猪伪狂犬病的诊断和治疗研究

刘陆军 郭成亮 庄晓薇 王小伟

（①山东省临朐县畜牧局 262600 ②青岛农业大学动物科技学院）

猪伪狂犬病自1947年报道首例猫感染病例以来已蔓延到我国20多个省市，给畜牧业发展造成巨大的损失[1]。

猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus，PRV)是引起多种家畜和野生动物发病以发热、奇痒(猪除外)及脑脊髓炎为主要特征的一种疾病。本病最早于1902年由匈牙利学者Aujeszky发现。在疱疹病毒科中猪伪狂犬病病毒感染动物范围广泛且致病性较强。在自然条件下，猪、牛、羊、兔、猫、犬、鼠等多种动物和许多野生动物如水貂、北极熊、银狐等都可以感染发病。大量的实验表明，猪和大部分鼠类是自然界中病毒的主要储存宿主和疫源动物。也就是说，其它家畜是由于接触了这两种带毒动物或病死尸体才感染发病的。猪既是本病的原发感染宿主，又是病毒长期储存和排出者，在猪伪狂犬病的传播上起着甚为重要的作用[2]。据国外研究表明，除了在自然条件下通过吃食病死鼠的尸体猪感染发病外，在大量喂食残剩废弃食物的猪场，经常有本病的暴发流行。猪只发病时间因传播途径而异，最短36h，最长10d，一般多为3～6d。主要是通过飞沫、摄食和创伤感染传播。

为了进一步了解该病的一些基本情况，笔者对猪伪狂犬病进行了诊断与治疗方面的研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 临朐县某发病猪场的病猪、死猪及其猪群。

1.1.2 药物 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生产的伪狂犬病弱毒冻干疫苗；氨苄青霉素、磺胺－6－甲氧嘧啶钠等抗菌素和磺胺类药；5%糖盐水、维生素C；2%～3%的烧碱；1:200的百菌消－30。

1.1.3 实验仪器 研钵、 离心机、试管、移液管、过滤器、滤膜、胶头滴管、保温柜、注射器、手术刀、镊子、平板、打孔器、37℃湿盒、培养基。

1.2 方法

1.2.1 临床症状的观察 分别测量发病仔猪、断奶前后仔猪、成年猪、育肥猪、怀孕母猪和种用公猪的体温，并观察精神状况、食欲状况、神经状况、呼吸状况、叫声以及病程[3]。

1.2.2 剖检病理变化的观察 剖检病死猪，肉眼观察上呼吸道、扁桃体、脑膜、心外膜、肾脏、膀胱、肺脏、脾脏、肝脏、胃、肠腔等各内脏组织器官的病变(包括黏膜的充血、出血点及各脏器的坏死灶等)。

1.2.3 细菌学检测 取自然病死猪的心血、内脏、淋巴和死胎胃内容物接种布氏杆菌选择培养基，普通肉汤和琼脂斜面，置37℃经2～7d培养。

1.2.4 接种试验动物 取自然发病仔猪脑、脾，用灭菌生理盐水制成1:10的悬浊液，加青霉素、链霉素1000U/ml，置4℃冰箱保存8h，以3000r/min离心，取上清液作接种物[4]。将临床健康、体重为1.2～1.5kg的家兔6只平均分成试验组和对照组。试验组兔每只在右后腿股部外侧皮下注射上述悬浮液2ml，对照组兔子相同部位皮下注射生理盐水2ml。

1.2.5 血清学检测 待检血清：死亡仔猪肝、脾和肺新鲜病料，加5倍生理盐水研磨成组织悬液，10000r/min离心20min，取上清经0.22µm滤膜过滤后，加双抗至1000U/ml，37℃作用30min。

