红景天灵芝胶囊增强免疫力及抗辐射功能研究

李金花，于文斌，赵丽茹，孟青青，白中文，秦玲（吉林省生物研究所，吉林长春130012）

红景天灵芝胶囊增强免疫力及抗辐射功能研究

李金花，于文斌，赵丽茹，孟青青，白中文，秦玲
（吉林省生物研究所，吉林长春130012）

目的通过增强免疫功能及抗辐射功能实验，研究红景天灵芝胶囊的免疫功能及抗辐射功效。方法分别按增强免疫力实验方法和抗辐射实验方法进行。结果样品对小鼠DTH的影响在剂量组与对照组间比较（P＜0.05或P＜0.01），对抗体生成细胞数的影响在高剂量组与对照组间比较（P＜0.05），对半数溶血值在高剂量组与对照组间比较（P＜0.05），碳廓清功能在高剂量组与对照组间比较（P＜0.05）；样品能显著增加辐射后小鼠外周血白细胞数量（P＜0.05或P＜0.01），并降低小鼠的骨髓细胞微核率（P＜0.05或P＜0.01）。结论红景天灵芝胶囊具有增强免疫力及抗辐射的双重功效。

红景天灵芝胶囊；免疫功能；抗辐射；小鼠

红景天具有益气活血、通脉平喘的功效，主治气虚血瘀、胸痹心痛、脑卒中偏瘫、倦怠气喘等。现代药理研究表明，红景天及其提取物具有提高免疫力、抗辐射、抗缺氧、抗疲劳、抗衰老、抗抑郁症的作用［1］，其主要成分为红景天苷［2］。灵芝具有补气安神、止咳平喘的功效，主治眩晕不眠、心悸气短、虚劳咳喘等。现代药理研究表明，灵芝及其提取物具有免疫调节、抗辐射、抗衰老、抗肿瘤以及护肝解毒作用［3］，其主要成分为多糖类物质［4］。以下实验分别从增强免疫力功能、抗辐射功能两方面进行。

1 实验材料

1.1 样品红景天灵芝胶囊，由长春茸源真菌技术开发公司提供。

1.2 实验动物增强免疫力实验小鼠：由吉林大学基础医学院动物实验中心提供，ICR雄性，体质量18～22 g；抗辐射实验小鼠：昆明种小鼠，雌性，体质量18～22 g，由军事医学科学院实验动物中心提供。

2 增强免疫力功能实验方法与结果

2.1 实验方法选健康小鼠，每个检测指标设小鼠48只，分为4组，每组12只。设低、中、高3个剂量组和1个阴性对照组。剂量组动物采用成人推荐摄入量的1，10，30倍，即0.013 3，0.133，0.4 g／kg BW，以蒸馏水作阴性对照，各小组灌胃量均为0.2 mL／10 g BW，连续灌胃30 d后测各项免疫指标。

2.1.1 迟发型变态反应（DTH）采用足跖增厚法。

2.1.2 抗体生成细胞检测采用Jerne改良玻片法。

2.1.3 半数溶血值（HC50）的测定取羊血，生理盐水洗涤3次，每次离心（2 000 r／min）10 min，每只鼠经腹腔注射2%压积SRBC 0.2mL进行免疫。4 d后，摘除眼球取血于离心管内，放置约1 h，将凝固血与管壁剥离，使血清充分分析出，2 000 r／min离心10 min，收集血清。用SA缓冲液将血清稀释。将稀释后的血清1 mL置试管内，依次加入10%（V／V）SRBC 0.5 mL，补体1 mL。另设不加血清的对照管（以SA缓冲液代替）。置37℃恒温水浴中保温25min后，冰浴终止反应。2 000 r／min离心10 min，取上清1 mL，加都氏试剂3mL。同时取10%（V／V）SRBC 0.25mL，加都氏试剂至4 mL，充分混匀，放置10 min后，于540 nm处以对照管作空白，分别测各管光密度值。溶血素的量以半数溶血值（HC50）表示。

2.1.4 小鼠碳廓清实验小鼠尾静脉注射1∶4倍稀释的印度墨汁后立即计时，于2，10 min，分别从内眦静脉丛取血20μL立刻加到2 mL 0.1%Na2CO3溶液中，以Na2CO3溶液作阴性对照，722分光光度计于600 nm波长处测OD值。取小鼠肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面污血，分别称重，计算吞噬指数。

2.2 实验结果

2.2.1 对小鼠体质量和DTH的影响见表1。

2.2.2 对小鼠抗体生成细胞数及小鼠HC50的影响见表2。

2.2.3 对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响见表3。

表1 对小鼠体质量和DTH的影响±s，n＝12）

表1 对小鼠体质量和DTH的影响±s，n＝12）

注：与阴性对照组比较，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01。

组别始重／g终重／g增重足跖肿胀度／mm阴性对照组19.3±1.0 36.4±1.1 17.0±1.3 0.47±0.08低剂量组19.3±1.0 36.5±1.5 17.3±1.9 0.49±0.07中剂量组19.6±0.8 36.7±1.4 17.1±1.3 0.55±0.09＃高剂量组19.6±1.0 36.5±1.4 16.9±1.4 0.57±0.09＃＃

