乳酸菌发酵液体饲料对生长猪生长性能和粪中微生物区系的影响

陈鲜鑫 王金全 王春阳 张广民 孙占敏

发酵液体饲料(Fermented liquid feed,FLF)作为一种新型饲料,最早使用是在20世纪80年代末的荷兰，当时的发酵液体饲料实际上就是湿拌料(陈文斌，2004)。随着现代饲料工业技术的发展，发酵液体饲料正朝着可人工控制发酵过程的方向发展 (王金全，2009)。FLF较传统干料和湿拌料(NFLF)有许多优点，如可使用食品发酵工业副产物，大大降低饲料成本；更符合猪的消化生理特点和动物福利；放大酶制剂和微生态制剂的作用，提高营养物质的消化利用率、改善猪生长性能；还可降低动物胃肠道pH值，抑制病原菌繁殖，调节动物肠道微生态环境，促进动物健康等(王金全，2009；朱新贵，2001；Carlson D 等，1999、2003；Plumed-Ferrer C，2004)。然而 FLF 品质受发酵菌种、温度、pH值、日粮组成、发酵促进剂等多种因素的影响，使得在现实生产中很难得到一种品质稳定的 FLF(李军，2001)。Brooks(1998)指出，到目前为止，还没有足够的发酵参数来保证发酵的效果。虽然我国在20世纪90年代后就开始认识并研究发酵饲料(何谦，2007)，但国内仍缺少有关发酵液体饲料应用的实验性报道。本试验通过对生长猪饲喂乳酸菌发酵液体饲料来说明其对生长猪生长性能和粪中微生物的影响，为发酵液体饲料的推广提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计

本试验按单因子多重复设计，将54头平均体重(30.88±0.47)kg的杜长大三元杂交生长猪，随机分为3个处理，每个处理3个重复，每个重复6头猪。

1.2 试验日粮

基础日粮参照NRC(1998)猪营养需要配置，基础日粮组成及营养水平见表1。3处理日粮分别为基础日粮(对照组)、基础日粮+水(NFLF)、基础日粮+水+乳酸菌(FLF)。FLF只发酵基础日粮中大料部分，厌氧环境下发酵24 h后再与4%预混料均匀混合，随后立即饲喂。4%预混料和大料均不含任何抗生素和药物，NFLF和FLF水料比均为1.6：1，菌液添加量为每千克基础日粮添加1ml。

表1 日粮组成及营养水平

1.3 试验管理

试验于2009年5月10日至2009年6月10日在中国农业科学院试验基地进行。每天8:00和16:00定时饲喂两次，每次饲喂前将食槽内余料清理干净，自由饮水。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生长性能的测定

每天准确记录各重复的采食量，以计算其全期平均采食量。试验开始和结束时以重复为单位对每圈生长猪进行称重，计算其平均日增重。通过全期的平均采食量和平均日增重计算全期的料肉比。

1.4.2 粪中微生物含量的测定

1.4.2.1 样品采集

试验第30 d早上，每个重复随机选择4头健康生长猪进行粪样收集，用50 ml灭菌离心管采集新鲜无污染粪样，立即放入-20℃冰箱保存待测。

1.4.2.2 粪样的稀释

超净台内取1 g粪样于无菌试管内，加入PBS缓冲液9 ml，用磁力振荡器振荡3～5 min，此液为10-1稀释液，吸取1 ml此液于盛有9 ml无菌PBS缓冲液试管中进行10-2稀释，振荡3～4 min，并依次进行10-3～10-6倍稀释。

1.4.2.3 接种及培养

大肠杆菌：粪样 10-3～10-6稀释液 10 μl接种于伊红美蓝(EMB)培养基平皿上(各稀释度设3个重复)，37℃有氧培养24 h后进行菌落计数。

乳酸菌：粪样10-3～10-6稀释液10 μl接种于乳酸菌选择性培养基 (MRS)平皿上 (各稀释度设3个重复)，37℃厌氧培养48 h后进行菌落计数。

沙门氏菌：粪样 10-1～10-4稀释液 10 μl接种于SS琼脂培养基平皿上(各稀释度设3个重复)，37℃有氧培养24 h后进行菌落计数。

1.5 统计与方法

试验数据采用SPSS统计软件anova one-way过程进行单因素的方差分析，LSD多重比较。

2 结果与分析

2.1 FLF对生长猪生长性能的影响（见表2）

从表2可知，FLF组与对照组相比日增重提高了34.03%(P＜0.05)、采食量提高了 12.55(P＜0.05)、料肉比降低了15.84%(P＜0.05)。NFLF组与对照组相比日增重提高了14.69%(P＜0.05)、采食量提高了20.29%(P＜0.05)、料肉比提高 4.99%(P＞0.05)。FLF 与 NFLF 相比日增重提高了16.86%(P＜0.05)、采食量降低了6.44%(P＞0.05)、料肉比降低了 19.83%(P＜0.05)。

