CD4+、CD8+T细胞检测对传染性单核细胞增多症的临床意义

马 强，刘正娟

(1.泰安市儿童医院 儿内一科，山东 泰安 271000;2.大连医科大学 附属第二医院 儿科，辽宁 大连 116027)

Epstein-Barr(EB)病毒是一种嗜B细胞的人类疱疹病毒，与多种疾病相关。在儿科以传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)为多见，还可引起呼吸道感染、川崎病、特发性血小板减少性紫癜、病毒性心肌炎、病毒性脑炎等[1](非典型EB病毒感染)。临床表现酷似IM而非EB病毒感染所致者称为传染性单核细胞增多综合征(infections mononucleosis syndrome，简称传单综合征)，其常见病原为巨细胞病毒(CMV)、人疱疹病毒-6、HIV、腺病毒、单纯疱疹病毒(HSV)、肺炎支原体、化脓性链球菌、弓形虫等[2]。

近年来，IM患儿T细胞亚群的变化受到了很多的关注。通过对大连医科大学附属第二医院儿科2008年3月～2010年1月收治的IM患儿CD4+、CD8+T细胞的检测，并与非典型EB病毒感染、传单综合征、正常对照组对比，分析CD4+、CD8+T细胞对IM的临床意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

IM组为2008年3月～2010年1月大连医科大学附属第二医院收治的IM患儿，共27例，男17例，女10例，平均年龄3岁4个月，其中1例半年后再次住院诊断为急性淋巴细胞白血病。非典型EB病毒感染组为该院同期收治的非典型EB病毒感染患儿，共16例，男10例，女6例，平均年龄4岁8个月。传单综合征组20例，男11例，女9例，平均年龄6岁3个月。正常对照组为同期大连医科大学附属第二医院门诊体检健康儿童，23例，男14例，女9例，平均年龄3岁10个月，性别和年龄差别与IM组差异无统计学意义。

1.2 诊断标准

1.2.1 IM诊断标准：参考《诸福棠实用儿科学》[3]：(1)以下临床症状至少3项阳性：发热、咽炎、扁桃体炎、颈部淋巴结肿大(1 cm以上)、肝脏肿大、脾脏肿大；(2)异型淋巴细胞比例达10％以上或绝对值>1.0×109/L；(3)EBV-CA-IgM阳性和(或)EBV-CA-IgG为低亲合力抗体，且EBV-NA-IgG阴性。(EBV-CA为EB病毒衣壳抗原；EBV-NA为EB病毒核抗原)

1.2.2 传单综合征诊断标准[4]：(1)临床表现有发热、淋巴结肿大、肝脾肿大、皮疹、肝功损害；(2)外周血异型淋巴细胞达10％以上或绝对值>1.0×109/L；(3)抗EB病毒抗体阴性。

1.2.3 非典型EB病毒感染诊断标准[5]：EBV-CA-IgM阳性，EBV-NA-IgG阴性，有相应临床表现，并能排除IM的为非典型EB病毒感染。

1.3 方 法

CD4、CD8用流式细胞仪Facscalibur测定，该仪器及试剂盒均购自美国BD公司。EBV-CA-IgM、IgG，EBV-NA-IgG用ELISA方法定性测定，试剂购自Organon Technika公司。操作均按试剂说明书。

1.4 统计学方法

2 结 果

2.1 IM与传单综合征临床表现比较

IM皆有发热，最高体温38.3～39.6℃，发热2～13 d。咽扁桃体炎22例(81％)，主要表现为咽痛、咽扁桃体充血、扁桃体表面见白色或黄色分泌物(假膜)。颈部淋巴结肿大22例(85％)。肝肿大13例(48％)，而肝功异常者18例(67％)，两项皆异常4例(15％)，可见肝肿大与肝功异常并不相匹配。传单综合征临床表现与IM相似。IM与传单综合征临床表现比较结果见表1。

表1 IM与传单综合征临床表现比较

2.2 四组CD4+、CD8+T细胞变化比较

IM组CD4+T细胞(26.76±8.98)％，低于正常值。CD8+T细胞(46.36±12.15)％，高于正常值，CD4/CD8比值0.64±0.31，明显降低。与非典型EB病毒感染组、传单综合征组、正常对照组比较，差异均有显著性意义(P<0.05)，见表2。

