用 ELISA方法检测乙型肝炎病毒血清标志物少见模式的分析

辛 华,隋少玉,牟洪香,高荣升,金 彪,张 英

(1.佳木斯大学附属第一医院检验科,黑龙江佳木斯 154003;2.佳木斯大学附属第二医院检验科,黑龙江 佳木斯 154002;3.佳木斯市医保医院,黑龙江佳木斯 154002)

乙型肝炎病毒(HBV)是一种嗜细胞病毒,是危害人民群众健康的主要传染病之一,它的血清学模式(俗称“两对半”模式)备受关注,是乙型肝炎临床诊断和治疗的重要依据。近年来,临床上出现愈来愈多的 HBV血清标志物(HBVM)特殊模式,对该模式的研究有助于我们加深对 HBV感染发病机制的认识,提高对 HBV感染的诊断和防治水平。本文就HBVM特殊模式的产生原因,临床意义分析如下。

1 材料与方法

1.1 对象

标本来自2009年1月至 12月在佳木斯大学附属第一医院住院及门诊就诊的随机人员血清共13200例,检测 HBV M五项。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 仪器

使用北京普朗公司生产的 DNM-9602G型酶标仪及安图生物公司生产的 Fluido洗板机。

1.2.2 试剂

乙肝检测试剂购自科华实业生物技术有限公司,乙肝五项质控品购自卫生部临检中心。

1.3 方法

ELISA法,操作严格按试剂盒说明书要求进行。

2 结果

在 13200例样本中共检出710例 HBVM少见模式,结果如表1。

表1 710例 HBV M少见模式结果

3 讨论

HBVM五项是由 HBV-DN A负链两个开放读码框架S、C区基因复制表达所致。可以多角度、间接地反映 HBV复制感染情况。也可以用作抗病毒疗效,乙型肝炎病情转归及预后评判。

在 HBsAg/HBsAb共存模式中 ,共检出 5、6、7、8、9等阳性模式。应与 S区基因突变,不同 HBsAg亚型感染有关。出现该模式时,应结合临床资料,肝脏功能指标,追踪检测HBVM,开展 HBV-DN A检测,综合分析 HBV感染状况。模式 10的出现,可能与 C区基因 1896G→ A突变,病毒野生株与变异株共同存在有关。通常认为 HBeAg阳性是 HBV复制活跃的指标之一。HBeAb的出现,是 HBV复制减弱或停止,病情趋于好转的标志,但近年来研究发现,急性重症肝炎或慢性肝炎急性加重的 HBVM模式也见于 HBeAb阳性[1],因此对该少见模式应密切观察肝功能各项指标,结合 HBV-DNA以制定治疗措施。模式1临床观察表明,大多都是病毒基因整合至肝细胞 ,随肝细胞复制,表达 HBsAg,并无完整的 Dane颗粒合成[2]。因此对于该模式的出现,不能简单判定为 HBsAg携带者,应结合 HBV-DN A检测,分析 HBV感染状况[3]。模式 2和11的出现,可能与 HBsAg高浓度钩状效应和类风湿因子等自身抗体干扰有关。因此该模式的出现,将原血清稀释5倍以上或通过两步法复检,以排除 HBsAg假阴性。模式4和12的出现可能有三种情况：(1)HBsAg呈低浓度水平,常规 ELISA方法无法检测出来(2)HBV感染后的仅存感染标志物(3)HBsAg浓度高,因 HOOK效应所致的HBsAg假阴性。因此,对于该模式应该采取将原血清5倍以上稀释或采取二步 ELISA方法并结合 HBV-DNA检测,方可下结论。模式13、14、15系 HBV感染后已产生免疫力,并伴感染标志物的存在。

综上所述,用一步法 ELISA检测 HBVM时,出现的少见模式切不可妄下结论,应通过平行双孔复检或两步 ELISA复检并结合 HBV-DNA检测,肝脏功能指标测定,并结合临床资料,综合分析 HBV复制、感染状况。同时,还要做好动态随访观察。

[1]林裕龙,彭永正,冯桂湘,等.乙型肝炎病毒前 C信号肽酶裂解位点变异对 HBeAg表达的影响 [J].中华检验医学杂志,2004,27(1)：17-19

[2]李梦东.实用传染病学 [M].第2版.北京：人民卫生出版社,1998,104-107

[3]杨道琼,陈华根.单纯 HBsAg阳性临床分析[J].四川医学,2004,25(12)：1326