检测方法：按曹澍泽报道的方法，分别取病料组织上清和细胞培养液上清同抗伪狂犬病高免阳性血清、抗猪细小病毒高免阳性血清，做双向琼脂扩散实验。以1.2%琼脂浇筑平板并打梅花孔，中央孔加阳性血清，周边孔加入待测病料，其中2个周孔分别加入阴性血清作对照，于37℃湿盒中保存48h，发病猪病料组织上清和细胞培养上清同伪狂犬高免阳性血清和发病猪血清反应24h后观察结果[5]

2 结果与分析

2.1 临床症状观察的结果

2.1.1 哺乳仔猪的临床症状 发病的哺乳仔猪呈现眼眶发红，眼皮水肿，精神高度沉郁等症状，其体温上升达41℃以上，食欲废绝，并伴有明显的神经症状，精神极度颓萎，昏睡，发抖，运动不协调，痉挛，呕吐，流涎，呼吸加快，叫声嘶哑，腹泻，有的病猪倒地侧卧，头向后仰，四肢做划动游泳状运动。有的病猪作圆圈运动或后退，最后昏迷衰竭死亡，极少康复，病程1～2d，发病日龄越小，病程越短，最快发病5h即死亡。

2.1.2 断奶前后仔猪的临床症状 断奶前后仔猪主要为呼吸系统症状，表现呼吸困难，咳嗽，流鼻涕等，也有部分猪出现神经症状、拉稀和呕吐等，发病率和死亡率明显低于新生仔猪。

2.1.3 成年猪的临床症状 成年猪表现症状极为轻微，只表现一般性发热，精神沉郁等轻微症状，有的病猪出现呕吐、咳嗽，一般多于4～8d后康复。

2.1.4 育肥猪的临床症状 育肥猪主要表现为生长迟缓和日增重下降。

2.1.5 母猪的临床症状 母猪则表现为不育症、返情率高和屡配不孕。妊娠母猪常发生流产、死胎或木乃伊胎，其中以产死胎为主，产出的弱胎通常在3～4d死亡。且无论是头胎母猪还是经产母猪都发病。

2.1.6 公猪的临床症状 公猪发生睾丸鞘膜炎，表现为睾丸肿胀、萎缩等，种用性能降低或丧失。根据临床症状初步判定为猪的伪狂犬病。通过不同猪只的临床症状可以看出，各种年龄的猪只都易感染该病毒，但临床症状，随着猪年龄的不同而不同，猪只发病症状和死亡率有显著差别；随着仔猪月龄的增加，患病仔猪病程延长，症状减轻，死亡率呈下降趋势；而成年猪感染后常不呈现可见的临床症状或仅表现为轻微体温升高，一般不会导致猪死亡。由于仔猪发病快，病程短，症状急，染病仔猪不易救治；而成年猪临床症状不甚明显，易造成染病猪只的误诊误治。

2.2 剖检病理变化的结果

可见大部分病死猪上呼吸道粘膜及扁桃体出血、水肿，脑膜充血或有出血点，肾表面有针尖大出血点，部分病死猪心外膜、膀胱粘膜有少许针尖大出血点，肺小叶出血，脾边缘有梗死灶，肠腔充盈气体。胃肠粘膜可见卡他性炎症，胃底部有明显的出血区。肝脏和脾脏有特征性多发性坏死灶，中央灰白色，外周有红色晕圈。猪只日龄大病程长的病变较严重，日龄小的病猪和死胎一般外表和内脏无明显变化，个别死胎头尾两端呈灰黑色，内脏有腐败病变。内脏器官的病理变化符合猪伪狂犬病的病理特征。

2.3 细菌学检测的结果

经2～3d培养后，未见细菌生长。并做涂片染色镜检，未见细菌。取上述脑、淋巴和脾按常规方法接种兔，取典型剧痒症致死兔的心血，内脏和淋巴做细菌培养和涂片染色镜检均呈阴性。排除细菌感染确定为病毒感染。

