复方肾炎灵胶囊提取工艺研究

顾媛媛，冯丽娜

(黑龙江中医药大学中医药研究院，黑龙江 哈尔滨 150040)

复方肾炎灵胶囊是由炙黄芪、白茯苓、石莲子、桑螵蛸、炙甘草、杜仲炭等药材组成，具有健脾益肾，固精止血之功效。临床用于治疗慢性肾小球肾炎、肾病综合征、糖尿病肾病和高血压肾病等疾病。为更好地发挥药效，本实验以黄芪甲苷和甘草酸铵的含量为指标［1－2］，采用正交试验 L9(34)法对醇提、水提工艺进行筛选并进行优化研究。

1 仪器与试药

Waters600E－2487型高效液相色谱仪(美国Waters公司);蒸发光散射检测器(Alltech 2000);2487型紫外检测器;DGG－9240B型电热恒温鼓风干燥箱;BP211D型电子天平(德国Sartorius公司);电热恒温水浴锅(江苏南通县通海电器厂);所有药材购于北京同仁堂药店哈尔滨分店;黄芪甲苷(批号110781－200512)、甘草酸铵(批号110731－200614)均购于中国药品生物制品检定所;甲醇、乙腈为色谱纯;其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 醇提部分工艺条件的选择［3］

2．1．1 正交试验设计 根据浸出原理和影响浸出因素，选定了4个因素，包括乙醇浓度、用量、提取时间和提取次数，每个因素分3个水平。见表1。

表1 因素水平表

2．1．2 提取方法

按处方量称取黄芪等药材，按正交试验表进行试验。加一定浓度的乙醇加热回流提取，滤过，收集滤液，回收乙醇，浓缩至稠浸膏，干燥，称量，粉碎，按照2005版《中国药典》炙黄芪项下的含量测定方法，用ELSD－HPLC法测定黄芪甲苷含量，结果见表2，表3。

表2 L9(34)计算表

表3 方差分析表

2．2 水提部分工艺条件的选择［4］

选定4个因素，包括浸泡时间、用水量、煎煮时间和煎煮次数，每个因素选3个水平，见表4。

表4 因素水平表

2．3 提取方法

按处方量称取炙甘草、白茯苓、桑螵蛸等药材，按正交试验表进行试验。加一定量的水煎煮提取，滤过，收集滤液，浓缩至稠膏，干燥，称量，粉碎，用流动相即甲醇:0.02mol/L 乙酸铵:冰乙酸(76∶24∶1)溶解，按照2005版《中国药典》甘草项下的含量测定方法，用HPLC法测定甘草酸铵的含量，结果见表5，表6。

表5 L9(34)计算表

表6 方差分析

3 最佳工艺条件的确定

3．1 醇提工艺条件的确定 经直观分析，知B＞A＞D＞C，方差分析无统计学意义，则最佳工艺条件为A3B2C3D1，即用5倍量80%乙醇提取2次，每次2h。按照此条件验证3批，结果与正交试验基本一致，说明此工艺稳定可行。

3．2 水提工艺条件的确定 方差分析表明，只有因素B有显著影响，从直观分析来看以A2C3D3最佳，但考虑到实际生产和能源消耗，D因素采用1水平为宜，则最佳工艺条件为B3C3D1A2，即用12倍水，煎煮3次，每次1h，浸泡时间为60min。按照此条件验证3批，结果与正交试验基本一致，说明此工艺稳定可行。

4 讨论

根据本复方中药物的化学成分和主要药理药效关系，工艺中采取了醇提和水提两部分制备，黄芪为君药，所以采用黄芪甲苷的含量作为评价指标，黄芪甲苷在紫外200nm处有较弱吸收，且干扰大，灵敏度低。而蒸发光散射检测器(ELSD)是一种通用型检测器，不但杂质峰较少，而且方法简便，结果准确、可靠。水提部分则选用甘草酸铵作为评价指标，通过实验表明所选工艺条件简便易行，质量控制可靠，适用于大生产。

［1］杨海燕，徐长根．HPLC－ELSD测定痛宁片中黄芪甲苷的含量［J］．中成药，2007，29(3):467 －468．

［2］吴雨川，庄舒翔，寻延滨，等．HPLC法测定复方铝酸铋片中甘草酸含量［J］．中医药学报，2009，37(4):56 －57．

［3］熊汝菊，毛春芹，谈瑄忠．多指标综合评分法优化更年康颗粒醇提工艺［J］．中国中医药信息杂志，2008，15(4):61 －63．

［4］刘玉红，崔红梅，陈燕，等．正交试验法研究甘草的提取工艺［J］．中成药，2004，26(3):239 －241．