表2 FLF对生长猪生长性能的影响

2.2 FLF对生长猪粪中微生物的影响（见表3）

从表3中可以看出，FLF组与对照组相比，粪中乳酸菌数量显著提高，差异显著(P＜0.05)、大肠杆菌数量显著降低(P＜0.05)、沙门氏菌数量显著降低，差异显著(P＜0.05)；NFLF组与对照组相比，粪中乳酸菌数量显著提高，差异显著(P＜0.05)，大肠杆菌和沙门氏菌有下降的趋势，但差异不显著(P＞0.05)；FLF组与NFLF组相比，粪中乳酸菌数量提高25.25%(P＜0.05)、大肠杆菌下降了31.68%(P＜0.05)、沙门氏菌下降了40.21%(P＜0.05)。

表3 FLF对生长猪粪中微生物的影响(log10 CFU/g鲜内容物)

3 讨论

王蔚淼等(2008)报道，微生物在发酵过程中可消除部分植物性原料中的抗消化因子和抗营养因子等不良因子；原料中的大分子被降解为小分子，有利于对饲料的消化和吸收，改善动物的生长性能。安永福(1995)、代永刚等(2009)报道，乳酸菌可分解食物中的蛋白质、糖类、对脂肪也有微弱的分解能力，能促进食物的消化吸收，产生对风味起决定性作用的芳香类物质，提高饲料适口性。

从表2的试验结果可以看出，FLF明显改善了生长猪的生长性能。与Canibel(2003)试验结果不完全一致，Canibel对60只平均体重30.7 kg的生长猪试验结果表明，FLF较非发酵液体饲料(NFLF)和颗粒饲料对生长猪生产性能没有影响。究其原因，可能是由于饲料的过度发酵，导致了饲料中碳水化合物的大量消耗，且产生大量乙酸等发酵副产物，使液体发酵饲料适口性降低，从而导致采食量的下降(N.Canibel等，2003)。也可能与发酵菌种有关，陈文斌(2004)报道，菌种的好坏将直接影响发酵液体饲料的饲喂效果。Scholten等(2001)发现，生长育肥猪饲料发酵72 h会导致饲料中淀粉等碳水化合物的减少，从而影响生长育肥猪采食量及生长性能。N.Canibel等(2007)、Brooks P H等(2001)报道，液体发酵饲料在发酵过程中有25%～28%的赖氨酸被大肠杆菌转化为尸氨，高水平的尸氨等生物氨可能会降低发酵液体饲料的适口性，影响生长猪生长性能。

本试验中，乳酸菌液体发酵饲料显著提高了乳酸菌含量(P＜0.01)，显著降低了粪中大肠杆菌(P＜0.01)和沙门氏菌含量 (P＜0.05)，这与许多研究结果一致。Jensen 等 (1998)、N.Canibel等 (2003)、Højberg O 等(2003)研究表明，饲喂发酵液体饲料能显著降低小肠后部、盲肠和结肠中大肠杆菌的数量，从而使大肠杆菌的隐性感染率大幅降低，具有较好的抑菌效果。Van Winsen等(1997、2001)给猪饲喂植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)发酵饲料也得到了相似的结果。同时Brooks(1999)指出，发酵液体饲料能把后肠大肠杆菌的浓度降低到2 log cfu/g。这是因为乳酸菌发酵过程中产生乳酸、乙酸和其它挥发酸，使肠道pH值降低，提高酸度从而对猪胃酸度及肠道产生影响,阻止致病菌在肠道的生长和繁殖(倪耀娣等，2004；陈文斌等，2004)。此外，王金全(2005)报道，动物肠道内的微生态系统存在着一种菌群平衡关系，如果某一种菌群大量繁殖，势必会对其他种群的生长产生竞争和影响，甚至抑制其他菌群的生长,说明了猪采食富含活性乳酸菌的发酵液体饲料后粪中大肠杆菌和沙门氏菌减少的另一种原因。

4 结论

乳酸菌发酵液体饲料较传统干料和湿拌料，可显著提高生长猪日增重、显著降低料肉比、对采食量影响不明显；可显著提高生长猪粪中乳酸菌含量、显著降低粪中大肠杆菌和沙门氏菌含量。

[1]安永福.浅谈乳酸菌及其特点[J].中国奶牛，1995(5)：50～51.

