尾尖石仙桃化学成分的研究

詹 睿，刘 莹，陈业高

（云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650092）

尾尖石仙桃化学成分的研究

詹 睿，刘 莹，陈业高*

（云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650092）

从兰科植物尾尖石仙桃（Pholidota protracta）全草通过溶剂提取、硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析和RP-18柱层析等方法分得9个化合物.利用现代波谱法结合理化分析对提纯的化合物进行结构鉴定，首次从尾尖石仙桃中分离得到gigantol、batatasin III、3-hydroxy-5-methoxybibenzyl、dihydroconiferyl alcohol、间羟基苯甲醇、对苯二酚、水杨酸、b-谷甾醇和胡萝卜苷.

尾尖石仙桃；化学成分；联苄；芳香族化合物；结构鉴定

尾尖石仙桃（Pholidota protracta）为兰科（Orchidaceae）石仙桃属（Pholidota）植物，生于海拔1800～2500 m沟谷阔叶林中树上或石壁上，主要分布于尼泊尔、不丹、锡金和印度东北部，我国只在云南西北部贡山、独龙江、怒江河谷沿岸和西藏东南部墨脱有分布［1］.石仙桃属一些植物在民间作药用，如石仙桃（P.chinensis）全草用于治疗眩晕、咳嗽和头痛，云南石仙桃（P.yunnanensis）有养阴、清肺、利湿和消淤等功效［2］.国内外对石仙桃属植物的研究主要集中在印度和中国，分离得到的化学成分主要有9，10-二氢菲、菲醌、联苄、二苯乙烯、三萜、苯丙素、木脂素、甾体和脂肪族等［3-5］.药理研究表明，一些石仙桃属植物的提取物和单体成分具有镇痛、抗氧化、抗癌和抑制NO生成等活性［6-8］，为了解尾尖石仙桃的化学成分，我们对其进行了分离鉴定.采用各种分离方法，包括常压硅胶柱层析、减压硅胶柱层析、凝胶层析和RP-18柱层析等，从中分得9个化合物.波谱分析（核磁共振氢谱、碳谱）确定它们的结构分别为 gigantol（1）、batatasin III（2）、3-hydroxy-5-methoxybibenzyl（3）、dihydroconiferyl alcohol（4）、间羟基苯甲醇（5）、对苯二酚（6）、水杨酸（7）、b-谷甾醇（8）和胡萝卜苷（9），均为首次从该植物中分离得到，结构式为：

1 仪器、试剂与材料

1.1 仪器

ZF-II型紫外分析仪（上海顾村中实仪器厂）；（Varian Mat-711质谱仪，美国Finnigan公司）；核磁共振仪（Bruker DRX-500型，德国布鲁克公司）；旋转蒸发仪（SB-2000系列，日本东京理化）.

1.2 试剂

层析硅胶（青岛海洋化工厂），Sephadex LH-20（20-80 mm，Pharmacia Fine Chemical Co，Ltd.），高效薄层层析硅胶G板（烟台化工研究院），显色剂为体积分数10％硫酸-乙醇溶液（乙醇为工业纯，使用前重蒸），其它试剂为化学纯或分析纯.

1.3 材料

尾尖石仙桃全草采自云南贡山，由云南英茂生物技术实验室张时刚先生鉴定为Pholidota protracta的全草.

