芍药甘草汤对梗阻输尿管平滑肌电活动频率影响的实验研究

杨晓溪 赵舒 常青

(华北煤炭医学院中医学系 河北 唐山 063000;①贵阳中医学院第一附属医院泌尿外科)

芍药甘草汤出自东汉张仲景《伤寒论》,该方配伍严谨,用药精简,为中医临床常用的柔肝缓急、疏挛止痛方剂[1]。后世临床实践中其应用范围日趋广泛,常作为缓痉止痛之主方用于治疗多种痛证,如筋脉、经络、肌肉之痛等每有效验。现代药理研究表明,芍药、甘草均有镇静、镇痛、抗炎、抗过敏等作用[2],二药合用诸药理作用增强,对身体的挛急有效。而对于深在输尿管平滑肌,如胃肠、胆囊、子宫等亦有实验报道,证实本方具有缓解平滑肌痉挛及镇痛的作用。本文继续从解痉角度观察芍药甘草汤对家兔梗阻前后各期的输尿管平滑肌电活动频率的影响,探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物及分组 健康成年实验白家兔 40只,雌雄各半,兔龄6～8月,体质量 2.0～3.0kg,由贵阳医学院实验动物所提供。将实验动物在实验室条件下饲养 3天后,随机分为 A、B、C、D、E 5组:A为绞痛模型组,B为芍药甘草汤大剂量治疗组,C为芍药甘草汤中剂量治疗组,D为芍药甘草汤小剂量治疗组,E为阳性对照组,每组8只。术前 12h禁食、6h禁饮。麻醉前各组均下胃管,以备灌注药液。所有动物均制做病理模型。

1.2 药物

1.2.1 芍药甘草汤(由白芍药、炙甘草组成)。处方中药材购自贵阳中医学院第一附属医院门诊中药房,经鉴定为正品。根据原著对该方组方规律研究的文献及现代临床用药习惯确定本方白芍药、炙甘草之比为 2:1,即白芍药 55.68g、炙甘草 27.84g。按此量(83.52g)为 60kg成人每次临床用药量计算,家兔等效剂量为:3.3(折算系数)×83.52g/60kg≈5g/kg[3]。以水煎煮,分别浓缩成含生药量为 0.375g、0.75g、1.5g/mL3种浓度的药液,即芍药甘草汤小、中、大剂量组,供家兔灌胃顿服,各组灌胃体积均为 20mL/次。

1.2.2 阿托品注射液。购自贵阳中医学院第一附属医院门诊中药房。按 60kg成人每次临床推荐口服用量为 0.5mg/次,3kg家兔等效量为:3kg×3.3(折算系数)×0.5mg/60kg≈0.08mg[3]。取 0.08mg阿托品,用无菌注射用水配制成浓度为 0.004mg/mL的液体,供家兔灌胃用,灌胃体积为 20mL/次,顿服。

1.3 仪器 MS4000U生物信号定量记录分析系统,广州市龙飞达科技有限公司研制,具有强大的生物信号显示与数据处理功能。Ag/Agcl电极。

1.4 实验方法 实验在室温 23～25℃中进行,25%乌拉坦(1g/kg)腹腔注射,麻醉起效后,将实验家兔背位固定于兔台上。颈部手术:插好气管插管。5%葡萄糖盐水耳缘静脉缓慢静滴,15滴/分钟左右。取下腹部正中切口,经腹相当于髂血管水平仔细分离两侧输尿管,尽量保持血运。在该侧输尿管下段预定结扎部位之上 0.5cm处安放一对 Ag/Agcl记录电极,两电极相距 0.5cm,两电极平行安放于输尿管下面,使电极与输尿管紧密接触。Ag/Agcl记录电极接相应的MS4000U生物电信号输入系统,肌电信号通过电信号定量分析系统作实时的显示、记录与储存。本实验利用实验室的自身屏蔽作用,通过MS4000U生物信号定量记录分析系统接地及其滤波、增益等功能将噪音减小,改善波形质量,使得电信号反应更容易,更准确,排除无关电信号的干扰。5组结扎给药前均记录 10min正常输尿管平滑肌动作电位频率。于输尿管下段靠近膀胱部位行输尿管结扎,造成梗阻模型。结扎后分组灌胃给药,顿服 20mL。A组给予无菌注射用水灌胃,B组给予大剂量芍药甘草汤灌胃,C组给予中剂量芍药甘草汤灌胃,D组给予小剂量芍药甘草汤灌胃,E组给予阿托品灌胃。分别记录给药后 1、5、30、45、60、90min的输尿管平滑肌动作电位频率变化。

1.5 观察指标 实验家兔正常、梗阻给药后各时期的输尿管平滑肌动作电位频率。

1.6 统计学方法 数据采用 SPSS13.0版统计软件进行分析,计量资料以均数 ±标准差()表示,采用 t检验、重复测量数据的方差分析进行统计检验。

2 结果

表1 各组家兔正常、梗阻后各期的输尿管平滑肌电活动频率比较(, 次/min)

