酸碱性对舒胸片6种成分在4种大孔树脂上静态吸附性能的影响

杨 平， 夏新华， 李淑辉， 彭买姣， 邹婉婷

（湖南中医药大学药学院，湖南 长沙 410208）

舒胸片系《中国药典》2005版一部收载的复方中药制剂，由三七、川芎、红花三味中药组方制备而成，具有活血、祛瘀、止痛的功效，临床主要用于瘀血阻滞、胸痹心痛、跌打损伤、瘀血肿痛、冠心病、心绞痛［1］、心律失常、软组织挫伤等。三七含皂苷类成分(人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1)，川芎含生物碱类成分(川芎嗪)与有机酸类成分(阿魏酸)，红花含黄酮类成分(羟基红花黄色素A)。为便于应用大孔树脂对该方混合提取液进行精制，以进一步开发其新剂型，本文在不同pH条件下对舒胸片混合提取液中上述6种有效成分在4种大孔树脂上的静态吸附性能进行了研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器 shimadzu LC-10Atvp型高效液相色谱仪；shimadzu SPD-10Avp型紫外检测器；N3000色谱工作站；AY120 SHIMADZU分析天平。

1.2 试药 人参皂苷Rg1(批号:110703-200322，供含量测定用)、人参皂苷Rb1(批号:110704-200318，供含量测定用)、人参皂苷 Re(批号:110754-200319，供含量测定用)、三七皂苷 R1(批号:110745-200312)、川芎嗪(批号:110817-200305 ，供含量测定用)、阿魏酸(批号:07733-9910，供含量测定用)、羟基红花黄色素A对照品(批号:111637-200502，供含量测定用)，均由中国药品生物制品检定所提供。乙腈为色谱纯(Caledon Laboratories LTD.)，水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。三七、川芎、红花药材由湖南三湘中药饮片有限公司提供。LSA-7、LSA-30型大孔吸附树脂，由西安蓝深交换吸附材料有限责任公司提供；D101-A大孔吸附树脂由天津市骨胶厂提供；HPD-100型大孔吸附树脂由沧州宝恩化工有限公司提供。

2 方法与结果

2.1 舒胸片提取液的制备 按《药典》舒胸片处方各药味比例，取三七细粉，加50%乙醇浸泡2.5 h，回流提取2次，加醇量分别为药材的8倍、6倍量，提取时间分别为2.5、2.0 h，收集醇提液，回收乙醇，备用；取川芎，加10倍量水煎煮2 h，滤过，滤液另存，药渣与红花加8倍量水煎煮2次，每次1 h，合并3次煎液，60℃减压浓缩至每1 mL含1 g生药，在搅拌下缓缓加入乙醇使含醇量达70%，静置24 h，滤过，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并，60℃减压浓缩至适当浓度(0.3 g生药/mL)，滤过，即得。

2.2 不同pH下树脂的静态吸附实验 称取LSA-7、LSA-30、D101A、HPD-100四种型号的湿树脂各2 g，每种型号4份，共16份，置于具塞三角锥型瓶中，分别加入浓度为0.3 g生药/mL的样品溶液，其pH值分别为 4.0、5.0、6.0、7.0，密封置于 25℃恒温水浴中并定时振摇，24 h后分别精密吸取上清液2 mL，分别用 HPLC法测定三七皂苷 R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、川芎嗪、阿魏酸、及羟基红花黄色素A的含量，同时测定原液(未经吸附的舒胸片提取液)中上述各有效成分的含量，并按下式计算各有效成分在大孔树脂上的比吸附量(A)。

式中:A为比吸附量(absorbtion ratio，mg/g)，即单位质量干树脂吸附某成分的量；M1为起始浓度(mg/mL)；M2为剩余浓度(mg/mL)；V为溶液体积(mL)；W为干树脂重量(g)，可根据树脂的含水量由湿树脂重折算得到。

2.3 pH对三七皂苷R1在不同树脂上吸附性能的影响 结果见图1。

图1 不同pH下三七皂苷R1在四种树脂上的比吸附量

由图 1 可见，LSA-7、LSA-30、HPD-100、D101A四种树脂对三七皂苷R1的比吸附量在pH4时较为相近。随pH增加，LSA-7树脂对三七皂苷R1的比吸附量明显增加，LSA-30、HPD-100两种树脂的比吸附量则呈现下降趋势；D101A树脂的比吸附量开始变化不大，到pH7时有所增加。