表2 四组CD4+、CD8+T细胞变化比较

1)与其余各组比较P<0.05；2)与其余各组比较P<0.01

3 讨 论

辅助T淋巴细胞(Th)及效应T淋巴细胞为CD4+T细胞，而细胞毒性T淋巴细胞(Tc)和抑制性T淋巴细胞(Ts)为CD8+T细胞。Th释放细胞活性因子辅助B淋巴细胞及效应T淋巴细胞活化，而Ts则通过释放抑制因子抑制B淋巴细胞及效应T淋巴细胞活化[6]。CD4+及CD8+T淋巴细胞的比值反应机体免疫水平的高低，比值降低说明细胞免疫功能下降。

EB病毒感染机体后，刺激CD23+B淋巴细胞增殖，增殖的B细胞具有复制病毒的能力[7]，并引起CD4+T细胞增殖。在病毒复制部位，CD4+T细胞通过释放淋巴因子，对局部的炎症反应起调节作用，并限制被感染的B细胞增殖，同时CD4+T细胞被消耗[8]。在大量的病毒抗原刺激下，CD8+T细胞增殖，其活性也大大增强，具有很强的细胞毒作用。在体液及淋巴结中溶解破坏带有病毒的CD23+B细胞，抑制其异常增殖，同时释放过量细胞因子导致IM症状[9]。T细胞激活程度与IM临床症状严重程度相关联。大部分EB病毒被清除，故IM多呈自限性，预后良好。但是，有时EB病毒可通过某种机制逃避机体的免疫监视和攻击，使带有病毒的CD23+B细胞不被免疫系统识别和破坏。EB病毒长期潜伏于B淋巴细胞内。在T细胞缺乏或功能降低时表现为慢性活动性EB病毒感染或转化为恶性肿瘤细胞[10]。有研究报道，部分IM患儿恢复期CD4、CD8并未恢复正常，机体仍处于免疫紊乱状态[11]。EB病毒感染所致细胞免疫功能持续紊乱，是IM后继发肿瘤的高危因素[12]。不同年龄段患者IM后继发疾病亦不同，Burkitt’s淋巴瘤多发于幼儿，而慢性EB病毒感染相关性淋巴细胞增殖性疾病则多发于青少年，到20岁左右NK细胞/ T细胞淋巴瘤较多见[13]。

本研究检测了IM患儿急性期CD4+、CD8+T细胞，并与正常对照组比较，结果表明IM急性期CD4+T细胞和CD4/CD8比值明显降低，CD8+T细胞明显升高，提示存在明显免疫紊乱。临床工作中除积极抗病毒治疗外，可加用免疫调节药物，促进疾病恢复。本院发现IM后继发急性淋巴细胞白血病1例，动态观察该患儿CD4+、CD8+T细胞，皆明显异常。因此，非常有必要随访观察CD4+、CD8+T细胞。

除EB病毒感染导致IM外，还有多种病原可以产生类似的症状，如巨细胞病毒(CMV)、肺炎支原体等。与EB病毒感染所致IM相比，CMV感染发热程度上无明显差异，但渗出性咽峡炎相对少见，淋巴结肿大例数较少，程度较轻，肝损害程度较轻[14]，肺炎支原体感染所致IM病例肝损害、渗出性咽峡炎比例低，淋巴结及肝脾肿大程度较轻[15]。EB病毒所致IM症状更典型，程度较重。本研究对IM和传单综合征中CD4+、CD8+T淋巴细胞变化作了比较，结果表明IM的变化更明显，IM临床表现严重可能与此有关。抗体检测不明确时，行该检查有助于鉴别IM及传单综合征。

中国IM发病的高峰年龄在学龄前和学龄期，嗜异性凝集抗体常常阴性[16]。而异型淋巴细胞比例的检测结果受患儿年龄、标本采集时间、仪器精密程度、检验人员技术水平等影响，需动态复查。学龄前儿童IM中异淋>10％者只有41.8％[17]。本研究对IM及非典型EB病毒感染CD4+、CD8+T淋巴细胞变化作了比较，结果表明IM的细胞亚群变化更明显，CD4/CD8比值大都倒置，提示明确EB病毒感染，但临床症状不典型、辅助检查证据不足时，行CD4+、CD8+T细胞检测有助于IM诊断及治疗。

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