防芷鼻咽颗粒中挥发油的提取与包合

2010-09-11河北医科大学第二医院药剂科

河北中医药学报 2010年4期

关键词：辛夷包合物荆芥

河北医科大学第二医院药剂科

胡玉录刘剑郭进刘灵改戎成才 (石家庄 050000)

防芷鼻咽颗粒中挥发油的提取与包合

河北医科大学第二医院药剂科

胡玉录刘剑郭进刘灵改戎成才 (石家庄 050000)

目的:优选防芷鼻咽颗粒中挥发油的最佳提取方法及其β-环糊精 (β-CD)包合工艺。方法:以混合挥发油的提取时间、提取量为指标确定提取方法;比较两种包合方法,并采用正交试验的方法优化工艺条件。结果:以微波法为最佳提取方法;以胶体磨法为制备混合挥发油 -β-环糊精包合方法;其最佳工艺条件:1mL混合挥发油加β-环糊精 8 g和 80mL水,用胶体磨于 50℃包合 30 min。结论:本试验方法的提取率较高,可得到稳定的包合物。

防芷鼻咽颗粒;混合挥发油;微波提取;胶体磨包合;正交试验;β-环糊精

防芷鼻咽颗粒是根据我院杨恩英教授祖传秘方研制的治疗过敏性鼻咽炎的新制剂。[1]该制剂疗效显著、疗程短。其中的重要成分辛夷和荆芥中含有大量的挥发油,挥发油是主要有效成分之一。挥发油的处理与加工对其疗效影响很大。本文就该制剂中挥发油的加工做一研究、以便找到一种省时、可行的生产工艺。

1 材料与仪器

1.1 材料辛夷和荆芥药材均由安国市药材公司提供,均符合 2005年版《中国药典》的相关规定。批号:091012;β-环糊精 (β-CD),广东郁南县味精厂出品,纯度 98%.;所用试剂均为分析纯。

1.2 仪器 WD700型LG微波炉,乐金电子 (天津)电器有限公司;P M-780型胶体磨,浙江省欧海红星机械厂;TH-400B数控超生波清洗器,济宁天华超生电子仪器有限公司。

2 方法与结果

2.1 提取方法比较

2.1.1 微波法:将按处方比例称取的辛夷和荆芥共 100 g粉碎成中粉 (65目),加水 1 000mL浸泡 12 h后置连续微波反应器 (微波炉改造)中,加数粒玻璃珠,连接挥发油测定器及回流冷凝管,调整功率为 650 W,进行微波辐射。反应过于剧烈时,调整功率分别为 630 W、560 W、500 W。观察到挥发油测定器中油量不再增加时,收集挥发油,无水 Na2SO4干燥,称重备用。

2.1.2 水蒸气蒸馏法:[2]将按处方比例称取的辛夷和荆芥共 100 g粉碎成中粉 (65目),加水 1 000mL浸泡 12 h后置蒸馏瓶中,加数粒玻璃珠,连接挥发油测定器及回流冷凝管,观察到挥发油测定器中油量不再增加时,收集挥发油,无水 Na2SO4干燥,称重备用。试验结果见表1。

表1 挥发油提取试验结果 (n=3)

由表1所见,微波法 30～40 min时挥发油收得量与水蒸气蒸馏法 5～6 h收得量相当,提取效率明显提高。最后提取总量前者也比后者要高。所以我们选用用微波法。

2.2 包合

2.2.1 包合方法

胶体磨法:取 80份蒸馏水置胶体磨中,加 8份β-环糊精研磨 5 min,缓慢加入含有1份挥发油和 2份乙醇的溶液,再研磨 30 min,冷藏 24 h,抽滤后的沉淀于 40℃干燥即得。

超声法:称取 8份β-环糊精,加入 80份蒸馏水摇匀,水浴加热溶解,放冷,加入含有1份挥发油和 2份乙醇的溶液混合,充分振摇,超声处理 30 min,冷藏 24 h,抽滤后的沉淀于 40℃干燥即得。

