乙型肝炎病毒基因型检测的临床意义

徐 严,张永贵,季尚玮,王江滨

(吉林大学中日联谊医院消化内科,吉林长春 130033)

乙型肝炎病毒基因型检测的临床意义

徐 严,张永贵,季尚玮,王江滨*

(吉林大学中日联谊医院消化内科,吉林长春 130033)

目的探讨乙型肝炎病毒基因型分布及其对抗病毒疗效的影响。方法对183例患者进行基因分型,对应用恩替卡韦及聚乙二醇干扰素a-2a抗病毒治疗不同基因型患者疗效进行比较。率的比较采用 χ2检验。结果183例慢性乙肝患者以C基因型为主,占53.6%,其次为B基因型(35.5%),C基因型患者HBeAg阳性率(69.4%)明显高于B基因型患者(47.7%),两者比较P＜0.05。肝硬化患者C基因型所占比例较高(67.4%)。恩替卡韦抗病毒治疗B、C基因型患者HBV DNA不可测率、ALT复常率以及HBeAg血清转换率相似。聚乙二醇干扰素a-2a组抗病毒治疗48周B基因型患者持久应答率(75%)明显高于C基因型患者(45.5%),两者比较P＜0.05。结论C基因型患者疾病进展比例高,对聚乙二醇干扰素a-2a抗病毒治疗疗效较差。而基因型对恩替卡韦抗病毒疗效并无显著影响。

基因型;乙型肝炎;抗病毒治疗

(Chin J Lab Diagn,2010,14:0061)

近年来,许多研究[1-2]发现HBV基因型是影响慢性乙肝临床转归的主要决定因素之一,有关HBV基因型与临床疾病的相关性研究越来越受到重视,引起国内外学者的关注。但是Palumbo E等[3]研究表明HBV基因型并不影响慢性乙肝患者的抗病毒疗效。本研究对183例就诊于中日联谊医院消化内科的慢性乙肝患者进行乙肝病毒基因型检测,了解其分布状况以及HBV基因型与HBeAg表达状况及其病毒载量、临床疾病严重程度的相关性,同时评价不同基因型患者的抗病毒疗效,为临床治疗、预后评价提供进一步的依据。

1 材料与方法

1.1 入选标准 选择就诊于中日联谊医院消化内科的183名HBV DNA≥103拷贝/ml的慢性乙肝患者,诊断符合2005年“慢性乙型肝炎防治指南”中制定的标准[4]。所有患者进行HBV DNA基因型检测。对符合下列条件①HBV DNA≥104拷贝/ml;乙型肝炎肝硬化患者HBV DNA≥103拷贝/ml;②ALT≥ULN;乙型肝炎肝硬化患者ALT正常或升高。如用干扰素治疗,ALT≤10倍正常值上限,TBIL＜2倍正常值上限;③肝穿组织学显示Knodell HAI≥4。④除外妊娠期及哺乳期,无精神病史、癫痫、恶性肿瘤、有症状的心脏病,无吸毒或酗酒史等。应用干扰素者除外失代偿期肝硬化。其中84例应用恩替卡韦治疗(0.5 mg每日一次口服),男63例,女21例,HBeAg+49例。76例应用聚乙二醇干扰素治疗(Peg-IFNa-2a 180 μ g,每周一次皮下注射),男 53 例 ,女 23例,HBeAg+47例。所有患者抗病毒治疗48周,干扰素组随访24周。

1.2 监测指标 接受治疗前常规分析血清HBV DNA水平、生化学指标及HBV血清学标志。干扰素治疗组治疗前还应检查血常规、甲状腺功能、血糖、尿常规,血常规治疗前4周每周1次,以后每4周1次。所有患者治疗至第4周及12周检测生化学指标及HBV DNA水平,以后每12周检测一次血清HBV DNA水平、生化学指标及HBV血清学标志。

1.3 检测方法 ①血清学病毒标志物检测:采用酶联免疫吸附法。②肝功能检测:全自动生化分析仪及配套试剂购自美国贝克曼公司。③HBV DNA定量检测采用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测血清中HBV DNA含量。最低检测下限为1.0×103拷贝/ml。试剂盒购自中山大学达安公司。④HBV基因型检测采用PCR微量板核酸杂交酶联免疫法。试剂盒购自由广州蓝星生物科技开发公司。

2 结果

2.1 183例慢性乙肝患者HBV基因型分布及与疾病严重程度的关系 183例慢性乙肝患者以C基因型为主,占53.6%,其次为B基因型(35.5%)及未分出型患者(8.2%),而D基因型(1.6%)及A基因型者(1.1%)较少。46例乙型肝炎肝硬化患者C基因型所占比例(67.4%)明显高于137例慢性肝炎患者C基因型所占比例(48.9%),两者比较P＜0.05。

2.2 不同HBV基因型与HBeAg表达状况及HBV DNA基线水平的关系 分析不同HBV基因型患者HBeAg表达状况以及HBV DNA基线水平,结果显示C基因型患者HBeAg阳性率(69.4%)明显高于B基因型患者(47.7%),两者比较P＜0.05。C基因型患者的HBV DNA基线载量(5.87±1.17 log10拷贝/ml)与B基因型患者(5.22±1.27 log10拷贝/ml)相近。