[2]陈文斌，艾薇.发酵液体饲料——一种新型饲料的应用研究[J].饲料研究，2004(3)：27-29.

[3]陈文斌，艾薇.发酵液体饲料应用研究进展[J].中国饲料，2004(9)：8-9.

[4]代永刚，田志刚，南喜平.乳酸菌及其生理功能研究进展[J].农产品加工·学刊，2009（7）：24-27.

[5]何谦，郭进超，李岩，等.发酵液体饲料在断奶仔猪的应用进展[J].养猪，2007（5）：5-7.

[6]李军，张日俊.发酵液体饲料的研究进展[J].国外畜牧科技，2001（6）：21-23.

[7]王金全，蔡辉益，周岩华，等.小麦日粮非淀粉多糖和木聚糖酶对肉仔鸡肠道微生物区系的影响[J].畜牧兽医学报，2005，36(10)：1014-1021.

[8]王金全，周岩华，蔡辉益.国际猪液体饲喂研究进展[J].养猪，2009（4）：11-14.

[9]王蔚淼，张家学，齐振雄.乳酸菌类微生态制剂在饲料中的应用[J].饲料博览·技术版，2008（7）：8-11.

[10]倪耀娣，李睿文，张庆茹，等.活菌制剂对肉仔鸡盲肠微生物数量的影响[J].中国兽医医药杂志，2004（4）：44-45.

[11]朱新贵，林捷.几种食品微生物降解黄曲霉毒素作用的研究[J].食品科学，2001（10）：65-67.

[12]Brooks P H，Beal J D，Niven S.Liquid feeding of pigs:potential for reducing environmental impact and for improving productivity and food safety[J].Recent Adv.Anim.Nutr.Austr，2001，13：49-63.

[13]Brooks P H.Effect on weaner pig performance and diet microbiology of feeding a liquid diet acidified to pH 4 with either lactic acid or through fermentation with Pediococcus acidilactici[J].Joumal of the Science of Food and Agriculture，1999，79：633-640.

[14]Carlson D，Poulsen H D.Phytate degradation in soaked and fermented barley and wheat(preliminary studies)[J].Nordic Agric Res.,1999,81：278-283.

[15]Carlson D，Poulsen H D.Phytate degradation in soaked and fermented liquid feed-effect of diet，time of soaking，heat treatment，phytase activity，pH and temperature[J].Animal Feed Science and Technology，2003，103：141-154.

[16]Jensen B B,Mikkelsen L L.Feeding liquid diets to pigs[A]//Gamsworthy P C，Wiseman J.Recent Advance in Animal Nutrition[M].Nottingham：Nottingham University Press，1998，127-136.

[17]N.Canibe，O.Højberg J H.Badsberg,B.B.Jensen.Effect of feeding fermented liquid feed and fermented grain on gastrointestinal ecology and growth performance in piglets[J].Journal of animal science，2007，85：2959-2971.

[18]N.Canibe，Jensen B B.Fermented and nonfermented liquid feed to growing pigs：Effect on aspects of gastrointestinal ecology and growth performance[J].Journal of animal science，2003，81：2019-2031.

[19]Ole Højberg，N.Canibe，B.Knudsen,et al.Potential rates of fermentation in digesta from the gastrointestinal tractof pigs:Effect of feeding fermented liquid feed[J].Applied and environmental microbiologe，2003，69：408-418.

[20]Plumed-Ferrer C，LLopis M，Hyvonen P,et al.Characterization of the microbial community and its changes in liquid piglet feed formulations[J].Journal of the Science of Food and Agriculture，2004，84：1315-1318.

[21]Scholten R.Fermentation of liquid diets for pigs.Ph.D.Diss，Wageningen Univ，Wageningen，The Netherlands.2001.

[22]Van Winsen R L，Urlings H A P，Snijders J M A.Feed as a vehiculum of Salmonella in pigs//Bech-Nielsen S，Nielsen J.P(Eds).Proceedings of the Second International Symposium on Epidemiology and Control of Salmonella in Pork[J],Copenhagen,Denmar，1997，157-159.

[23]Van Winsen R L，Lipman L J A，Biesterveld S,et al.Mechanism of Salmonella reduction in fermented pig feed[J].Journal of the Science of Food and Agriculture，2001，81：342-346.