2.2.2 包合物的质量评价:包合物中挥发油的含量测定:将制得的包合物用 50mL石油醚 (30～60℃)洗涤 2次,滤过,挥去石油醚,置 500mL圆底烧瓶中,加蒸馏水200mL,按 2005年版《中国药典》一部附录挥发油测定法项下甲法测定包合物中挥发油的含量。

挥发油回收率测定:精密量取挥发油 1mL,置 500mL圆底烧瓶中,加蒸馏水 200mL,余同 2005年版《中国药典》一部附录挥发油测定法项下甲法操作,计算回收率为91%。挥发油回收率 (%)=收集挥发油的量 /加入挥发油的量 ×100%。

收得率、包合率和包合物中含油率的计算,公式如下:收得率 (%)=包合物重量 /(β-环糊精加入量 +挥发油加入量) ×100%;包合率 (%)=包合物中挥发油回收量 /(挥发油加入量 ×回收率) ×100%;包合物中含油率(%)=包合物含油量 /包合物重量 ×100%。

两种包合方法进行平行试验见表2。

表2 两种制备工艺结果比较 (n=3,%)

2.2.3 包合使方法的确定及最佳包合工艺的选择 :由表2所见,超声波法和胶体磨法的收得率和包合率都较高,而胶体磨法更适于大生产,因此我们选用胶体磨法包合挥发油。

2.3 胶体磨最佳包合工艺的选择

2.3.1 因素水平及筛选指标:采用正交试验的方法,选择油∶β-环糊精量 (A)、加水量 (B)、研磨温度 (C)、研磨时间 (D)4项为考察因素,各取 3个水平 (见表3),按 L9(34)正交表试验,以包合率,收得率作为考察指标,筛选最佳工艺。包合率为衡量包合效果的重要指标,包合率越高,包合效果越好,因而作为包合工艺筛选的主要指标,权重系数定为 0.8,收得率在生产中也有意义,在投入量一定的情况下,收得率越高,包合率越高,故将收得率作为次要指标,权重系数定为 0.2。[3]

表3 因素水平表

2.3.2 正交试验结果:试验数据及极差、方差分析结果见表4、表5。

表4 正交试验及结果

表5 方差分析表

由直观分析和方差分析结果表明:影响辛夷和荆芥挥发油包合率和收得率的主次因素为 A>D>C>B,以A3B3C2D3为最优,其中油︰β-环糊精的比例对其有显著影响。结合生产实际情况,减少挥发油损失,适当降低研磨时间和温度以 A3B1C1D2条件为最优,即是 1mL辛夷和荆芥挥发油加β-环糊精 8 g和 80mL水,用胶体磨于 50℃包合 30 min,研磨液冷藏 24 h,抽滤后的滤渣于 40℃干燥,粉碎即得。

2.4 辛夷和荆芥挥发油 -β-环糊精包合物的物相鉴别

β-环糊精包合物物相鉴别的方法很多,有显微镜成像法、差示热分析法、气相色谱内标法、薄层色谱法等,其中以成像法和薄层色谱法使用较为普遍,[4]因此我们采用简便有效的成像进行鉴别。

显微成像法:取含挥发油的包合物与按制备方法制备的不加任何药物的空白包合物各少许,用水装片置光学显微镜下观察 (10×10倍),结果:空白包合物为规则的半透明板状结晶,含油的包合物为不规则的粉末状或内含黑色物质的不透明的块状物。证明挥发油与β-环糊精确已形成包合物。

2.5 加速试验分别将挥发油包合后喷雾制粒的颗粒(定量加入含 2mL油的包合物)和将挥发油直接喷洒制备的颗粒 (定量加入 2mL油)各 20 g放置于蒸发皿中,于60℃恒温箱烘 48 h,取出,作为加速试验样品,测定挥发油保留率。挥发油经包合保留了 84%,RSD=3.5% (n=3);不经包合的保留了 13.5%,RSD=3.7% (n=3)。