2.3 恩替卡韦及Peg-IFNa-2a抗病毒治疗不同基因型慢性乙肝患者疗效 恩替卡韦组B基因型25例,C基因型49例,比较恩替卡韦抗病毒治疗不同基因型患者48周疗效,结果显示B、C基因型患者HBV DNA不可测率、ALT复常率以及HBeAg血清转换率相似,无统计学差异,详见表1;Peg-IFNa-2a组B基因型24例,C基因型44例,抗病毒治疗48周B基因型患者持久应答率明显高于C基因型患者,两者比较 P＜0.05,详见表2。

表1 恩替卡韦抗病毒治疗不同基因型慢性乙肝患者的疗效分析(%)

表2 Peg-IFNa-2a抗病毒治疗不同基因型慢性乙肝患者的疗效分析(%)

3 讨论

HBV基因型的分布与地理因素、人种差异有关。国内外有关不同基因亚型HBV流行特征的调查表明在亚洲地区以B、C基因型流行为主。与B基因型相比,C基因型患者疾病相对进展快,肝组织学损伤严重,更易进展为肝硬化。本研究对183例慢性乙肝患者HBV基因型分布进行分析,结果显示本地区患者以C基因型为主(53.6%),其次为B基因型(35.5%),与国内报道相似[5]。进一步分析肝硬化患者中基因型分布状况,发现肝硬化患者中C基因型所占比例较高(67.4%),略高于 Yasuhito Tanaka[6]研究组调查的43.7%和Tomoyuki Sakamoto[7]研究组的41%,与Tatsuji Maeshiro[8]研究组调查的60%为C基因亚型的报道相接近。而我国不同地区调查的基因型分布状况也表明在乙型肝炎肝硬化患者中均以C基因亚型为主[9-11],证实C基因亚型患者疾病进展的比例的确高于其他基因亚型。Lindh[12]等报道C基因型感染者的HBV DNA水平较高,但是本研究结果显示C基因型及B基因型患者的HBV DNA基线载量相似,提示两者无明显相关性。

AI-ZHONG ZENG等[13]研究发现应用阿德福韦酯抗病毒治疗B基因型患者疗效明显好于C基因型患者,Kao JH[14]研究组发现干扰素抗病毒治疗B基因型患者疗效亦优于C基因型患者,但有研究表明不同基因型对核苷类似物及干扰素抗病毒疗效并无显著影响[3,15],各地区报道不尽相同。本研究84例应用恩替卡韦抗病毒治疗48周B、C基因型患者HBV DNA不可测率、ALT复常率以及HBeAg血清转换率相似,提示基因型对核苷类似物抗病毒疗效并无显著影响。而Peg-IFNa-2a治疗48周B基因型患者的持久应答率明显高于C基因型患者,提示Peg-IFNa-2a对B基因型患者疗效优于C基因型患者。

总之,HBV基因组具有相当复杂的自然异质性,不同的HBV基因型以及感染后不同的感染过程、病毒的清除、对治疗的疗效和自然转归等影响已经受到广泛的重视。越来越多的证据表明,HBV基因型与慢性乙型肝炎发病机制、转归、抗病毒疗效均有密切关系。但目前的研究结果不具有统一性,随着我们对HBV基因型研究的不断深入,新的核苷类似物等抗病毒药物等的开发和研制,对指导慢性乙型肝炎的临床治疗以及预后判断均有积极的作用。

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[8]Tatsuji Maeshiro,Shingo Arakaki,Takako Watanabe,et al.Different natural courses of chronic hepatitis B with genotypes B and C after the fourth decade of life[J].World J Gastroenterol,2007,13(34):4560.

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Hepatitis B virus genotypes distribution and its influences on antiviral effects

XUYan,ZHANGYong-gui,JI Shang-wei,et al.(Department of Gastroenterology,China-Japan Union hospital of JilinUniversity,Changchun130033,China)

Objectiveto analyze Hepatitis B virus genotypes distribution and its influences on antiviral effects.Methodsthe genotypes of 183 patients were detected,to analyze antiviral effects of entecavir and peg-IFNa-2a in patients with different genotypes.Results53.6%of 183 patients were classified as genotype C,35.5%were genotype B.The positive rate of HBeAg in the patients of genotype C was higher than that of genotype B(P＜0.05).The rate of genotype C(67.4%)was higher in the patientswith Hepatitis B virus-related cirrhosis.Similar proportions of different genotype patientswho were treatmentwith entecavir achieved HBV DNA＜1 000 copies/ml,ALT normalization andHBeAg seroconversion.The sustained response rate in the patients of genotype B(75%)was higher than that of genotype C(P＜0.05).ConclusionThe patients of genotype Cwith a high rate of disease progression,and poor antiviral effects to peg-IFNa-2a.Genotype is no significant impact on antiviral efficacy of entecavir.

genotype;Hepatitis B;antiviral therapy

R512.6+2

A

1007-4287(2010)01-0061-03

*通讯作者

2009-03-07)