CyclinE和 P27、P53在皮肤癌中的表达及相关性

曹婉维 刘少璇 郭永谊 王晓鸿

CyclinE和 P27、P53在皮肤癌中的表达及相关性

曹婉维 刘少璇 郭永谊 王晓鸿

目的 探讨细胞周期蛋白 E(CyclinE)和 P27、P53在皮肤癌中的表达及相关性。方法 应用免疫组化法检测30例皮肤癌组织中 CyclinE和P27、P53的表达情况。分析三者与皮肤癌Broders标准分级之间的关系,以及 CyclinE与 P27、P53的相关性。结果 皮肤癌组织 CyclinE、P27表达与对照组比较显著升高(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05)。在各级鳞癌组织间比较,CyclinE和 P53表达差异明显(χ2=9.84;χ2=8.85,P＜0.05);P27在鳞癌组织中的阳性率较对照组低(χ2=3.98,P＜0.05),P27在鳞癌组织各级间比较,差异无统计学意义(χ2=1.16,P＞0.05)。结论 CyclinE、P27、P53在皮肤鳞癌中有异常表达,在皮肤鳞癌中的发生发展中可能起一定作用。

细胞周期蛋白 E;P27;P53;皮肤癌

皮肤鳞状细胞癌(skin squamous cell carcinoma,SCC)是从正常皮肤的基底细胞发生的恶性肿瘤,其发生是多基因多步骤积累损害的结果,其中基因的异常表达起着非常重要的作用[1]。细胞周期调控基因在肿瘤细胞发生与发展中起重要作用。我们应用免疫组织化学法研究细胞周期蛋白E(CyclinE)在皮肤鳞状细胞癌(皮肤鳞癌)的表达,以及 P27、P53表达的相关性,探讨三者与皮肤鳞癌的发生、发展的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取中山大学附属第五医院 2008年 1月到2010年 1月收治,经病理组织学确诊且术后标本蜡块保存完好的皮肤鳞状细胞癌患者的组织标本蜡块 30例。男 20例,女 10例,年龄为 35～72岁,平均年龄 53.1岁。按 Broders标准分级:I级 16例,II级 12例,III级 2例。所有病例术前均未接受过化疗和放射治疗。外科手术中切除的正常人皮肤组织24例作为对照组。

1.2 检测试剂 CyclinE、P27、P53及 S-P(广谱)免疫组化试剂盒均购于福州迈新生物技术开发公司。

1.3 检测方法 采用免疫组织化学 SP法,高温修复(枸椽酸)抗原,操作方法按试剂盒说明书进行,DAB显色。以 PBS代替一抗作阴性对照。

1.4 结果判断标准 显色后阳性细胞为细胞核内出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性。显微镜下找阳性最强的视野检测10个独立高倍视野(×400倍),根据阳性肿瘤细胞染色程度及所占百分比,判为阴性(-),细胞不着色;低表达(+),细胞呈淡黄色,细胞数≤25%;中度表达(++),细胞呈黄色,细胞数 26%～50%;高表达(+++),细胞见棕黄色颗粒,细胞数＞50%。

1.5 统计学方法 采用SPSS 13.0软件进行分析,CyclinE与P27、P53在皮肤鳞状细胞癌组织的表达及其相关性采用 χ2检验和Spearman等级相关法。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CyclinE与P27、P53在皮肤鳞状细胞癌组织中表达及与Broders标准分级之间的关系 CyclinE在正常人皮肤鳞状细胞细胞核内未见阳性表达。CyclinE和 P53在鳞癌组织中表达较对照组高,两者比较差异有统计学意义(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05)。同时在各级鳞癌组织间比较,CyclinE和P53表达差异有统计学意义(χ2=9.84;χ2=8.85,P＜0.05)。P27在鳞癌组织中的阳性率较对照组低,两者差异有统计学意义(χ2=3.98,P＜0.05),P27在鳞癌组织各级间比较,差异无统计学意义(χ2=1.16,P＞0.05)。见表 1。

2.2 皮肤鳞状细胞癌组织 CyclinE与 P27、P53表达的相关性分析 30例皮肤鳞癌中,CyclinE与P27表达呈负相关性(r=-0.823,P＜0.05);CyclinE与 P53呈正相关性(r=0.768,P＜0.05)。

表 1 皮肤鳞状细胞癌组织中周期蛋白 E、P27、P53免疫组化结果(例数)

