六味地黄丸对慢性再生障碍性贫血的疗效及对EPO、SCF细胞因子活性的影响

闫盈滨，闫中亮，吕中阳

(1.哈尔滨市天马血液病中医研究所，黑龙江 哈尔滨 150016;2.黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)

再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA，简称“再障”)是由化学、物理、生物因素及不明原因引起的造血干细胞和造血微环境损伤，以及免疫异常等致使骨髓造血功能部分或全部衰竭的疾病。本研究通过六味地黄丸(北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，批号:3072472)对再障患者EPO、SCF细胞因子活性的影响，进而评估该药对再障的临床疗效，现将结果报告如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 随机选择60例2005年3月～2005年12月在我院血液科住院慢性再障患者，总计60例，中医证型为肾阴虚。按随机数字表法分为治疗组30例，对照组30例。另取健康人骨髓10例作为正常组。两组患者性别、年龄、病程、骨髓增生度等的分布情况基本一致，经统计学分析，无显著性差异，具有可比性。

1.2 诊断标准

1.2.1 慢性再障的诊断标准［1］参照张之南主编《血液病诊断及疗效标准》(第2版)。

1.2.2 纳入标准

①全血细胞减少，网织红细胞绝对值下降，血红蛋白下降缓慢;②骨髓象示:两到三系全血细胞减少;至少一个部位增生不良;如增生良好红系常有晚幼红细胞比例升高;巨核细胞明显减少。骨髓小粒中脂肪细胞及非造血细胞增多;③临床发病缓慢，出血感染轻，一般无脾肿大;④能除外其他引起全血细胞减少的疾病，如骨髓增生异常综合征、骨髓纤维化、急性造血功能停滞、阵发性睡眠性血红蛋白尿症、急性白血病、恶性组织细胞增多症等;⑤一般抗贫血药物治疗无效;⑥能随访，依从性好。

1.2.3 排除标准

①妊娠期或哺乳期妇女;②曾有可能引起继发性疾病史或药物史;③严重不可控制的出血;④严重不可控制的感染;⑤主要器官功能衰竭，如失常的心肺功能衰竭;⑥同时合并有未治愈的第二种血液病或其他恶性疾病。

1.3 中医证型标准

参见1989年大连全国中西医结合血液病专业委员会第三届第二次学术会议制定标准。肾阴虚型:低热、盗汗、眩晕耳鸣、手足心热、口渴咽干思饮、失眠多梦、出血明显、常有感染、舌红、苔少、脉细数。

1.4 治疗方法

两组慢性再障患者均停用其他治疗再障的药物2周后进行观察。治疗组给予六味地黄丸，1次1丸，每日两次;同时口服康力龙2mg，每日3次。3个月为1个疗程，2个疗程后作疗效判定。对照组给予康力龙2mg，每日3次，口服，3个月为1个疗程，2个疗程后作疗效判定。两组患者治疗期间，均配合对症支持治疗，如合并细菌感染者，及时应用抗生素控制感染;血红蛋白低于45g·L－1，临床贫血症状明显者，给予间断输血;出血严重者给予止血药或输注浓集血小板。每周复查血常规1次，1～2个月复查肝功1次，治疗前后各做骨髓穿刺1次。正常组仅抽取骨髓标本，不作任何处理。

1.5 疗效判定

1.5.1 症状计分标准［2］

头晕、乏力、耳鸣、自汗、潮热盗汗、腰膝酸软、发热、手足心热、失眠多梦、咽干口渴、小便短赤、便干。上述症状中没有感觉，计0分;稍有感觉，计1分;感觉较重，但可耐受，计2分;感觉严重，不可耐受，计3分。

1.5.2 疗效标准

1.5.2.1 西医疗效判定标准［1］参照张之南主编《血液病诊断及疗效标准》(第二版)。分为基本治愈、缓解、明显进步、无效。

①基本治愈:贫血和出血症状消失，血红蛋白男达120g·L－1，女达 100g·L－1，白细胞达 4 ×109个·L－1，血小板达 80 ×109个·L－1，随访 1 年以上未复发。②缓解:贫血和出血症状消失，血红蛋白男达120g·L－1，女达 100g·L－1，白细胞达 3.5 ×109个·L－1左右，血小板也有一定程度增加，随访3个月病情稳定或继续进步。③明显进步:贫血和出血症状明显好转，不输血，血红蛋白较治疗前1个月内常见值增长30g·L－1以上，并能维持3个月。判断以上三项疗效标准者，均应3个月内不输血。④无效:经充分治疗后，症状、血象未达明显进步。

1.5.2.2 中医证候疗效判定标准［2］

①临床痊愈:中医临床症状、体征消失或基本消失，证候积分减少≥95%;②显效:中医临床症状、体征明显改善，证候积分减少≥70%;③有效:中医临床症状、体征均有好转，证候积分减少≥30%;④无效:中医临床症状、体征均无明显改善，甚或加重，证候积分减少<30%。

计算公式(尼莫地平法):［(治疗前积分－治疗后积分)÷治疗前积分］×100%。

1.5.3 安全性指标

于治疗前后各检查1次血、尿、便常规，心(含心电图)、肝、肾功能，并随时记录不良反应发生情况、采取的措施及转归。

1.6 统计学处理

采用统计软件SPSS 12.0进行统计分析。计数资料采用χ2检验;计量资料采用单因素方差分析及t检验;等级资料比较采用Ridit分析。均以均数±标准差(±s)表示。

