多项式线性评价方案在分析测量范围验证中的应用

肖 勤，阳 苹，张莉萍，毕小云，邓小玲，陈维蓓

(重庆医科大学附属第一医院检验科 400016)

分析测量范围(analytical measurement range，AMR)是检验方法的重要分析性能，在ISO 15189(医学实验室质量和能力认可准则)及美国临床病理家协会(CAP)的认可中均明确提出须验证定量检测系统的AMR;因大多数检验方法习惯以单一标准来校准结果，原则上应在标准曲线呈通过原点的直线才可作这样的处理;呈不通过原点的直线关系时，至少应使用两点定标;呈抛物曲线状时，应使用多点定标，在绘制的标准曲线上查阅结果[1]，所以实验室应定期评估或验证可报告范围，为了评价反应响应是否有线性表现，有多种建议和意见[2-5]，本室利用厂家提供的线性验证材料，采用多项式线性评价方案[6]进行AM R验证，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器 仪器:罗氏公司Hitachi Modular DDP生化分析仪;试剂:罗氏公司原装试剂;校准品:c.f.a.s(Calibrat or for Aut omated Systems)。

1.2 样本 罗氏公司提供的PreciLinTM-S Solutions(Lot:58958967，Exp:2010-6)，包括3组系列浓度样品，第 1组包含6个水平的总蛋白、清蛋白、胆固醇分析物，第2组包含6个水平的三酰甘油、铁、镁的分析物，第3组包含6个水平尿酸的分析物;各水平之间的分析物含量呈已知的相互关系，分析物含量涵盖整个分析测量范围。

1.3 检测方法 用c.f.a.s校正分析检测系统，各分析项目室内质量控制为在控，分别测定PreciLinTM-S Solutions样本中各项目3次。其中 TP、ALB、UA、TG和 TC等5个项目可分别在2个D模块测定，结果以 D1、D2区别，Mg在 P模块测定。

1.4 结果计算 计算3次测定结果的平均值，并根据验证物质说明书中提供的各项目理论值的计算方式计算各标本中待测物的理论值。

1.5 线性评价数据拟合 利用SPSS11.5软件将线性分析中测定结果分别拟合为1次(b0+b1x)、2次(b0+b1x+b2x2)和3次(b0+b1x+b2x2+b3x3)多项式，判断各级多项式的系数是否有统计学意义，从而得到最适多项式。

1.6 结果判断 如数据组的最佳拟合多项式为1次多项式，该数据组为纯统计线性(线性1)。当数据组最佳拟合多项式是2次或3次多项式，将最佳拟合的多次方多项式与1次多项式(a+bx)进行比较，计算其偏离直线平均差异(average deviati on fr om linearity，ADL)并与百分区界(percent bound，Pct Bnd)比较，一般将Pct Bnd定义为5%。如ADL小于所要求的临界判断值，则多次方多项式定义为临床可接受的线性(线性2)，否则为非线性。

2 结 果

2.1 第1次测定结果如表1所示，TC、TG、UA、和Mg为线性1，而TP和ALB呈非线性。

表1 各评价项目数据拟合结果

表2 采取纠正措施后的TP、ALB数据拟合结果

图1 纠正前ALB

图2 纠正后ALB

图3 纠正前TP

2.2 不满意项目对仪器进行保养及进行更换试剂，重新校准后再次测定验证标本，评价结果为这两个项目均为线性1，结果见表2;采取纠正措施前后两次的线性分析结果见图1～4。

图4 纠正后TP

3 讨 论

定量检测项目AM R的验证是验证厂家说明书上所标明的线性范围，在实际工作中对于检测结果非常重要。为了评价反应响应结果是否具线性表现，有多种意见和建议，CAP和我国卫生部临床检验中心都相继开展了评价线性与校准验证的活动，均采用多项式线性评价方案，将统计中的非线性数据与临床可接受的相关性有机地结合起来，大大提高了临床实验室对检测项目线性评价的有效性，是目前较全面实用的线性评价方案[7-10]。

本实验室也参加了卫生部临床检验中心的该项室间质评活动，但该项质评活动每年仅有1次，不能满足实验室对于校准及校准验证的要求，所以本实验室探索使用罗氏的线性验证材料进行评价，每个项目组由6个已知分析物含量间关系的标本组成，每份标本重复测定3次，利用分析物之间的相互关系计算理论值，用S PSS11.5软件进行数据拟合，可以得到数据拟合的3级多项式、拟合图形和方差分析结果，判断各级多项式的系数是否有统计学意义，从而得到各检验项目的最适多项式。采用该方法进行线性评价可及时分析测定结果，对于性能不可接受的项目能及时采取纠正措施，如本室第1次 TP和ALB评价结果为非线性，从图1和图3可以看出实测结果与理论值间呈抛物线关系，即使弃去高浓度或低浓度后重新评价仍为非线性，提示应分析性能不佳的原因，因该线性验证材料为液体即开即用型，不可能发生准备或保存不当的情况，可基本排除分析前因素的影响;经再次核对检测结果后未发现数据记录错误，数据处理符合要求，也可排除分析后因素;将重点放在查找分析中原因，发现机上试剂已接近厂家提供的试剂开瓶后稳定期，遂更换试剂，重新校准后测定验证材料，得到了满意的结果，提示需特别重视试剂开瓶后的稳定性。

本次验证结果表明被评价项目在评价的浓度范围内是呈线性的，可用单点定标做校准，但在6个月后以及有下列情况发生时应进行一次校验，如仪器或检测系统进行过一次大的预防性维护或者更换了重要部件;质控反映出异常趋势或偏移，或者超出了实验室规定的接受限，采取一般性纠正措施后，不能识别和纠正问题时。最后特别强调所有进行过的校准和在进行校准验证工作时必须记录并写成文件。

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