表1 各组家兔正常、梗阻后各期的输尿管平滑肌电活动频率比较(, 次/min)

注:与结扎给药前比较,△P＜0.01;与绞痛模型组比较,●P＜0.05

组别 n 结扎给药前 结扎给药后不同时间(min)即刻 5 30 45 60 90绞痛模型组 8 5.4±0.2 8.4±0.6△ 9.2±4.0△ 9.5±1.1△ 9.6±4.2△ 9.7±3.4△ 9.9±2.7△芍甘汤大剂组 8 5.3±0.2 8.4±0.6△ 9.0±4.3△ 8.4±3.4△ 7.6±3.4△ 7.3±3.5△ 6.5±1.9△●芍甘汤中剂组 8 5.2±0.2 8.5±0.7△ 9.1±3.3△ 9.0±2.4△ 8.6±2.6△ 8.1±3.3△ 7.9±3.3△芍甘汤小剂组 8 5.5±0.3 8.5±0.6△ 9.3±4.2△ 9.4±2.1△ 9.2±4.0△ 9.5±3.3△ 9.5±4.0△阳性对照组 8 5.3±0.2 8.4±0.7△ 8.8±3.1△ 7.8±3.9△ 7.4±3.3△ 7.2±2.9△ 6.6±2.1△●

各组输尿管平滑肌电频活动频率见表 1、图 1。由表 1可见,结扎给药后各时间点与结扎给药前比较,输尿管平滑肌电活动频率均显著增高(P＜0.01)。与绞痛模型组比较:芍药甘草汤大剂量组、阿托品阳性对照组输尿管平滑肌电活动频率显著降低,并且差别具有统计学意义(P＜0.05);结扎给药后 90min芍药甘草汤中、小剂量组输尿管平滑肌电活动频率值也较绞痛模型组低,但差别不具有统计学意义(P＞0.05)。芍药甘草汤大剂量组与阿托品阳性对照组比较:大剂量组输尿管平滑肌电活动频率值略低于阳性对照组,但二者差异无统计学意义(P＞0.05)。

图1 频率交互效应轮廓图

3 讨论

输尿管急性梗阻是泌尿外科常见急症。其主要病理特点为,梗阻后尿液下行排泄受阻,尿液在集合系统内积聚,输尿管内静息压力升高,输尿管平滑肌蠕动频率和幅度也暂时升高,引起输尿管平滑肌痉挛,最终往往诱发肾绞痛的出现。临床表现多有阵发性绞痛,患者往往难以忍受,治疗上主要采用解痉、镇痛等方法。基于以上认识,本实验主要针对各时间段输尿管平滑肌电活动频率的变化进行探讨,以观察芍药甘草汤的解痉疗效。根据本病发生的病因病机并结合相关文献研究,实验采用周水生、朱喜山等人[4～6]结扎家兔单侧输尿管的方法复制输尿管急性梗阻的动物模型。

研究结果显示,各组家兔输尿管结扎给药后各时间点与结扎给药前相比,输尿管平滑肌电活动频率均显著升高(P＜0.01),证明模型较好地复制了本病的一些主要病理过程,具有可重复性。

与绞痛模型组比较,大剂量芍药甘草汤输尿管平滑肌电活动频率升高缓慢,其值较低(P＜0.05);中剂量芍药甘草汤输尿管平滑肌电活动频率也随时间的延长而升高缓慢,但二者差异无统计学意义(P＞0.05);小剂量芍药甘草汤输尿管平滑肌电活动频率值亦略低于绞痛模型组(P＞0.05)。实验结果证实大剂量芍药甘草汤具有明显解痉作用,而中、小剂量芍药甘草汤解痉疗效不显著。

与阳性对照组比较,芍药甘草汤大剂量组,其电活动频率值略低,但二者差异无统计学意义(P＞0.05)。说明大剂量芍药甘草汤可与口服阿托品解痉疗效相当,甚至更好。由结果知,中、小剂量芍药甘草汤则较口服阿托品解痉疗效差。且阿托品作用还具有出现快,但维持时间较短的弊端。芍药甘草汤作用尽管出现慢,但解痉疗效巩固持久。

结果表明,芍药甘草汤能明显降低输尿管平滑肌电活动频率,对痉挛输尿管平滑肌具有明显地解痉作用。而此作用与芍药甘草汤剂量有一定依赖性。

[1]沈祥春,陶 玲,方泰惠.芍药甘草汤临床及药理进展[J].新疆中医药,2001,2(19):59

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[3]赵 华,杨世杰.医用技能实验教程[M].北京:科学技术出版社,2004.27

[4]王明江,王新均,冯桂香,等.维生素 K3对家兔输尿管平滑肌动作电位和尿路动力学的影响[J].邵阳医学院学报,2005,24(2):83

[5]周水生,高建平,张 锐,等.黄体酮治疗肾绞痛的实验研究和临床观察[J].江苏中医,1994,20(12):698

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