论

海洛因是阿片类衍生物,与阿片受体结合后发挥作用,人体内包括免疫细胞在内的多种细胞表面广泛表达阿片受体。当海洛因作为外源性阿片物质进入机体后,影响机体的神经-内分泌-免疫调节网络,使机体的免疫系统的固有免疫、细胞免疫和体液免疫功能严重受损。Vallejo等[4]认为外源性海洛因通过下丘脑-垂体-肾上腺轴和自主神经系统抑制免疫功能,至少部分由中枢、外周神经和免疫细胞的阿片受体介导。Timothy B.Saurer等[5]证实神经系统的神经伏核作为海洛因的神经基质参与诱导机体免疫系统改变,细胞因子作为免疫调节网络中的关键性介质,与神经-内分泌系统联系紧密。故研究海洛因依赖者血清细胞因子水平对了解海洛因影响机体免疫功能有重要意义。

CD4+T细胞是构成机体适应性免疫功能的重要组成部分,可诱导机体产生有效的抗病毒免疫应答。CD4+T细胞根据产生细胞因子及生物学功能的不同分为 Th1、Th2、Th9和Th17细胞等。IL-9由新型的不同于 Th1、Th2、Th17和Treg细胞的Th9细胞分泌,是抗病毒免疫的关键分子,调节T细胞和B细胞应答,尤其对肺部病毒感染疾病有特异效应,近年也有报道认为IL-9作为Th17的衍生因子对炎性疾病有促进作用[6,7]。Th17细胞是近年发现的一类不同于Th1和Th2的CD4+T细胞亚群,TGF-β和IL-6是初始CD4+T细胞分化为Th17的必需因子,IL-23是维持Th17存活的重要因子,缺少IL-23不影响Th17的产生,但Th17不能扩增和存活[8],Th17细胞主要分泌IL-17,可发挥抗细菌、抗病毒、抗真菌、抗寄生虫等作用,在抗感染免疫中的作用越来越受到重视[8-10]。本研究结果显示在吸食海洛因2年到5～10年,血清IL-9水平较正常对照组升高,IL-17相对较低,提示海洛因可能刺激机体高表达IL-9,而抑制IL-17的产生;吸食海洛因10年以上,血清IL-9水平下降,接近正常水平,而IL-17相对升高,但仍低于正常水平。IL-9和IL-17同是前炎症因子,二者不同程度表现升高,表明吸食海洛因时间长短机体均可能表现感染状态,IL-17的相对升高可能会加重机体自身不良状况。Wassim Elyaman等[11]报道认为IL-9是影响Th17细胞分化和Treg细胞功能的关键分子,IL-9主要由Th17细胞产生,并与TGF-β1协同作用分化天然CD4+T细胞为Th17细胞,Th17细胞分泌IL-9受IL-23调节。本研究显示的IL-9升高,IL-17减低,可能在海洛因依赖者中IL-9无关Th17细胞分化,但此机制尚需进一步验证。

IL-9、IL-17在海洛因依赖者血清中水平改变明显,吸食海洛因可刺激机体IL-9水平表达升高,而抑制IL-17的产生。

1 Islam SK,Hossain K J,KamalMetal.Serum immunoglobulinsandwhite blood cells statusof drug addicts:influence of illicit drugs and sex habit[J].Addict Biol,2004;9（1）:27-33.

2 Ran D,Goldman.Drug-induced gynecomastia in children and adolescents[J].Can Fam Physician,2010;56:344-345.

3 何 军,左 丽.海洛因依赖者血清中Th1和Th2细胞产生主要细胞因子水平的研究[J].中国免疫学杂志,2010;26（11）:1033-1035.

4 Vallqo R,Benyam in R.Opioid therapy and immunosuppression:a review[J].Am JTher,2004;11（5）:354-365.

5 Timothy B,Saurer,StephanieGetal.Evidence for the nucleusaccumbens asa neuralsubstrate of heroin-induced immune alterations[J].Pharmacol Exp Ther,2009;329:1040-1047.

6 Dodd Jonathan S,Lum EdaC,Goulding Johnetal.IL-9 Regulatespathology duringprimary andmemory responses to respiratory syncytialvirus infection[J].Immunol,2009;183（11）:7006-7013.

7 Nowak E C,Weaver C T,Henrietta Turneretal.IL-9 as amediator of Th17-driven inflammatory disease[J].ExpMed,2009;206:1653-1660.

8 Betteli E,Carrier Y,GaoWetal.Reciprocal developmental pathways for the generation of pathogenic effector Th17 and regμlatory T cells[J].Nature,2006;441（7090）:235-238.

9 张玉侠.效应分子IL-17的抗感染作用[J].国际免疫学杂志,2009;32（3）:241-244.

10 CurtisM M,Way SS.Interleukin-17 in host defense against bacterial,mycobacterial and fungal pathogens[J].Immunology,2009;126（2）:177-185.

11 Wassim Elyaman,Elizabeth M,Bradshawetal.IL-9 inducesdifferentiation of Th17 cells and enhances function of FoxP3+natural regulatory T cells[J].PNAS,2009;106:12885-12890.

[收稿2010-11-01 修回2011-01-10]

（编辑 张晓舟）

A Study on the levelof IL-9,IL-17 in Sera from Heroin Addicts

HEJun,ZUOLi.DepartmentofImmunology,GuiyangMedicalUniversity,Guiyang550004,China

Objective:By detecting IL-9,IL-17 in serum levels of heroin addicts change for a further exploration of heroin's effects on immune function to provide evidence.Methods:93 cases of heroin addictswere equally divided into3 groups as thosewho employed to detect their sera levels IL-9,IL-17,31 cases of normal human serawere used as controls.Results:Thegroups of heroin addicts thathad taken for less than 2 years and thathad taken for 5 to 10 years had higher levels of IL-9（P＜0.05）but lower levels of IL-17（P＜0.05）,both compared to the controls.The levelsof IL-9 rose at firstbut thenwent downover the range of all groups in theorder of drug-taking durations（334.92±144.41 pg/m l,353.47±176.93 pg/m l,287.38±129.94 pg/m l）;while the levels of IL-17 had theopposite story,falling down firstly butascending afterwards（53.38±26.08 pg/ml,45.87±16.81 pg/ml,68.18±39.26 pg/ml）.Conclusion:The levels of IL-9,IL-17 in the sera from theheroin addicts changed significantly.Heroin abuseswere p roved to stimulate the expression of IL-9 but inhibit that of IL-17 in vivo.

Heroin addicts;IL-9;IL-17;Immunefuction

R996 R34

A

1000-484X（2011）05-0463-03

10.3969/j.issn.1000-484X.2011.05.019

何 军（1978年-）,男,硕士,主管技师,主要从事临床免疫学研究,现工作于贵州省第二人民医院,E-mail:gzgyhjjj@163.com;

及指导教师:左 丽（1955年-）,女,教授,博士生导师,主要从事分子免疫学研究,E-mail:zuoligymc@163.com。