决明子对老龄大鼠晶状体抗氧化作用的有效活性部位研究

王彩萍

（太原市晋源区姚村镇卫生院，山西 太原 030054）

决明子为豆科植物决明Cassia obtusifolia L.或小决明Cassia toar L.的干燥成熟种子，始载于《神农本草经》。其性味甘、苦、咸、微寒，具有祛风散热、清肝明目之功效，常用于治疗目赤肿痛、青盲、雀目（白内障）等病症［1］。

白内障是世界上首位致盲因素，同时也是我国第一位致盲眼病。国外学者提出晶状体氧化损伤是白内障形成的启动因素［2］，且晶状体脂质过氧化损伤及抗氧化能力变化与年龄相关［3］。现代药理学表明，决明子具有显著的抗氧化作用，而决明子对晶状体的抗氧化作用尚无报道。我们采用决明子不同提取部位干预老龄大鼠，考察晶状体脂质过氧化及抗氧化能力的指标，如谷光苷肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）等，从而为决明子清肝明目的功效寻找科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 80只Wistar大鼠，雌雄各半，其中 10 只体重（200±20）g，余 70 只体重（500±50）g，由山西省中医药研究院实验动物室提供，合格证号：晋动（证）字第 A00－002 号。

1.1.2 药品与仪器 决明子购自山西中医学院第二中医院药房，经山西省药品检验所中药室鉴定为正品；SOD、MDA、GSH试剂盒均购自北京北化康泰临床试剂有限公司，批号分别为090422、090520、090520；其他试剂均为分析纯；Cary-50紫外可见光分光光度仪为美国瓦里安公司生产。

1.2 实验方法

1.2.1 实验药品制备 决明子粉碎成粗粉，分别采用极性由小到大的溶剂石油醚、乙酸乙酯、70%乙醇、水及水提醇沉的方法对其进行提取，加热回流3次，合并提取液，过滤后在水浴上充分挥干，即得提取物。决明子超临界提取物由中国科学院煤炭化学研究院超临界萃取所得。实验时各提取物用2%吐温-80 蒸馏水溶解配制［1］。

1.2.2 分组与给药 将体重（200±20）g的大鼠设为正常对照组，体重（500±50）g的大鼠随机分为空白对照组、超临界提取物组、石油醚提取物组、乙酸乙酯提取物组、70%乙醇提取物组、水提取物组、水提醇沉物组7组，每组10只。分别于实验开始时、第10天、第20天、第30天称重，正常对照组和空白对照组灌胃溶媒 （含2%吐温－80的蒸馏水，0.1 mL/10 g），余6组分别灌胃相应药物（1 g/kg）30 d。第30天处死动物行眼球摘除术，包入预先做好标记的锡箔纸中，投入液氮速冻，-80℃保存。取出眼球放置冰台，自赤道部切开眼球，完整取出晶状体，以生理盐水配制成100 g/L匀浆液，分别按照GSH、SOD、MDA试剂盒的要求进行测定。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 对大鼠体重的影响

实验过程中，正常对照组、空白对照组大鼠体重持续增加，正常对照组比空白对照组大鼠体重增幅大。第30天，超临界提取物组、乙酸乙酯提取物组、70%乙醇提取物组、水提取物组大鼠体重增加，与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）；石油醚提取物组、水提醇沉物组大鼠体重与空白对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

2.2 对大鼠晶状体中GSH活性、SOD活性、MDA含量的影响

结果见表1。

表1 决明子不同提取部位对老龄大鼠晶状体中SOD、GSH和MDA的影响 （±s）

表1 决明子不同提取部位对老龄大鼠晶状体中SOD、GSH和MDA的影响 （±s）

注：与正常对照组比较，1）P<0.05，2）P<0.01；与空白对照组比较，3）P<0.05，4）P<0.01

MDA（μmoL/mg）正常对照组 10 41.33±4.07 38.06±10.15 0.60±0.18空白对照组 8 34.74±4.321） 16.75±8.072） 1.74±0.502）超临界提取物组 9 43.01±5.414） 33.34±12.144） 0.85±0.234）石油醚提取物组 8 34.97±6.23 20.93±11.26 1.54±0.45乙酸乙酯提取物组 9 38.96±5.173） 29.95±13.393） 1.26±0.423）70%乙醇提取物组 8 39.24±4.913） 28.84±13.033） 1.18±0.324）水提取物组 9 39.84±5.263） 31.64±9.754） 0.98±0.374）水提醇沉物组 9 34.66±3.76 18.73±8.46 1.47±0.43组别 n GSH（U/mg）SOD（U/mg）

由表1可以看出，与正常对照组比较，空白对照组 GSH、SOD 显著降低，MDA 明显增高 （P＜0.05，P＜0.01）。与空白对照组比较，超临界提取物组、乙酸乙酯提取物组、70%乙醇提取物组、水提取物组GSH、SOD 显著升高，MDA 含量明显下降（P＜0.05，P＜0.01）；石油醚提取物组、水提醇沉物组与空白对照组GSH、SOD、MDA比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

3 讨 论

老龄生物可随年龄递增而出现全身各器官系统的退行性改变，其机制之一是老龄生物组织和细胞的抗氧化能力下降。体重（200±20）g的大鼠各器官发育水平相当于人类20岁即青年水平，体重（500±50）g的大鼠相当于60岁即进入老年水平。随年龄增长，大鼠晶状体GSH、SOD呈降低趋势，而MDA表现为升高趋势，说明大鼠晶状体抗氧化能力下降，则可能发生氧化损伤，进而形成白内障。这与有关文献报道基本一致［3-6］。

与空白对照组比较，超临界提取物组、70%乙醇提取物组、水提取物组、乙酸乙酯提取物组的GSH、SOD及MDA差异均有统计学意义。可见决明子超临界提取物部位、70%乙醇提取物部位、水提取物部位、乙酸乙酯提取物部位都能一定程度上抗老龄大鼠晶状体氧化，超临界提取物部位抗氧化作用最佳，且为决明子清肝明目的功效寻找到科学依据之一——抗晶状体氧化作用。

［1］张荣，王永辉，周然，等.决明子降血脂有效部位及其量效关系的实验研究［J］.中国药物与临床，2005，5（3）：183-187.

［2］Spector A.Oxidative stress-induced cataract mechanism of action［J］.Faseb J，1995，9（12）：1 173-1 179.

［3］卢艳，赵可浩，李林，等.中药对大鼠晶状体老化过程中脂质过氧化和抗氧化能力的干预作用［J］.国际眼科杂志，2008，8（6）：1 113-1 116.

［4］亓晓琳，张宏国，张静，等.补阳还五汤对大鼠视网膜缺血再灌注损伤的作用［J］.国际眼科杂志，2008，8（4）：732-739.

［5］Karslioglu I，Ertekin M V，Taysi S，et al.Radioprotective effects of metlatonin on radiation-induced cataract［J］.J Radint Res，2005，46（2）：277-282.

［6］Doganay S，Borazan M，Iraz M，et al.The effect of resveratrol in experimental cataract model formed by sodium selenite［J］.Curr Eye Res，2006，31（2）：147-153.