2 试验方法

尾尖石仙桃干燥全草（200g），用工业乙醇室温浸提6次，浸出液减压浓缩得乙醇提取物（26g）.浸膏用2 mol/L NaOH溶解，用EtOAc萃取，得到非酸部分提取物13g.碱液加入2 mol/L HCl中和至pH 7，再用EtOAc萃取，得到酸部分提取物4g.非酸部分提取物经硅胶柱分离，采用石油醚∶丙酮（1∶0→0∶1）梯度洗脱，薄层层析检测分为4个部分.Fr. 2经过反复硅胶柱层析（氯仿∶丙酮50∶0→30∶1），Sephadex LH-20柱层析，RP-18柱层析得到化合物3（8 mg）和4（8 mg）.Fr.4 经过反复硅胶柱层析（氯仿∶丙酮50∶0→20∶1），Sephadex LH-20柱层析得到化合物1（4 mg）、2（7 mg）和8（50 mg）.Fr.5 经过硅胶柱层析（石油醚∶乙酸乙酯8∶1→1∶1）得到化合物9（100 mg）.酸部分提取物经硅胶柱分离，用石油醚：丙酮（1∶0→0∶1）梯度洗脱，分为3个部分.Fr.2经过硅胶柱层析（氯仿∶丙酮50∶0→30∶1）和Sephadex LH-20柱层析得到化合物5（5 mg）、6（10 mg）和7（12 mg）.

3 结果与讨论

首次从尾尖石仙桃全草分离得到9个成分，利用核磁共振波谱法，结合理化分析进行鉴定，9个化合物的结构分别为 gigantol（1）、batatasin III（2）、3-hydroxy-5-methoxybibenzyl（3）、dihydroconiferyl alcohol（4）、间羟基苯甲醇（5）、对苯二酚（6）、水杨酸（7）、b-谷甾醇（8）和胡萝卜苷（9）.

化合物1为红色胶状物.1H-NMR[（CD3）2CO，400 MHz]显示有亚甲基 [d 2.95（4H，br s，1，2-CH2）]、两个单峰甲氧基[d 3.78，3.69（each 3H，s）和6个芳香质子.其中，d 6.80（1H，d，J=2.0 Hz，H-2″），6.70（1H，d，J=8.0 Hz，H-5″）和6.64（1H，dd，J= 8.0，2.0 Hz，H-6″）处的质子信号表明有一个1，2，4-三取代苯环存在；d 6.29（1H，dd，J=2.0，2.0 Hz，H-6′），6.28（1H，dd，J=2.0，2.0 Hz，H-4′），6.21（1H，dd，J=2.0，2.0 Hz，H-2′）处的质子信号表明有一个间位三取代苯环存在.13C-NMR显示有12个芳环碳（6个季碳和6个次甲基碳）、2个甲氧基碳和两个亚甲基碳，表明化合物1为联苄类化合物.13C-NMR[（CD3）2CO，100 MHz]∶d 161.8（C-5′），159.3（C-3′），146.1（C-3″），145.2（C-1′），145.1（C-4″），134.0（C-1″），121.5（C-6″），115.5（C-2″），112.8（C-5″），108.8（C-2′），106.2（C-6′），99.6（C-4′），56.1（-OCH3′），55.2（-OCH3），39.1（C-2），38.0（C-1）.以上数据与文献报道的gigantol完全一致［9-10］，结构鉴定为gigantol.

化合物2为红色胶状物.1H-NMR[（CD）3CO，400 MHz]显示有两个羟基[d 8.21（s，3′-OH），8.19（s，3-OH）和7个芳香质子.其中1个为1，3-二取代苯环 [d 7.08（1H，dd，J=7.5，7.5 Hz，H-5″），6.69（1H，dd，J=8.0，2.4Hz，H-6″），6.65（1H，dd，J=8.0，2.4

化合物8为无色针晶.15％浓硫酸乙醇显色为紫红色，与β-谷甾醇标准品进行TLC对照，在多种溶剂系统中Rf值均相同.且1H-NMR、13C-NMR数据与β-谷甾醇一致，所以确定其为β-谷甾醇.

化合物9为白色粉末，极性较大，难溶于丙酮、甲醇，易溶于吡啶.15％浓硫酸乙醇显色为紫红色，与胡萝卜甙标准品进行TLC对照，在多种溶剂系统中Rf值均相同.且1H-NMR、13C-NMR与胡萝卜苷一致，所以确定其为胡萝卜苷.

［1］中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志：第18卷[M].北京：科学出版社，1999：397.

［2］江苏新医学院.中药大辞典[M].上海：上海科学技术出版社，1977：600.