2.4 生物学实验的结果

试验组兔子接种后42～86h相继死亡，对照组兔观察10d均健活。试验组接种后，体温升高但不稳定，在0.2～0.5℃范围内波动，食欲逐渐减退至拒食，精神转差，3只分别在63h、70h和75h出现特征性巨痒，最初舔咬接种部位，使被毛脱落、皮肉破裂，随后用嘴撕咬肌肉，以至连同股部皮肉全部撕脱，可见因血染红的股骨，到晚期四肢抽搐，角弓反张，后躯软瘫不能站立，到地侧卧，后退伸直，此时仍竭力撕咬注射部位，最后闭眼昏睡，呼吸微弱，2～3d内死亡。剖检见脑膜充血、出血，大脑半球沟回内积满血液；咽喉黏膜充血、潮红，气管内有多量白灰色泡沫，肺淤血呈暗红色；脾被膜下有大量出血点；肝稍肿胀，质地变硬，色泽变暗；肾皮质点状出血；淋巴结出血。

接种的兔子表现出了猪伪狂犬病的剧痒、体温升高[6]以及神经症状。用病料接种兔后，兔的注射部位发生剧痒。

2.5 血清学检测的结果

血清学检测结果表明病例样品与猪伪狂犬病高免阳性血清反映呈阳性；而与猪细小病毒高免阳性血清和猪瘟高免阳性血清反应呈阴性。通过抗原抗体相结合的方法说明病死猪的血清中存在猪伪狂犬病抗体。通过上述试验确诊猪场所染病为猪伪狂犬病。

2.6 治疗措施和结果

2.6.1 群体接种 猪场采用中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生产的伪狂犬病弱毒冻干疫苗对全场后备公、母猪、生产公猪、哺乳母猪、临产前1个月怀孕母猪、育肥猪颈部肌注2ml，断奶仔猪颈部肌注1ml，哺乳仔猪颈部肌注0.5ml，种猪第1次注射后，4～6周加强免疫1次。

2.6.2 隔离治疗（1）使用氨苄青霉素、磺胺-6-甲氧嘧啶钠等抗菌素和磺胺药进行防止继发感染，同时用病毒灵等抗毒药物进行治疗[7]。（2）防止病猪脱水，每天用5%糖盐水20ml加维生素C 2ml，进行腹腔注射，并辅以安钠，地塞米松等药物进行对症治疗，提高病猪机体自身抵抗力，加快其恢复。对发病猪采取上述治疗措施，早期治疗的病猪均取得显著的疗效，治愈康复。

3 讨论

3.1 诊断方法的应用

（1）临床症状的观察方法方便快捷，但很多疾病的暴发会出现相似的临床症状，如发生猪的细小病毒病的母猪会出现与猪伪狂犬病相似的死胎木乃伊胎，因而临床症状的观察只能作为辅助的初诊判断。（2）病理变化的剖检，典型的病理变化可判断为猪的伪狂犬病，但有些猪内脏组织器官的病变并不具有典型症状，尤其是发病急死亡快的猪，剖检病理变化并不明显，所以病理变化的观察只有当具有典型症状是才可确诊。（3）细菌学诊断可以区分细菌病和病毒病，但区分范围太广只可做为一个普通的实验室诊断。有根据性但无依赖性。（4）血清学诊断通过抗原抗体相结合的方法可直接判断出病猪的血清中是否有猪的伪狂犬病病原抗体，暴发过猪伪狂犬病的猪场，血清学诊断是一个可靠而准确的判断方法。但如果猪场以前暴发过猪伪狂犬病现在仍存在带毒猪或猪场注射过猪伪狂犬病疫苗，血清学诊断则变的没有意义了。

