半胱胺脂质体对梅花鹿增重及血液生长抑素、生长激素含量的影响*

赫俊峰，刘应竹，李海军，仲维宇

（1.黑龙江省科学院自然与生态研究所，哈尔滨，150040；2.大兴安岭兴安鹿业有限公司，加格达奇，165023）

生长抑素主要是由下丘脑释放的肽类激素，其生理作用是抑制垂体前叶的生长激素的释放。脂质体是近年来研究较多一种定向药物载体，是靶向给药物系统的一种新剂型。脂质体具有类似生物膜的结构，易于透过细胞壁而进入血液循环。而且脂质体具有靶向性及缓释效果，没有免疫原性［1～2］。用于药物可以减少用量，延长药效。半胱胺脂质体能降低动物中枢神经系统及外周组织生长抑素（SS）的免疫活性，提高生长激素（GH）分泌的基线水平，并且CS的作用呈时间可逆转和剂量依赖性［3］。本研究根据CS抑制SS，促进GH分泌的生物学作用，用脂质体技术来制备半胱胺脂质体，在幼梅花鹿上试验，分析不同剂量半胱胺脂质体对幼梅花鹿增重、成活率、饲料表观消化率及血液SS，GH含量的影响，以降低幼梅花鹿血液及胃肠道SS含量，促进其生长，同时提高饲料转化率，减少饲养成本，提高经济效益。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组设计

该研究于2008年至2009年在黑龙江省大兴安岭新林区兴安鹿业有限公司进行，该公司现拥有优良梅花鹿和马鹿5000余头，每年梅花鹿产仔700～1000头，完全能满足本次实验动物的需要。本次试验选择出生后体质健康的梅花鹿120头作为试验动物，将120 头 60 日龄梅花鹿随机分为 4 组（CS0、CS100、CS150、CS200），每组30头。按照CS脂质体不同剂量依次为0、100、150、200mg/kg体重饲喂4个组。间隔一天饲喂CS脂质体1次，实验期为120d。

1.2 试验材料

半胱胺，胆固醇：购自sigma公司，粉粒状大豆磷脂（PC：10%～25%）：黑龙江前进油脂厂，半胱胺脂质体：自制（按大豆磷脂：胆固醇：半胱胺=15:3:1.8（质量比），用逆向蒸发法制备半胱胺脂质体，包封率为24.6%。

1.3 基础饲料的组成

精饲料在当地自行配制，试验期内每天现用现配，按时、按量添加半胱胺脂质体，料型采用粉型。粗饲料冬天饲喂干羊草、豆皮和青储饲料，夏天喂当地青草和一些青树叶。精饲料冬夏基本不变，其配方及成分比例见表1。

表1 幼梅花鹿精饲料配方及所占百分比Table 1 The fine fodder formulation for sika deer

1.4 血液样品采集及指标测定

试验至180日龄时空腹称重，并从耳朵静脉采血，将分离的血清置-20℃冰箱保存待测。血液SS和GH含量用放免法测定，SS药盒由上海第二军医大学神经生物学研究室提供，GH药盒为本次研究人员自制的pGH药盒，已作倍比稀释实验，有相关性。为排除性别、疾病及死亡鹿对结果的干扰，每组中发病及死亡梅花鹿资料不作统计，故论文中出现了实验开始与结束时梅花鹿数量的不相等。

1.5 钙、磷及粗蛋白测定

用凯氏定氮法测定饲料样及粪样中粗蛋白质含量；用KMnO4法测定饲料样及粪中钙的含量；用钼蓝法721分光光度计测定饲料样及粪样中磷的含量。

1.6 数据处理

试验数据采用Excel和SPSS进行统计和处理，试验结果采用方差分析方法进行统计分析及最小显著极差法进行多重比较。

2 结果与分析

表2 半胱胺脂质体对幼梅花鹿增重的影响Table 2 The effect of liposome-cysteamine on the body weight gain of sika deer

2.1 幼梅花鹿增重的影响

通过2个生物学周期的试验研究，半胱胺脂质体对幼梅花鹿体增重影响显著（表2），由表2可知，CS100组净增重比对照组提高48.3%（P＜0.05），而其它剂量组增重无明显变化。

2.2 幼梅花鹿血液SS和GH含量的影响

表3 半胱胺脂质体对幼梅花鹿血液SS和GH含量的影响Table 3 The effect of liposome-cysteamine on the content of SS and GH in the blood of sika deer

血液SS的放免测定结果表明，与对照组相比，CS100、CS150、CS200组的 SS含量分别下降 69.6%（P＜0.05）、75.4%（P＜0.025） 和 75.8%（P＜0.01），但 GH 水平只在CS100组有明显升高（P＜0.05），其它剂量组无明显变化（表 3）。