［3］Wu B，Qu H，Cheng Y.Cytotoxicity of neWstilbenoids froMPholidota chinensis and their spin-labeled derivatives [J].CheMBiodivers，2008，5（9）：1803-1810.

［4］Yao S，Tang C P，Li X Q，et al.Phochinenins A-F，dimeric9，10-dihydrophenanthrene derivatives，froMPholidota chinensis[J].Helv ChiMActa，2008，91（11）：2122-2129.

［5］Yao S，Tang C P，Ye Y，et al.StereocheMistry of atropisomeric 9，10-dihydrophenanthrene dimers froMPholidota chinensis[J].Tetrahedron Asymm，2008，19（17）：2007-2014.

［6］刘莹，张云梅，金永，等.石仙桃属植物化学成分及药理活性研究进展[J].时珍国医国药，2007，18（7）：1631-1633.

［7］Guo X Y，Wang J，Wang N L，et al.9，10-Dihydrophenanthrene derivatives froMPholidota yunnanensis and scavenging activity on DPPH free radical[J].J Asian Nat Prod Res，2007，9（2）：165-174.

［8］Wang J，Matsuzaki K，Kitanaka S.Stilbene derivatives froMPholidota chinensis and their anti-inflammatory activity[J].CheMPharMBull，2006，54（8）：1216-1218.

［9］Juneja R K，Sharma S C，Tandon J S.Two substituted bibenzyls and a dihydrophenanthrene froMCymbidiuMaloifolium[J].PhytocheMistry，1987，26（4）：1123-1125.

［10］Chen Y G，Xu J J，Yu H，et al.Cytotoxic phenolics froMBulbophylluModoratissimum[J].Food Chem，2008，107：169-173.

［11］Ali MA，Kondo K，Tsuda，Y.Synthesis and nematocidal activity of hydroxystilbenes[J].CheMPharMBull，1992，40（5）：1130-1136.

［12］Hanawa F，Yamada T，Nakashima，T.Phytoalexins froMPinus strobus bark infected With pinewood nematode，Bursaphelenchus xylophilus[J].Phytochemistry，2001，57（2）：223-228.

［13］Morgan K R，Newman R H.Principal values of carbon-13NMR cheMical sShift tensors for a collection of substituted benzenes[J].J.AMCheMSoc，1990，112（1）：4-7.

［14］袁久荣，李全文，李智立.夏至草化学成分的研究[J].中国中药杂志，2000，25（7）：421-423.

［15］肖瑛，李建北，丁怡.毛大丁草根和根茎化学成分的研究[J].中国中药杂志，2002，27（8）：594-596.

［16］Scheffer J R，Wong Y F，Patil A O，et al.CPMAS（cross-polarization magic angle spinning）carbon-13NMR spectra of quinones，hydroquinones，and their complexes. Use of CMR to folloWa reaction in the solid state[J]. J AMCheMSoc，1985，107（17）：4898-4904.

［17］刘明韬，韩志超，章漳，等.龙胆的化学成分研究[J].沈阳药科大学学报，2005，22（2）：103-104.

责任编辑：毕和平

Study on the CheMical Constituents froMPholidota protracta

ZHAN Rui，LIU Ying，CHEN Yegao*
（School of Chemistry and Chemical Engineering，Yunnan Normal University，Kunming 650092，China）

Nine compounds were obtained by silica gel chromatography，Sephadex LH-20 and RP-18 column chromatography froMthe all plants of Pholidota protracta，and the chemical structures of these compounds were identified by modern spectroscopy as well as physico-chemical analysis.These compounds were identified to be gigantol，batatasin III，3-hydroxy-5-methoxybibenzyl，dihydroconiferyl alcohol，3-hydroxy benzenemethanol，hydroquinone，salicylic acid，b-sitosterol and daucosterol respectively.They were obtained froMPholidota protracta for the first time.

Pholidota protracta；chemical constituents；bibenzyls；aromatics；structural identification

R 248.1

A

1674-4942（2010）01-0072-04

2009-11-27

国家自然科学基金项目（30860346）

*通讯作者