N F-κ B p65在子宫腺肌病中的表达及与其痛经相关性的研究

吕敬媛,赵东旭,卢北燕,吴雅冬

(佳木斯大学附属第一医院妇产科,黑龙江 佳木斯 154003)

当子宫内膜腺体及间质侵入子宫肌层时,称为子宫腺肌病 (Adenomyosis,AM)。近年来 ,由于此病的发病率不断上升,已成为妇科常见病。其中,继发性痛经为最主要的临床表现以及就诊原因。AM药物治疗效果不理想且易复发,如手术切除子宫,患者将丧失生育功能,这已成为妇科的热点和难点问题。本文用免疫组化的方法研究 N F_κ B p65与子宫腺肌病及其痛经的关系,希望对子宫腺肌病非手术治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2007— 01～ 2010— 01在我院妇 科病房行 子宫切除术 ,术后经病理检查证实为子宫腺肌病患者共62例。患者均不合并子宫内膜异位症;术前半年未使用过激素类药物及宫内节育器;术前半年无孕产史;不合并免疫及代谢性疾病;不合并内分泌疾病;不合并全身其他系统恶性肿瘤;不合并神经系统疾病及心理障碍;年龄 35～ 53岁,平均(44.19±5.51)岁。对照组为因子宫肌瘤行子宫切除术的住院病人,术后病理证实为子宫肌瘤 ,年龄 30～ 59岁 ,平均 (45.45±8.11)岁。

1.2 疼痛分级

所有患者术前按照疼痛问卷调查评分法对疼痛严重程度进行评分：无痛 (0分);轻度疼痛 (1～ 3分)：虽有疼痛但可忍受,并能正常生活,睡眠不受影响;中度疼痛 (4～ 6分)：疼痛明显,不能忍受 ,要求使用镇痛药,睡眠受到干扰;重度疼痛(7～ 9分 )：疼痛剧烈,不能忍受,必须使用镇痛药 ,睡眠受到严重干扰,可伴有植物神经功能紊乱表现或被动体位。

子宫腺肌病病理分级：

按照术后病理提示子宫内膜侵入子宫肌层的深度分三度：I度：距子宫内膜基底层下一个低倍视野中发现内膜间质或腺体;II度：侵入深度超出 I度范围到子宫肌层中部;III度：侵入深度超过子宫肌层中部[1]。

按照术后病理提示子宫内膜间质和腺体在肌层中的密度将子宫内膜的侵入深度分为三级：轻度：每一个低倍视野下可见1～ 3个宫内膜腺体小岛;中度：每一个低倍视野下可见 4～ 9个;重度：每一个低倍视野下可见≥10个宫内膜腺体小岛[1]。

1.3 方法及步骤

病理切片后 SABC法进行免疫组化染色;对照：阴性对照为 N F_kB PBS缓冲液代替一抗 ,阳性对照选取已知组织阳性片

1.4 结果判定

观察阳性反应,以细胞质或细胞核中出现棕黄色颗粒为其阳性判定标准。根据着色的程度将强度表达为：阴性(-)：细胞无着色,记分为 0分。弱阳性 (+ )：细胞轻度着色染成淡黄色 ,阳性细胞数 ＜25%,记分为1分。阳性(++)：细胞着色染成黄色,阳性细胞数25%～ 50%,记分为2分。强阳性 (+++)：细胞明显着色,呈棕黄色,阳性细胞数＞ 50%,记分为 3分。

1.5 统计学处理

采用检验秩和检验和多层分析 Cochran-Mantel-Haenszel法检验。所有数据统计均在 SAS9.1.3软件上进行。

2 结果

2.1 N F_κ B p65在子宫腺肌病中的表达

子宫腺肌病组 62例,阳性率为74.19%,对照组阳性率32.50%,NF_κB p65在子宫腺肌病中的阳性表达率显著高于对照组,说明 NF_κB p65在子宫腺肌病中特异性高。

表1 NF_κB p65在子宫腺肌病中的表达

2.2 N F_κ B p65在子宫腺肌病在位内膜不同月经周期中的表达

子宫腺肌病组中增生期38例,分泌期24例,增生期阳性率36.36%,分泌期阳性率33.3%,无显著差异,提示 NF_κ B p65的表达无周期性变化,不受卵巢激素的调节。

表2 NF_κ B p65在子宫腺肌病在位内膜不同月经周期中的表达

2.3 N F_κ B p65在子宫腺肌病不同程度痛经中的表达

子宫腺肌病组中不同痛经程度中阳性率分别为：无疼痛组16.67%、轻度疼痛组80.77%、中度疼痛组93.75%、重度疼痛组100%,随着疼痛程度的增高表达增强 ,NF_κB p65与子宫腺肌病不同程度痛经正相关。

表3 NF_κ B p65在子宫腺肌病不同程度痛经中的表达(问卷)

2.4 N F_κ B p65在不同病理分级的子宫腺肌病中的表达

按浸润深度的病理分级中浸润深度越深,阳性表达越强,即 N F_κB p65与子宫腺肌病不同浸润深度的病理分级正相关。

表4 NF_κ B p65在不同病理浸润深度的子宫腺肌病中的表达

按浸润密度的病理分级中浸润密度越大,阳性表达越强,即 N F_κ B p65与子宫腺肌病不同浸润密度的病理分级正相关。

表5 NF_κ B p65在不同病理浸润密度的子宫腺肌病中的表达

3 讨论

在本研究中,NF_κB p65在子宫腺肌病病灶中高表达,与对照组相比,差别有显著性 (P ＜0.01)。这与预计结果相符合 ,这可能与 N F_κB上调多种细胞因子的表达[2]有关,如细胞因子、黏附分子、细胞外基质蛋白水解酶、趋化因子及血管内皮生长因子、生长因子等,这些因子的过度表达参与了炎性疾病及肿瘤发生的病理过程。而子宫腺肌病是一种具有肿瘤特性的良性疾病。另外,受 NF_κ B调控的因子如TN F_ α、IL_1B、GM-CSF、MM P2、MM P9、INF- γ等都已证实与子宫腺肌病的发生密切相关[1]。在本研究中,在位内膜的增生期、分泌期都有 N F_κB的表达,但表达差异无统计学意义 ,说明 NF_κ B的表达与月经周期无关。在本研究中,NF_κBp65在不同程度痛经中的表达随疼痛程度加重而表达增强,N F_κ Bp65表达强度与痛经程度正相关的机理可能与此有关。NF_kB p65在不同病理分级中亦随病理分级增高表达增强,提示可能在子宫腺肌病发生、发展过程中N F_kB p65发挥了一定作用。另外 ,病理阅片过程中发现有些痛经程度严重的病例异位病灶的腺腔巨大,可能过度扩大的腺腔导致的机械张力增大而导致痛经严重。我们可以以N F_κ B p65抑制剂如 NF_Κb ASODN为切入点,在临床探寻非手术治疗子宫腺肌病的新方法。

[1]王世阆.子宫肌瘤与子宫腺肌病 [M].北京：人民军医出版社,2007,163-164

[2]Bours V,Dejardin E.The N F-kappaB transcription factor and cancer.H igh ex pression of NF-kappaB And I kappaB-related proteins in tumor cell lines[J].Biochem Pharmcol,1994,47(1)：145-152