3 讨论

皮肤癌的发生率在近几十年有所增加。紫外线照射在人皮肤肿瘤中的作用已得到流行病调查的确认。此外,也与种族、电离辐射、经常接触砷、沥青等有关。皮肤癌的发生发展是一个多基因多步骤的过程,在分子水平上有癌基因的激活,抑癌基因的失活,肿瘤抑制基因的异常,凋亡机制发生缺陷等,这在皮肤癌的预防、早期诊断及治疗的分子策略方面提供新的思路[2,3]。

Bito等[4]检查了CyclinE在正常人皮肤、鳞癌中的表达,发现在角化不良细胞内较高表达,而在鳞癌中的表达较少,认为 CyclinE表达下调在角化细胞肿瘤形成方面起一定作用。然而有研究[5]发现,CyclinE在皮肤鳞癌组织中高表达。

本研究显示,CyclinE在皮肤鳞癌组织中的阳性表达率较正常人对照组高,且与分化和度呈相关性,分化程度越低,阳性表达率越高,提示 CyclinE在皮肤鳞癌组织分化转化中起作用。这与李灵等[6]的研究结果相同。

本研究显示,P27在皮肤鳞癌组织中的阳性表达较正常人对照组低,提示可能组织在癌变过程中 P27的阳性表达及表达程度在衰减,从而失去对细胞增殖的负性调控作用,导致肿瘤的发生。在皮肤鳞癌组织分级间表达强度差异无统计学意义,提示P27可能与皮肤鳞癌组织肿瘤细胞分化无关。

P53在正常人皮肤组织中的阳性表达率为 100%,表达强度较低,但较正常人对照组高,表明 P53在分级间表达强度差异有统计学意义,是反映皮肤鳞癌肿瘤细胞的恶性程度的指标。

本研究进一步证实了 CyclinE、P27、P53在皮肤鳞癌中有异常表达,在皮肤鳞癌中的发生发展中可能起一定作用。三者的相关性,有待进一步研究。

[1] 耿国军,刘林嶓.C-erbB-2、P16、nm23-H1与皮肤鳞状细胞癌的关系.河南肿瘤学杂志,2005,18(1):74-76.

[2] 马文丽,郑文岭.分子肿瘤学.北京:科学出版社,2003:76-80.

[3] 李明鸣,刘林嶓,马长路.NF-κb/p65,p-IκBa,IκKa在皮肤 SCC和BCC中的表达和意义.中国美容医学,2006,15(12):1339-1341.

[4] Bito T,Ueda M,Ito A.etal.Less expression of Cyclin E in cutaneoussquamous cell carcinomas than in begnign and premalignant keratinocytis lesions.Jcutan pathol,1997,24:305-308.

[5] 曲才杰,史同新,林桂铭.P27和细胞周期蛋白 E在Bowen病及皮肤鳞状细胞癌中的表达.中华皮肤科杂志,2006,39(2):71-73.

[6] 李灵,李利,张谊芝.细胞周期蛋白 E、P27、增殖细胞核抗原在皮肤鳞状细胞癌中的表达.中华皮肤科杂志,2006,39(11):656.

Correlation of CyclinE,P27 and P53 protein expressions in skin cancer

CAOWan-wei,LIU Shao-xuan,GUO Yong-yi,et al.Department of Pathology,The Fifth Affiliated Hospital of Syb Yat-sen University,Zhuhai 519000,China

Objective To investigate the expression and their relationship of CyclinE,P27,P53 skin cancer.Methods Theexpression of CyclinE,P27,P53 in cancer tissueswereassessed by immunohistochemical method.The relationship between these three and the Broders standard classification,and the correlation of CyclinE and P27,P53WEREANALYZED.Results Expression of CyclinE,P27 in skin squamous cell carcinoma was significantly higher than in control group(χ2=12.05;χ2=25.15,P＜0.05).P27 in squamous cell carcinomawas lower than those in the controlgroup(χ2=3.98,P＜0.05).Compared between squamous cell carcinoma atall levels,expression of CyclinE and P53 was significantly different(χ2=9.84;χ2=8.85,P ＜0.05)and expression of P27 was notsignificantly different(χ2=1.16,P＞0.05).Conclusion There is abnormalexpression of CyclinE,P27 and P53 in skin squamous cell carcinoma.The abnormal expression p lay a role in the development of squamous cell carcinoma in the skin.

CyclinE;P27;P53;Skin cancer

王晓鸿 E-mail:david_20070424@126.com

519000中山大学附属第五医院病理科(曹婉维刘少璇 王晓鸿),检验科(郭永谊)