2.3 半胱胺脂质体对幼梅花鹿钙、磷、粗蛋白表观消化率的影响

在测定时,分别记录每个组幼梅花鹿每日平均采食量和平均排粪量,再分别计算其中各养份的含量,并折成干物质，算出具体含量，最后按下列公式算出表观消化率，并进行统计学处理。

表观消化率=（食入该养分的质量—粪中该养分的质量）/食入该养分的质量

表4 钙、磷、粗蛋白的表观消化率比较Table 4 The apparent digestibility of calcium,phosphorus and crude protein

从表4钙、磷、粗蛋白的表观消化率比较一览表中可以看出，在各个组中，CS100组的效果明显好于对照组，CS150和CS200组差别不明显。CS100对幼梅花鹿钙、磷、粗蛋白表观消化率影响的方差分析结果达到了显著的水平（P＜0.05）（与对照组相比）。

2.4 幼梅花鹿成活率的比较

试验120d后，对4个组的梅花鹿成活率进行统计，CS0（对照）成活率为86.7%，CS100的成活率为100%，CS150和CS200的成活率分别为90%、93.3%。CS100组梅花鹿的成活率最好，达到了100%，这与饲喂半胱胺脂质后提高了梅花鹿的消化率，也提高了自身的抵抗力和免疫力有关，所以发病率低，成活率高。

3 讨论

一般认为SS抑制垂体前叶GH的释放，而GH又是促进动物生长的关键激素。Lassiter CA等［4］报道，大鼠纹状体局部注射不同剂量 CS（0，7.5，15，30，50，100mg），结果以30mg剂量所致的SS含量下降最明显。因为SS抑制垂体GH的释放，有人又研究了CS对GH分泌的影响，Millard等［5］报道，皮下注射CS改变了大鼠GH的分泌模式，当注射CS300 mg/kg时，血浆GH水平在给CS后立即下降，以后略微回升，但分泌缺乏峰和谷；当90mg/kg时，GH分泌有明显的峰和谷，基线水平抬高；而30mg/kg对GH分泌无明显影响。在本次试验中，幼梅花鹿饲喂不同剂量 CS（100、150、200mg/kg体重），SS含量比对照分别下降 69.6%、75.4%和75.8%，GH水平仅在CS100组明显升高。这些结果与上述报道基本一致，所以CS的作用表现在剂量上具有依赖性。在超过150mg/kg体重剂量后，即使加大CS的饲喂浓度，SS含量也不呈继续下降趋势，并且尽管CS150和CS200组的SS含量低于CS100组，但GH水平的升高仅发生在CS100组。这些可能是由于下丘脑SS与生长激素释放因子（GRF）之间的超短反馈或垂体GH的短环负反馈所致的GRF分泌减少所致。

SS除分布于中枢神经系统外，还广泛存在于消化器官中，抑制其消化吸收机能［6］。CS通过降低消化道SS含量，加强营养物的消化吸收，从而提高饲料转化率，促进幼梅花鹿生长和发育。CS能明显降低梅花鹿消化道的SS含量，饲喂半胱胺脂质体（100mg/kg体重）能显著提高钙、磷和粗蛋白的表观消化率。

总之，半胱胺脂质体拌于幼梅花鹿饲料内饲喂，间隔一天一次，使用方便，成本低。以降低水平SS水平，促进动物生长的方法，有希望发展成为通过神经内分泌途径调控生长的一项生物技术在畜牧生产中推广应用，将有良好的经济效益。

［1］王艳玲，陈伟华.不同剂量半胱胺对肉用仔鸡增重及血液生长抑素、生长激素含量的影响［J］.中国畜牧杂志，1997，4：11～ 13.

［2］林玲，韩正康.半脆胺对生长动物生长速度和有关激索水平的影响［C］//第十八届中国生理学大会学术论文摘要汇编.上海:生理学通讯增刊，286～287.

［3］赵世臻.养鹿文化荟萃［M］.长春:吉林人民出版社,2001.553～586.

［4］LASSITER C A，FRIES G F，HUFFMAN C F，et a1.Effect of pepsin on the growth and health of young dairy Ca1ves fed Varies milk-replacer rations［J］.Journal ofDairyScience,1959（42）：666～670.

［5］MILLARD，S R EICH LIN，A New Feed Additive-Cysteamine&Mechanism and Its Effects on Animal［J］.Endocrinology，1981，109:2255～2257.

［6］王艳玲、韩正康.半胱胺对妊娠大鼠乳腺发育及血液生长抑素生长激素含量的影响［J］.南京农业大学学报，1993，16（增刊）:5～8.