褐菇多糖对衰老小鼠模型的抗衰老作用

黄 静，荀冬雪，常 兴

（辽宁工程技术大学理学院，辽宁阜新123000）

褐菇多糖对衰老小鼠模型的抗衰老作用

黄 静，荀冬雪，常 兴

（辽宁工程技术大学理学院，辽宁阜新123000）

通过建立D-半乳糖致衰老小鼠模型，研究了褐菇多糖的抗衰老作用。采用跳台实验、耐缺氧实验及耐寒实验观测了小鼠学习记忆能力、抗应激能力的变化。测定了小鼠血清乙酰胆碱酯酶（AchE）、过氧化脂质（LPO）和脑中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、B型单胺氧化酶（MAO-B）指标变化。结果表明，褐菇多糖可显著提高D-半乳糖所致衰老小鼠的学习记忆能力及抗应激能力（p＜0.01），显著增加其血清AchE及脑SOD（p＜0.01）活性，显著降低血清LPO、脑MDA和MAO-B（p＜0.01）水平。褐菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用。

褐菇，多糖，D-半乳糖，抗衰老

衰老是生物随着时间的推移自发的必然过程，它是复杂的自然现象，表现为结构和机能衰退，适应性和抵抗力减退。目前，随着科学技术的腾飞，抗衰老研究也有了很大的发展。褐菇是欧美市场最畅销的食用菌名贵品种，除具备一般蘑菇所具有的高蛋白、低脂肪、低胆固醇特点外，还具有提高人体免疫力、防癌抗癌、保肝护肝、美容驻颜等作用［1］，但褐菇多糖是否具有抗衰老作用尚未见报道。因此拟制作有临床价值的亚急性衰老动物模型，再用褐菇多糖进行实验性治疗，以研究褐菇多糖延缓衰老的机理。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

昆明种小鼠180只 体重19±2g，雌雄各半，大连医科大学动物中心；D-半乳糖 国药集团化学试剂有限公司；褐菇多糖 本实验室自制，水提醇沉，Sevage法去蛋白，DEAE-纤维素离子交换柱及SephadexG-100层析柱纯化；AchE、LPO、SOD、MDA、MAO-B试剂盒 南京建成生物工程研究所。

UV754紫外可见分光光度计 北京天美生物公司；WX-2型小鼠电光刺激条件反射跳台 中国医学科学院药物研究所。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组与给药［2-3］小鼠60只，随机分成6小组：分别为正常组（1）、模型对照组（2）、低剂量褐菇多糖组（3）、中剂量褐菇多糖组（4）、高剂量褐菇多糖组（5）、阳性对照组（6）。除正常组外，其余各组120mg/kg每日颈背皮下注射D-半乳糖，连续40d，致亚急性衰老模型，正常组注射等量0.9%生理盐水。造模同时分别灌胃给予低、中、高剂量褐菇多糖组褐菇多糖50、100、150mg/kg·d，阳性对照组给予维生素E 20mg/kg·d，空白对照组及衰老模型给予生理盐水20mL/kg·d。

1.2.2 小鼠学习记忆能力（跳台法［4］） 将小鼠放入跳台仪中适应5min后，轻放于平台上，当小鼠从跳台上跳下四肢接触铜栅时，即给予40V交流电刺激，记录通电后其跳至安全台上的潜伏期，并记录5min内的触电次数（错误次数），以此作为学习成绩。24h后进行测试，将小鼠置平台上，记录其第一次跳下受电击的时间（潜伏期）及其3min内受电击的次数（错误次数）以此作为记忆功能评价的指标。测试时若小鼠停留在平台上超过3min，其潜伏期以180s计。

表1 褐菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的影响

1.2.3 小鼠血清AchE、LPO，脑SOD、MDA、MAO-B测定［5-6］小鼠跳台实验后眼眶取血并分离血清，参照试剂盒说明书测定血清AchE活性、LPO含量。小鼠取血后处死取脑，置匀浆器中，加入预冷生理盐水制成10%（g/mL）的脑匀浆，按试剂盒说明书测定SOD和MAO-B活性、MDA的含量。

1.2.4 小鼠抗应激能力

1.2.4.1 耐缺氧实验［7］另取60只小鼠，分组及给药同1.2.1。每组各取小鼠10只，将各组小鼠每只分别置于装有20g钠石灰的250mL的广口瓶内，瓶盖周围涂凡士林封闭，观察小鼠因缺氧而窒息死亡时间。以小鼠呼吸停止为判断死亡标准，记录小鼠的存活时间，实验在26±1℃进行。

