乳腺癌 COX-2、bFGF的表达及临床意义

王 新,许秋实,李 壮,王 博,周 昱

(1.佳木斯大学附属第一医院肿瘤科,黑龙江 佳木斯 154003;2.佳木斯大学2007级普外专业研究生,黑龙江 佳木斯 154007)

环氧化酶(cyclooxy genase,COX)是前列腺素(prostaglandinum,PG)[1]生物合成过程中的一个关键酶,广泛存在于核膜和微粒体膜上,在生理条件下不表达或低表达,而在病理状态下呈高表达,经研究表明 COX-2及其催化产物参与多种恶性肿瘤的发生和发展。为探讨 COX-2 bFGF与乳腺癌的关系及临床意义,我们采用免疫组化染检测 COX-2、bFGF在乳腺癌组织中的表达情况,并对其表达与临床病理各因素之间的关系进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选材2004— 03～ 2005— 03在佳木斯大学附属第一医院手术切除并经病理证实的原发性乳腺癌组织石蜡包埋标本38例。病人均系女性 ,年龄29～ 70岁 ,平均53岁 ,术前未经抗肿瘤治疗。另在乳腺组织良性病变中取材20例正常乳腺组织作对照。并根据国际抗癌联盟(UICC)和美国肿瘤联合会(AJCC)联合制定的 TNM分期法[2]分为 I期 10例,Ⅱ 期19例,Ⅲ期9例 ,其中有淋巴转移者 20例;另按乳腺癌 SBR癌组织 (细胞 )学分类标准[3],分为 I级 12例 ,Ⅱ 级 14例,Ⅲ 级12例。

1.2 实验方法及结果判定

1.2.1 COX-2组

①SP法免疫组织化学染色[4]：1)首先脱蜡和水化;2)PBS冲洗15min;3)滴加在 3%的过氧化氢;4)PBS冲洗15min;5)抗原修复;6)冲洗15min;7)滴入山羊血清封闭液;8)滴加Ⅰ 抗 (鼠抗人环氧化物酶 -2单克隆抗体 );9)冲洗15min;10)滴加羊抗小鼠 IgG二抗;11)再次冲洗 15min;12)DAB显色 10min;13)PBS冲洗10min;14)苏木精复染2min;15)进行后期制作。

②结果判定标准：选用 Fromowitz分级法[5](A)根据染色深度不同计分,不着色为0分;淡黄色 1分;棕黄色2分;棕褐色或强烈着色者记为 3分。(B)阳性细胞数量计分：低于5%为0分,6%～ 25%为 1分,26%～ 50%为2分,51%～ 75%为3分,大于75%为4分。(C)最后将染色强度记分与阳性细胞数量百分比记分相加之和再分为4级：强阳性(+++)6～ 7分 ,中等阳性 (++ )4～ 5分 ,弱阳性 (+ )2～ 3分 ,阴性 (-)0～ 1分。

1.2.2 bFGF组

①实验方法：SP法免疫组织化学染色,方法同 COX组;使用 A10782R兔抗人 bFGF多克隆抗体一抗代替鼠抗人COX-2单克隆抗体;羊抗兔 IgG二抗代替羊抗小鼠 IgG二抗。②结果判定标准：方法同 COX组。

1.3 统计学处理

使用 SPSS11.5软件统计实验结果。对 COX-2、bFGF、VEGF表达与临床病理因素关系的数据处理及 COX-2与bFGF表达关系的数据处理采用卡方检验。

2 结果

2.1 COX-2和 bFGF在乳腺癌中的表达及其与临床病理参数的关系

分析对 COX-2、bFGF的表达情况及其与乳腺癌临床病理特征之间的相互关系 ,结果表明：COX-2、bFGF、的表达与肿瘤体积、临床分期、病理分级、淋巴结转移情况关系较为密切,而与肿瘤的发病年龄无明显相关性(见表1)。

表1 COX-2和 bFGF在乳腺癌中的表达及其与临床病理参数的关系

2.2 乳腺恶性肿瘤中 COX-2阳性表达与 bFGF阳表达之间的关系

通过对 COX-2和 bFGF免疫组化验查的数据进行分析,结果表明：二者在乳腺组织恶性肿瘤中的的表达呈高度的一致性即在 COX-2高阳性表达率组,bFGF因子的阳性表达率也相对较高(详见表2)。

表2 乳腺癌中 COX-2的表达与 bFGF表达间的关系

3 讨论

乳腺癌在妇女群体中的发病率中仅次于子宫癌,已成为现代社会女性健康的第二大杀手,是女性最常见的恶性肿瘤之一,严重影响妇女身心健康。每年全世界约50万妇女死于乳腺癌 ,其中仅在我国死亡人数就超过 5万[6]。并且随着人们生活水平的日益提高,月经初潮的提前、生育、哺乳的减少,近年乳腺癌发病率逐年增长,这一趋势引起了人们越来越多的重视。近年来临床病理学研究表明：早期发现、早期诊断、早期治疗,是治愈乳腺癌的关键手段。目前,COX-2、bFGF的表达与乳腺癌间关系研究尚少,其具体机制亦不完全清楚。因此,在本实验的目的即研究 COX-2、bFGF在乳腺癌中的表达和临床病理意义。在试验过程中使用 S-P免疫细胞方法检测了38例乳腺癌组织和20例乳腺正常组织中 COX-2、bFGF的表达情况,结果发现 COX-2、bFGF与乳腺癌患者的肿瘤直径、临床分期、组织学分级、淋巴结转移关系密切。综合分析 COX-2和 bFGF在乳腺癌中的表达情况对乳腺癌的研究具有重要的意义,通过抑制 COX-2和 bFGF的高表达来抑制乳腺癌的发生、发展、增殖、转移可能会成为一项有效的乳腺癌辅助治疗措施。

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