实验室中折光法快速测定展开剂展开效果

范 珍

安庆医药高等专科学校 安徽安庆 246000

实验室中折光法快速测定展开剂展开效果

范 珍

安庆医药高等专科学校 安徽安庆 246000

在薄层层析实验中，用阿贝折射仪通过折射率测定各种展开剂成份比例，与延长时间变化的问题，基于折射率的结果，实验者可以调节展开剂的折光率获得高品质的试验结果。本文提供了一个快速，可信的方法来衡量和调整每个组件的比例，以满足学生薄层色谱实验的需求。

展开剂；折射率；阿贝折射仪；薄层色谱法试验

目前高校实验室中，学生所做的薄层色谱法、纸色谱法试验中，其中定性参数比移值Rf和相对比移值Rr是否符合目标要求，亦即意味着实验成败与否。在影响Rf值和Rr值的诸多因素中，展开剂的影响最大。学生实验因为平行班级多，延续时间长且相互间隔时间不定，所用展开剂配制量大，由于大多展开剂以有机易挥发成分为主，随着时间的推移及环境温度的变化，展开剂中各组分比率会发生相应的变化，这种变化势必影响到Rf值和Rr值的测定。本文利用阿贝折光计快速测定学生实验维生素E性质测定实验中展开剂效果，根据折光率的变化调整展开剂的组分比例，获得满意的实验效果，从而提供了一种简单可行的展开剂测定方法。

一、仪器与药物

1.仪器

阿贝折光计2WAJ，上海光学仪器厂生产。

2.药物与试剂

环己烷(AR)(上海试剂一厂)、乙醚(AR)(上海试剂一厂)、维生素E胶囊(厦门鱼肝油厂)、0.5%羧甲基纤维素钠硅胶G薄板(青岛海洋化工厂，自制)。

二、维生素E的薄层色谱分析

1.实验方法

(1)不同比例展开剂折光率测定

选取展开剂环己烷、乙醚不同的配置比例(见表1)，实验进行前使用阿贝折光计于室温28℃下，等待阿贝折光计的棱镜组在清洁、干燥后合上，从棱镜组右边侧小孔滴加待测溶剂2～3滴，快速测定，分别测得其各自折光率。

表1 折光率检测结果

n乙醚=1.3598，n环己烷=1.4182

n(环己烷:乙醚，4:1)=1.4043，1.4032，1.4038，1.4035

n(环己烷:乙醚，5:1)=1.4056，1.4067，1.4055，1.4062

n(环己烷:乙醚，6:1)=1.4062，1.4082，1.4075，1.4088

n(环己烷:乙醚，7:1)=1.4088，1.4090，1.4104，1.4104

n(环己烷:乙醚，8:1)=1.4105，1.4103，1.4104，1.4104

n(环己烷:乙醚，10:1)=1.4108，1.4121，1.4111，1.4117

(2)不同时间段，展开剂折光率变化测定

选取学生实验大纲要求的展开剂比例，即环己烷:乙醚=4:1，室温28℃下，依据学生实验课程每课时45分钟，课间休息15分钟，间隔60分钟采样，使用阿贝折光计测定其折光率变化(见表2)：

表2

下干燥，置烤箱105℃活化30min后，取出放冷，沿一端1.5cm处用铅笔轻划一条起始线，用管口平整的毛细管于线上点样，晾干。取6只层析缸，分别加入不同比例展开剂，放入点好样的薄板，蒸气饱和5min，薄板下端浸入展开剂约1cm处，盖上缸盖，上行展开至展开前沿距起始线15cm处，取出，划下展开前沿位置。空气中自然晾干，喷浓硫酸溶液显色，测量原点至各斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值(Rf)，结果见表3：

表3

2.校正实验

另取环己烷:乙醚为6:1、7:1、8:1混合液各500ml，分别加入乙醚约25ml、46.5ml、55.5ml搅匀，分别调整其折光率至1.4040，放入层析缸，测得Rf(α-生育酚醋酸酯、α-生育酚、α-生育酚对苯醌)值为0.5:0.7:0.9。

3.实验结果分析

从上述结果看来，达到实验分离效果的展开剂，折光率不大于1.4060，也就是环己烷:乙醚的比例不超过5:1；当展开剂折光率大于1.4060时，各组分的Rf值变小，且间距缩小；当展开剂折光率大于1.4104时，各组分无法分离；同时随着时间的变化，原先配制的展开剂折光率发生变化，RF值逐渐发生漂移，最终不符合实验目的要求。

基于折光率的变化，对展开剂适量补充相应组分，调整其折光率值至与正确比例展开剂相近时，实验结果达到实验要求。

4.讨论

20世纪初，俄国植物学家茨维特建立了柱色谱法，20世纪20年代、30年代又相继出现了薄层色谱法和纸色谱法。在此基础上，经过一个世纪的发展色谱法已成为一种分析速度快，灵敏度高，分离效果好，应用范围广泛的重要分析方法。正因为色谱法有着如此多的优点，在医药、卫生、食品和化工等行业应用越来越广泛。在高校的实验室里，它也正式成为有机分析及药品分析实验中越来越重要的实验内容之一。

折光率(n)是液体和透明半透明固体的物理性质之一。液态单质标准条件下有其固定折光率，同密度、熔点、沸点一样，可视为常数。折光率也用于确定液体混合物的组成，当组分的结构相似和极性小时，混合物的折光率和浓度之间常呈线性关系。溶液中，溶质含量的不同，相应产生的折光率也不同。上述实验中,展开剂的组分简单,仅两种成分,当他们按一定比例混合后,相应产生不同折光率。通过建立工作表,即可快速判断展开剂的效果,是否适用于实验。

三、结束语

由本文的实验数据可看出，在大批量，长时间的学生实验中，用折光率快速判定展开剂组分能满足展开要求，简单、方便、准确，同时在实验中，我们还可以根据折光率的数值变化，相应补充某一组分，使其达到实验目的，这样可以达到提高试剂利用率，减低实验成本，减少试剂对环境影响的目的。因此用阿贝折光计快速测定展开剂的折光率来判断其展开效果，不失为一条简单可行之路。

[1]药典编委会.中华人民共和国药典2000版[M].北京：人民卫生出版社，2000

[2]牛彦辉.药物分析[M].北京：高等教育出版社，2006

[3]胡青.有机化学实验[M].北京：中国医药科技出版社,2007

[4]张其河.分析化学[M].北京:中国医药科技出版社，1996

[5]李彤,张庆合,张维冰.高效液相色谱仪器系统[M]. 北京：化学工业出版社，2004

[6]石东方.药物分析[M].北京：人民卫生出版社，2006

Fast tracing the result of developing agent by refractive index could improve the quality of student’s TLC experiment

Fan Zhen
Journal of Anqing medical and pharmaceutical college, Anqing, 246000, China

In order to solve the problem that the ratio of each component of the developing agent in TLC experiment will be changed with the time extended, this paper check refractive index to do fast tracing of the change of components’ by Abbe refractometer. Based on the result of refractive index, experimenter could adjust the developing agent to get high quality experiment result. This paper provides one fast and believable method to measure and adjust the ratio of each component to meet the demand of student’s TLC experiment.

developing agent; refractive index; Abbe refractometer; TLC experiment

2010-04-15

范珍，本科，实验师。