2.4 pH对人参皂苷Rg1在不同树脂上吸附性能的影响 结果见图2。

图2 不同pH下人参皂苷Rg1在4种树脂上的比吸附量

由图 2 可见，LSA-7、LSA-30、HPD-100、D101A四种树脂对人参皂苷Rg1的比吸附量在pH4时亦较为相近。随pH增加，LSA-7树脂对人参皂苷Rg1的比吸附量开始稍有下降，然后逐渐增加；HPD-100树脂的比吸附量则呈现下降趋势；LSA-30、D101A两种树脂的比吸附量变化不大。

2.5 pH对人参皂苷Rb1在不同树脂上吸附性能的影响 结果见图3。

图3 不同pH下人参皂苷Rb1在4种树脂上的比吸附量

由图3可见，LSA-7、HPD-100、D101A 3种树脂对人参皂苷Rb1的比吸附量在pH4时较为相近，而LSA-30的比吸附量则明显低于上述三者。随pH增加，LSA-7树脂对人参皂苷Rb1的比吸附量类似于上述人参皂苷Rg1，亦呈先抑后扬的趋势；HPD-100树脂的比吸附量呈逐步下降趋势；LSA-30、D101A两种树脂的比吸附量开始变化不大，然后有所下降。

2.6 pH对阿魏酸在不同树脂上吸附性能的影响结果见图4。

图4 不同pH下阿魏酸在4种树脂上的比吸附量

由图 4 可见，LSA-7、LSA-30、HPD-100、D101A四种树脂对阿魏酸的比吸附量在pH4时亦较为相近。随pH增加，HPD-100、D101A两种树脂对阿魏酸的比吸附量呈明显的单边下降趋势；而LSA-30、LSA-7二种树脂的比吸附量开始逐步下降，pH7时出现明显回升现象，尤其是LSA-7树脂。

2.7 pH对川芎嗪在不同树脂上吸附性能的影响结果见图5。

图5 不同pH下川芎嗪在4种树脂上的比吸附量

由图5可见，在pH4时，3种非极性树脂(LSA-30、HPD-100、D101)对川芎嗪的比吸附量相近，而极性树脂(LAS-7)对川芎嗪的比吸附量则明显少于上述三者。随pH的升高，3种非极性树脂(LSA-30、HPD-100、D101)的比吸附量变化不明显，而LAS-7树脂的比吸附量则呈明显增加趋势。

2.8 pH对羟基红花黄色素A在不同树脂上吸附性能的影响［2］结果见图6。

图6 不同pH下羟基红花黄色素A在4种树脂上的比吸附量

由图6可见，4种树脂对羟基红花黄色素A的吸附力均以pH4为佳，pH5～7范围内，吸附量均明显下降。羟基红花黄色素A属黄酮类，结构中含有多个酚-OH，且本身的极性大，水溶性强，故在大于pH4的溶液中，可能酚-OH中的氢更易解离，使其极性偏大，亲水性更强，不易被树脂吸附。

3 讨论

pH是影响中药复方有效成分在大孔树脂上吸附性能的一个重要因素［3］。上述研究表明，在3种非极性树脂(LSA-30、D101A、HPD-100)上，6 种成分中以阿魏酸、羟基红花黄色素A受pH影响较大，pH越低，比吸附量越大，这与其具有酸性基团(羧基-COOH)或酚-OH的结构在酸性溶液中溶解性降低而易被吸附有关。对于相同成分，树脂不同，pH影响的趋势亦有差异，其中极性树脂LSA-7与3种非极性树脂有明显的不同，除羟基红花黄色素A外，其它5种成分当pH较高(pH=7)时在树脂LSA-7上均有较好的吸附性能。因此，采用大孔树脂吸附分离复方多组分时，根据所选树脂的种类调节适宜的pH以满足多数成分的吸附分离是十分必要的。

［1］杨春艳.中药治疗冠状动脉粥样硬化心脏病心绞痛的临床观察［J］.中华中西医学杂志，2008，6(6):59.

［2］施 峰，王光忠，刘焱文.大孔树脂分离纯化红花黄色素的研究［J］.湖北中医学院院报，2007，9(1):47-48.

［3］胡秀峰，冯长根，曾庆轩，等.大孔树脂在红霉素提取中的应用进展［J］.国外医药抗生素分册，2004，25(1):17-19.