表2对小鼠抗体生成细胞数及小鼠HC50的影响（±s，n＝12）

注：与阴性对照组比较，＃P＜0.05。

表3 对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响±s）

表3 对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响±s）

注：与阴性对照组比较，＃P＜0.05。

组别n吞噬指数／a阴性对照组12 6.58±0.34低剂量组12 6.65±0.38中剂量组12 6.72±0.58高剂量组12 6.96±0.45＃

3 抗辐射功能实验方法与结果

3.1 实验方法选健康小鼠80只分两批，一批做外周血白细胞计数实验，另一批做小鼠骨髓细胞微核试验和骨髓细胞DNA实验。每批4组，每组10只，设低、中、高3个剂量组和1个辐射模型对照组。剂量组动物取成人推荐摄入量的1，10，30倍，即0.013 3，0.133，0.4 g／kg BW，各组均按0.1 mL／10 g BW剂量经口灌胃。

3.1.1 外周血细胞计数实验各剂量组经口灌胃40 d，辐射模型对照组每天以同样方式给予同体积的去离子水。在实验的第27天各组小鼠均以5 Gy Co60-γ射线全身照射1次。于照射前、照射后第3，14天取尾血测定WBC，分别比较照射前各组WBC总数、照射后第3天辐射模型对照组自身WBC总数、各时间点各剂量组与辐射模型对照组WBC总数的变化。各组均在实验前、照射前、照射后3 d和照射后14 d称重。

3.1.2 小鼠骨髓细胞微核实验和骨髓细胞DNA实验各剂量组均按0.1 mL／10 g BW经口灌胃，1次／d，连续30 d，辐射模型对照组每天以同样方式给予同体积的去离子水。在实验的第27天各组小鼠均以5 Gy Co60-γ射线全身照射1次。于照射后第3天，颈椎脱臼处死动物，常规取胸骨制片、固定、染色，油镜下对每只动物观察1 000个嗜多染红细胞，计算含微核细胞数及微核细胞率。剥离出股骨，取1 mL Hank's液，冲出股骨中的全部骨髓细胞，混匀后用酶联免疫光谱分析仪Plus 384 260 nm处测定骨髓细胞DNA含量。各组在初始、照射前、照射后3 d称重。

3.2 实验结果

3.2.1 对小鼠外周血WBC计数的影响见表4。

表4 对小鼠外周血WBC计数的影响±s，n＝10）

表4 对小鼠外周血WBC计数的影响±s，n＝10）

注：与辐射模型对照组比较，＃P＜0.05；＃＃P＜0.01。

白细胞总数／（×109／L）14 d辐射模型对照组—8.15±2.90 1.53±0.32 2.03±0.36低剂量组13.3 7.86±2.63 1.65±0.42 2.14±0.43中剂量组133.0 7.80±2.40 1.87±0.28＃2.42±0.35＃高剂量组400.0 7.80±2.35 2.01±0.30＃＃2.51±0.34组别剂量／（mg／kg BW）照射前照射3 d照射＃＃

3.2.2 对小鼠骨髓细胞微核及骨髓有核细胞DNA含量的影响见表5。

注：与辐射模型对照组比较，＃P＜0.05；＃＃P＜0.01。

4 讨论

经口给予小鼠不同剂量的样品能提高小鼠的半数溶血值，小鼠抗体生成细胞数，增强小鼠的迟发型变态反应，提高小鼠单核-巨噬细胞的碳廓清能力，表明红景天灵芝胶囊具有增强免疫力之功能；抗辐射实验结果显示：样品能够显著增加辐射后小鼠外周血白细胞数量，并抑制小鼠的骨髓细胞微核率，表明红景天灵芝胶囊对辐射危害具有辅助保护功能。

［1］袁瑜.红景天活性成分及药理作用［J］.食品与药品，2007，9（5）：55-57.

［2］张新胜.红景天苷对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响［J］.四川大学学报：医学版，2005，36（6）：821-823.

［3］袁带秀.灵芝活性成分、药理作用及其应用［J］.中国民族民间医药杂志，2006（2）：110-112.

［4］吴京燕.灵芝多糖合剂抗辐射保健功能的研究［J］.南京师大学报：自然科学版，2003，26（3）：80.

R285.5

A

1007－4813（2010）06－0817－02

2010－09－27）

吉林省科技发展计划项目（20050215-3）

李金花（1973－），女，大学本科，助理研究员。研究方向：药用真菌及保健食品的开发研究。