1.2.4.2 耐寒实验［8］再取60只小鼠，分组及给药同1.2.1。将小鼠置于-20℃低温冰箱中，记录该寒冷条件下小鼠的存活时间。

1.2.5 统计学分析 全部数据以均数 ±标准差表示，组间比较采用SPSS13.0以单因素方差分析。

2 结果与讨论

2.1 褐菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力的影响

结果表明，D-半乳糖已对衰老模型组小鼠学习记忆功能造成损害，而褐菇多糖能改善D-半乳糖引起的学习记忆功能损害，且效果随剂量增加而增强（结果见表1）。

2.2 褐菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠血清AchE、LPO、脑SOD、MDA、MAO-B各指标的影响

结果表明，褐菇多糖能增加D-半乳糖所致衰老小鼠血清AchE及脑SOD活性，降低血清LPO和脑MDA含量及MAO-B活性，并且随褐菇多糖剂量的增加，效果更加明显（结果见表2、表3）。

表2 褐菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠血清AchE、LPO的影响

表3 褐菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠脑SOD、MDA、MAO-B的影响

2.3 褐菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠抗应激能力的影响

结果表明，褐菇多糖能增加D-半乳糖所致衰老小鼠耐常压缺氧及耐寒能力，并且随褐菇多糖剂量的增加，效果更加明显（结果见表4）。

表4 褐菇多糖对D-半乳糖致衰老小鼠抗应激能力的影响

3 结论

衰老模型组与正常组相比，学习记忆及抗应激能力，血清AchE及脑SOD活性极显著下降（P＜0.01），血清LPO、脑MDA含量和MAO-B活性极显著上升（P＜0.01），说明造模成功。而服用褐菇多糖组与衰老模型组相比，学习记忆及抗应激能力、血清AchE及脑SOD活性极显著上升（P＜0.01），血清LPO、脑MDA含量和MAO-B活性极显著下降（P＜0.01），提示褐菇多糖通过调节抗脂质过氧化及中枢胆碱神经系统，使机体的各项生命体征得到改善，从而起到延缓衰老的作用。

［1］Beelman R B，Royse D J，Chikthimmah N.Bioactive components in button mushroom Agaricus bisporus（J.Lge）imbach（agaricomycetideae）ofnutritional，medicinaland biological importance［J］.Review InternationalJournalofMedicinal Mushrooms，2003（5）：321-337.

［2］梁妍，叶兰，郝小燕.天参益智股囊对D一半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响［J］.时珍国医国药，2009，20（8）：1940.

［3］虞磊，沈业寿，吴建民，等.蜜环菌菌索多糖抗衰老作用研究［J］.中成药，2006，28（7）：995.

［4］包金风，包金云，李锦明，等.脑力智宝对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的抗衰老作用及其机制［J］.中国老年学杂志，2004，24（8）：742-744.

［5］戚颖欣，曹柏营，郑鸿雁，等.奇可力多糖抗衰老作用的实验研究［J］.食品科学，2008，29（9）：565.

［6］刘金珠，林湘，李续娥.决明子蛋白质和蒽醌苷对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及代谢产物的影响［J］.中国中药杂志，2007，32（6）：516-519.

［7］吕锦芳，张勤，宁康健，等.肌肽对小鼠的抗衰老作用［J］.环境与健康杂志，2008，25（3）：238-240.

［8］谢世荣，黄彩云，黄胜英.五加皮水提液的抗衰老作用研究［J］.中药药理与临床，2004，20（2）：26.

Anti-aging action of polysaccharide from portabella on the model of aging mice

HUANG Jing，XUN Dong-xue，CHANG Xing
（College of Science，Liaoning Technical University，Fuxin 123000，China）

Anti-aging action of polysaccharide from portabella was studied through the model of aging mice induced by D-galactose.The variation of learning and memory ability，anti irritability of mice were observed by step down test，cold-resistant test and hypoxia tolerance test.AchE and LPO in serum of mice，SOD and MDA and MAO-B in brain of mice were observed.The results showed learning and memory ability and anti irritability were notably enhanced（p＜0.01），AchE in serum and SOD in brain were notably increased（p＜0.01），LPO in serum and MDA and MAO-B in brain were notably reduced（p＜0.01）.Polysaccharide from portabella has the effect of anti-aging action on aging mice induced by D-galactose.

portabella；polysaccharide；D-galactose；anti-aging

TS201.1

A

1002-0306（2010）12-0326-03

2009-11-13

黄静（1978-），女，讲师，主要从事天然产物提取及抗衰老的研究。

辽宁工程技术大学优秀青年基金资助（09-272）。