“沙棘花青素软胶囊”抗氧化实验研究

邹元生,徐 瑞,樊柏林

(1.高原圣果沙棘制品有限公司,北京,100037;2.湖北省疾病预防控制中心,武汉,430079)

现代医学研究表明,中老年人生理机能随年龄的增加而下降,特别是人体内源性抗氧化酶的活性下降,过多的氧自由基不能得到及时的清除。自由基学说表明人体的许多疾病和衰老与氧自由基作用有关[1]。通过获取天然抗氧剂来应对自由基的损伤是一条重要的途径。沙棘籽富含原花青素,因它的提取物含有更多的二聚体、三聚体,其生物活性可能要优于葡萄籽原花青素提取物[2-3]。本试验对沙棘籽原花青素抗氧化活性进行研究,拟研制沙棘原花青素抗氧化功能保健食品。

1 材料和方法

1.1 样品来源及处理

受试物由高原圣果沙棘制品有限公司提供的有沙棘原花青素为功效成分的高原圣果牌沙棘花青素软胶囊制剂,内容物为棕色油状液体,用大豆油配制成所需浓度,灌胃给予。

1.2 实验动物

SPF级昆明种雌性11月龄小鼠55只,雌性1月龄小鼠11只,由湖北省实验动物研究中心提供,实验动物生产许可证号为 SCXK(鄂)2003～0005,实验动物使用许可证号为 SYXK(鄂)2003-0014。动物饲养室温度为20～24℃,湿度为40%～70%。

1.3 剂量分组

将11月龄小鼠55只按血中丙二醛 (MDA)水平随机分为5组,分别为老龄对照组、溶剂对照组及低、中、高剂量组。低、中、高剂量组分别以0.2167、0.4333、0.8667g/kg BW 连续经口灌胃30d,相当于人群推荐日摄入量2.6g/60kg BW(即 0.04333g/kg BW)的 5、10、20倍。老龄阴性对照组给予等容量的蒸馏水,溶剂对照组给予等容量的大豆油。

样品配制:准确称取受试样品 1.08g、2.17g、4.33g,分别用大豆油定容至100ml,配制浓度分别为 0.0108、0.0207、0.0433g/ml。各剂量组均按0.20ml/10g BW容量灌胃。

1.4 实验方法

受试物动物连续灌胃30d后,处死动物,取肝脏匀浆,制备1%的肝匀浆进行丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)活力及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-PX)活力测定 (试剂盒购自南京建成生物工程研究所)。

1.5 实验数据统计

实验数据用Microsoft Excel及SPSS软件建立数据库,采用方差分析法先进行方差齐性检验。方差齐,采用多组比较进行显著性检验,如P＞0.05,认为各组均数间差异无显著性;如P≤0.05,还应将多个实验组和对照组间均数进行两两比较。方差不齐时采用非参数法 (秩和检验)进行显著性检验。

2 结果

2.1 对老龄小鼠体重的影响

由表1可见,各组动物给予受试物30d后体重无显著性差异 (p＞0.05),说明高原圣果牌沙棘清基软胶囊对老龄小鼠体重无影响。

2.2 对老龄小鼠肝匀浆中MDA含量的影响

由表2可见,高剂量组可明显减少老龄小鼠1%肝匀浆中MDA含量,与老龄阴性对照组及溶剂对照组比较,差异均有显著性(p＜0.01,p＜0.01)。

表1 高原圣果牌沙棘花青素软胶囊对老龄小鼠体重的影响( ±s)

表1 高原圣果牌沙棘花青素软胶囊对老龄小鼠体重的影响( ±s)

剂 量(g/kgBW)动 物 数(只)体重(g)试验前 p值 试验后 p值老龄阴性对照 11 54.4±5.9 0.653 52.6±6.1 0.267溶剂对照 11 52.3±4.9 52.7±3.7 0.2167 11 54.8±4.0 54.9±4.2 0.4333 11 52.6±3.4 50.8±3.2 0.8667 11 53.7±4.6 52.0±3.8

表2 高原圣果牌沙棘花青素软胶囊对老龄小鼠MDA含量的影响(±s)

表2 高原圣果牌沙棘花青素软胶囊对老龄小鼠MDA含量的影响(±s)

剂 量(g/kgBW)动物数(只)MDA(nmol/mgprot)试 验 前 试 验 后1%溶血液 p值 1%肝匀浆 p值(与老龄对照比)p值(与溶剂对照比)老龄阴性对照 11 8.25±1.09 1.000 6.39±1.50 - 1.000溶剂对照 11 8.33±0.97 6.30±1.53 1.000 -0.2167 11 8.32±0.78 6.17±1.26 0.996 1.000 0.4333 11 8.34±0.77 5.78±2.06 0.776 0.870 0.8667 11 8.35±0.78 4.20±1.09 0.003 0.005少龄对照 11 - 3.95±0.88 0.001 0.001

2.3 对老龄小鼠SOD、GSH-PX活力的影响

由表3可见,高剂量组老龄小鼠1%肝匀浆中SOD活性升高,与老龄阴性对照组及溶剂对照组比较有显著性差异 (p＜0.05,p＜0.05)。各剂量组老龄小鼠1%肝匀浆中GSH-PX活性与老龄阴性对照组及溶剂对照组比较无显著性差异(p＞0.05,p＞0.05)。

表3 高原圣果牌沙棘花青素软胶囊对老龄小鼠1%肝匀浆SOD、GSH-PX活力的影响 (±s)

表3 高原圣果牌沙棘花青素软胶囊对老龄小鼠1%肝匀浆SOD、GSH-PX活力的影响 (±s)

剂 量(g/kgBW)动物数(只)SOD活力(U/mgprot)p值(与老龄阴性对照比)p值(与溶剂对照比)GSH-PX(U/mgprot)p值(与老龄阴性对照比)p值(与溶剂对照比)老龄阴性对照 11 148.8±35.8 - 1.000 1293.6±352.7 - 1.000溶剂对照 11 146.5±31.1 1.000 - 1297.0±274.4 1.000 -0.2167 11 157.0±17.3 0.151 0.300 1216.3±412.8 0.980 0.976 0.4333 11 169.9±20.1 0.047 0.065 1434.7±361.7 0.811 0.824 0.8667 11 178.2±11.6 0.010 0.034 1324.0±339.5 1.000 1.000少龄对照 11 182.6±22.0 0.013 0.016 1697.1±350.0 0.038 0.040

3 小结

根据以上结果,受试样品组与老龄阴性对照组及溶剂对照组比较,MDA含量降低及SOD活力升高均有统计学意义,判定高原圣果牌沙棘清基软胶囊抗氧化功能试验结果为阳性。

[1]蔡美琴主编.《医学营养学》[M],上海科学技术文献出版社,上海.

[2]刘朵花,等.沙棘和葡萄籽中原花青素的对比研究[J].沙棘,2000,13(1):35-37.

[3]金海英,等.沙棘籽原花青素提取物抗氧化作用研究[J].沙棘,2005,18(1):35-37.