3.2 防制措施

防制猪伪狂犬病应采取一系列措施，逐步净化猪场，根除猪伪狂犬病。

3.2.1 净化措施（1）随机抽取猪场的20头3月龄仔猪的血清，用PRV-g IELISA试剂盒检测，确定其感染情况[8]。（2）对猪场内种猪每4个月进行1次免疫接种，对仔猪每隔30～35日免疫接种1次[9]。（3）对新引进的种猪，用伪狂犬病基因缺损弱毒疫苗免疫，并隔离饲养30d，经检测PRV-g I抗体阴性后并入生产群。（4）严格按上述措施实施8个月，再次对种猪群检测PRV-g I抗体，对检测出的阳性猪只强制淘汰，以后每隔4个月检测1次[10]。（5）在连续3次检测不出PRV-g I抗体阳性猪后，随机抽检1%的3月龄仔猪，检测PRV-g I抗体，并对体温升高的病猪血清用PCR方法检测PRV抗原，检测结果是否均为阴性。

3.2.2 疫苗接种 从猪场暴发猪伪狂犬病可以看出，猪伪狂犬病一旦暴发很不容易控制，而且因为该病带毒猪临床症状不明显，不容易根除，给防制带来很大困难。但可以积极的做好预防措施，防患于未然。最切实可行的办法就是有计划的对猪群进行疫苗免疫。疫苗免疫可降低感染机率，降低感染后的野毒排放量，缩短排野毒时间，减少隐性感染、持续感染或潜伏感染。但是疫苗免疫也不是万能的。一些猪场虽然实施了猪伪狂犬病疫苗的免疫，临床病猪也没有明显症状的出现，母猪的繁殖性能也较过去有很大提高，但由于疫苗的差异以及伪狂犬病阳性猪的存在，造成猪群间免疫抗体的不均一，部分低抗体猪仍会发生感染从而造成猪伪狂犬病在猪场内持续流行[11]。在实施伪狂犬病净化计划时，除了应用基因缺失苗外，猪群生产管理中的全进全出单向流动和严格的消毒隔离、灭鼠工作等生物安全措施是必不可少的，可有效地阻止病原在不同生产阶段的猪群间传播，结合淘汰阳性猪的措施，才能达到净化的目的[12]。

[1]朱连德,姚建聪,方树河等.猪伪狂犬病及其控制[J].当代畜禽养殖业,2005,10:56～58.

[2]蔡宝祥.家畜传染学[M].北京: 中国农业出版社, 2002.

[3]王天有.猪传染病现代诊断与防治技术[M].北京: 中国农业科学技术出版社, 2005.

[4]魏拣选.猪伪狂犬病的诊治[J].畜牧兽医杂志,2003,5:15.

[5]潘石崇,张兵.猪篮耳病、猪伪狂犬病和猪圆环病毒病混合感染诊治报告[J].广西畜牧兽医, 2006, 1: 23-24.

[6]Yoon HA, Eo SKAleyas AG, Cha SY, Lee JH, Chae JS, Jang HK, Cho EG, Song HJ.Investigation of pseudorabies virus latency in nervous tissues of seropositive pigs exposed to field stran [J].The Journal of veterinary medical science,2006.

[7]冼琼珍,黄良宗,王淑敏.猪伪狂犬病三种不同血清抗体检测方法比较[J].上海畜牧兽医通讯,2007,1:39.

[8]Lari A; Lorenzi D; Nigrelli D.Pseudorabies virus in European wild boar from central Italy[J].Journal of Wildlife Diseases, 2006, 2:319-324.

[9]牛建强,蓝天,罗旭芳,毕英佐.规模化猪场伪狂犬病的控制和净化[J].中国畜牧兽医,2006, 7:19-22.

[10]王华锋,沈惠忠,俞国乔等.规模猪场猪伪狂犬病的净化研究[J].浙江畜牧兽医,2006,1:11-12.

[11]王天奇,董发明,龙塔,杨自军等.免疫猪场伪狂犬病的暴发及控制[J].湖北畜牧兽医,2006, 2:42.

[12]陈平洁.广东省猪伪狂犬病流行病学调查和防控措施[D].南京:南京农业大学, 2005.