2 结果

2.1 疗效比较

2.1.1 治疗组、对照组总疗效比较 结果见表1。

表1 治疗组、对照组总疗效比较［n(%)］

经Ridit分析，两组间有显著性差异(u=2.3521，P<0.05)。

2.1.2 治疗组、对照组患者症状平均积分比较 结果见表2。

表2 治疗组、对照组患者症状平均积分比较

2.1.3 治疗组、对照组中医证候疗效比较 结果见表3。

表3 治疗组、对照组中医证候疗效比较［n(%)］

经 Ridit分析，两组之间有显著性差异(u=2.4962，P<0.05)。

2.1.4 治疗组、对照组治疗前后WBC、Hb、PLT变化

两组患者外周血WBC、Hb、PLT治疗后明显升高，与治疗前比较有显著性差异。

2.1.5 治疗组、对照组治疗前后骨髓增生度的变化

经χ2检验，两组患者治疗后骨髓增生情况较治疗前改善，治疗组有非常显著性差异。

2.1.6 治疗组、对照组治疗前后BMMNC体外诱生EPO、SCF水平比较

治疗组、对照组治疗前BMMNC体外诱生EPO、SCF水平明显低于正常组;治疗后BMMNC体外诱生EPO、SCF水平升高，与治疗前相比有非常显著性差异;治疗后治疗组BMMNC体外诱生EPO、SCF水平与对照组无显著性差。治疗后BMMNC体外诱生EPO、SCF水平与正常相比仍有非常显著性差异。

2.2 安全性指标结果分析

对两组患者的安全性指标进行统计学处理，两组患者均未发现不良反应。

3 讨论

细胞因子由造血系统、免疫系统或炎症反应中的活化细胞产生，能调节细胞分化增殖和诱导细胞发挥功能，是高活性多功能的多肽、蛋白质或糖蛋白，有特异的受体。近年来，随着对正常造血调控的认识，越来越多的学者提出，由T淋巴细胞功能亢进引起的造血组织损伤及多种与造血有关的正负调控因子分泌异常，在再障的发生、发展及临床转归中起着重要作用［3，4］。

SCF主要由正常基质细胞产生。其受体C－kit是早期髓系细胞的表面标志，与其配体相结合对造血干/祖细胞起支持作用。SCF直接对造血干细胞及早期祖细胞的生存、增殖、分化和粘附及骨髓微环境起着关键作用。SCF可协同多种造血生长因子促进早期祖细胞生成定向祖细胞，使其集落数增加，体积增大。对于再障患者SCF水平，目前文献报道结果不一。Kojima等［5］测定再障患者SCF水平与正常人比较差异无统计学意义。亦有测定再障患者血浆SCF及可溶性C－kit受体的含量明显低于正常对照组［6，7］。本实验研究发现，慢性再障患者治疗前SCF分泌水平较正常人低下，经六味地黄丸治疗后，SCF分泌水平有明显提高。

EPO是一种刺激红系造血的激素，能促进红细胞的增殖、分化、成熟，又称为红系造血刺激因子(ESF)。其水平除与缺氧、Hb的水平有关外，还与骨髓红系细胞生成的功能密切相关。早期BFU－E表面的EPO受体很少，晚期BFU－E对EPO有反应;CFU－E是骨髓中对EPO反应的主要细胞;后期的红细胞样细胞和母红细胞都表达EPO受体，可接受EPO刺激进一步增殖分化;成熟的红细胞不再结合EPO。于氏等［8］的动物实验表明，以补肾为主的中药可刺激免疫介导型再障小鼠CFU－E、BFU－E的形成，从而促进红系造血组细胞的增殖、分化。本研究结果表明，再障患者骨髓EPO水平明显低于正常对照组，分析可能与再障患者骨髓微环境损伤导致分泌量下降有关。

以上研究结果显示，六味地黄丸可使慢性再障患者BMMNC体外诱生EPO、SCF水平升高，通过促进上述造血调控因子的分泌，促进红系造血祖细胞、粒系造血祖细胞和早期造血干细胞的定向增殖、发育，纠正部分免疫紊乱状态，从而改善了骨髓造血功能。故而可升高慢性再障患者的WBC、Hb、PLT，患者的骨髓象由增生低下变为增生活跃，能明显改善患者的贫血、出血、感染等临床症状，有利于再障患者的临床症状改善和造血机能的恢复，具有较好的临床疗效。

［1］ 张之南.血液病诊断及疗效标准［M］.北京:北京科学出版社，1998:34－36.

［2］ 翁维良.中药临床药理学［M］.北京:人民卫生出版社，2002:445.

［3］ Kojima S.Hematopoietic growth factors released by marrow stromal cells patients with aplastic anemia［J］.Blood，1992(79):2256.

［4］ 邵宗鸿，袁烨.再生障碍性贫血免疫发病机制及免疫治疗［J］.中国实用内科杂志，2006，26(4):252－255.

［5］ Kojima S，Matsuyama T，Kodera Y.Plasma levels and production of soluble stem cell factor by marrow stromal cells in patients with aplasticanemia［J］.Br J Haematol，1997(99):440 －446.

［6］ 王军，冯建飞，赵雪莲，等.再生障碍性贫血患儿干细胞因子及其受体的研究［J］.中华血液学杂志，2005，26(5):303 －304.

［7］ 冯建飞，王军，张树人，等.再生障碍性贫血血浆SCF和可溶性C－kit受体关系的研究［J］.临床检验杂志，2004，22(4):302－303.

［8］ 于志峰，戴锡孟.补肾活血法对免疫介导型再障小鼠的影响［J］.辽宁中医杂志，2001，28(8):509－510.