中草药饲料添加剂对乌骨鸡生产性能与黑色素含量的影响

刘子暄，王小莺，严 明

（1.江西农业大学动物科技学院，南昌 330045；2.江西省中兽医研究所，南昌 330006）

泰和乌骨鸡是闻名中外的药用家禽，国际承认的标准品种，因具有药用、营养、观赏价值为古今中外学者所重视。乌骨鸡区别于其他鸡的显著特征是体内黑色素分布广泛，大量研究表明泰和乌骨鸡体内的黑色素，是滋补、强身健体、抗衰防老，颐养天年的物质基础，具有抗衰老、抗疲劳、调节机体平衡及抑制流感病毒诱导细胞凋亡的作用。乌骨鸡黑色素大量沉积在皮肤、肌肉、骨膜及部分内脏中，据《本草纲目》记载，乌骨鸡药用效果与鸡皮、肉和骨头的黑色深浅有关，其颜色越深者，入药愈佳[1]。因此本研究通过在基础饲料中添加中草药饲料添加剂来提高乌骨鸡酪氨酸酶的活性，以促进乌骨鸡黑色素的沉积，从而提高其药用价值和营养价值。

1 材料与方法

1.1 试验动物与试验设计

试验动物由江西省泰和县乌骨鸡原种场提供。选用健康、初生重相近的1日龄泰和乌骨鸡180羽，随机分为4组，每组设3个重复，每个重复15只鸡，分别为对照组、中药Ⅰ组、中药Ⅱ组、中药Ⅲ组。试验分0～4周龄、5～8周龄、9～12周龄三个阶段饲养。试验于2009年5月28日～2009年8月20日在江西农业大学动科院临床实验室进行。

1.2 中草药饲料添加剂

本试验三种中草药配方均由江西省中兽医研究所配置，将中草药干燥后粉碎成细粉，按泰和乌骨鸡基础日粮的0.5%添加，最后与基础日粮混匀。其中中药Ⅰ组添加的是0.5%以黑芝麻为主要成分的复方中草药添加剂Ⅰ，中药Ⅱ组添加的是0.5%以血余炭为主要成分的复方中草药添加剂Ⅱ，中药Ⅲ组添加的是0.5%以何首乌为主要成分的复方中草药添加剂Ⅲ。

1.3 日粮组成及营养水平

试验基础日粮分0～4周龄、5～8周龄、9～12周龄三个阶段。饲料原料营养价值参照《中国饲料数据库》（2007），其营养水平参照瞿明仁等（1999）、陈靖华等（1998）、陈楠和郑城（1997）、张顺珍等（1995）研究结果设计[2-6]。各组基础日粮组成及营养水平见表1：注：预混料可为每kg饲粮提供：维生素A，5500IU；维生素D3，650IU；维生素 E，35mg；维生素 K3，2.5mg；核黄素，7.5mg；泛酸 ，18.6mg； 尼 克 酸 ，45.0mg； 生 物 素 ，0.25mg； 维 生 素B12，100μg；锰，180mg，铁，240mg；锌 120mg；铜，25mg；碘，0.3mg；硒,0.5mg。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.4 测定方法

1.4.1 样本采集

分别在乌骨鸡4周龄、8周龄及12周龄末各重复组随机抽取2～3只健康状况正常，接近平均体重的乌骨鸡来进行测定。于清晨空腹称重后，立即放血宰杀，打开腹腔，取其肌肉，置于-20℃冰箱待测。

1.4.2 测定方法

生长性能

平均日增重： 分别于试验的第 0、2、4、6、8、10、12 周末清晨喂料前空腹称重，计算体增重，由末重与始重之差计算各重复组泰和乌骨鸡的平均日增重。

平均日采食量： 分别于试验的第 2、4、6、8、10、12 周末早晨，称量各重复组的饲料消耗量，计算各重复鸡的日采食量，用投料量减去剩料量即得采食量，算出平均日采食量。

料重比：由采食量与体增重相除得出。

死亡率和腹泻率：实验全期观察鸡群健康状况，记录各组每日的死亡数，统计鸡群死亡率，计算死淘率。腹泻以拉水样粪便，肛门留有腹泻物为依据，记录每天每组的腹泻只数。其中，腹泻率=（腹泻只数×腹泻天数）/（总只数×饲养天数）×100%。

黑色素含量

本试验选择泰和乌骨鸡的肌肉来测定当中黑色素的含量，通过盐酸提法提取黑色素，参照游艳华[7]等方法并加以改进。乌骨鸡黑色素含量计算公式是：黑色素含量=黑色素重量（g）/样本重量（g）×100%。

酪氨酸酶活性

参照邓君[8]、AlisonJ.WINDER[9]等主法并稍加改进。分别取乌骨鸡4周龄、8周龄及12周龄末的肌肉通过终止分光光度法，用UV-721可见分光光度计测定吸光度，以此对酪氨酸酶的活性来进行测定。其中波长为505nm，比色杯光径1cm，空白管调零，读取0min、5min时的吸光度，以A505每分钟增加或减少0.001为一个酶活力单位。

1.5 统计分析

所有的结果以平均数±S.D.表示。采用单因素方差分析法，利用SPSS13.0统计软件对数据进行方差分析和Duncan,s多重比较。

2 结果与分析

2.1 不同中草药添加剂对泰和乌骨鸡生产性能的影响

由表2见，在前2周对照组日增重、日采食量均比中药组低。但2～8周龄对照组与中药组差异不大。这可能是因为雏鸡免疫力差，容易感染球虫病以及鸡白痢，并表现为精神萎靡、腹泻、食欲差，有些严重的甚至造成死亡，而中药组在基础日粮中添加的中草药添加剂能在一定程度上提高雏鸡的免疫力和抗病力，减少腹泻鸡只数量与腹泻程度，从而提高其日增重与日采食量。由表3可见，中药组的乌骨鸡腹泻率与死亡率确实均要低于对照组。对于料重比，在0～10周龄时，对照组与中药组四个试验组各组之间均差异不大。在11～12周龄时，对照组比中药组均低，与中药Ⅰ组、中药Ⅱ组有显著差异（P＜0.05）。在9～12周龄时，对照组在日增重及日采食量方面也均略高于中药组，但差异不显著（P＞0.05）。这可能是由于中草药的适口性不好，从而影响了鸡的采食量，使其采食量要略低于对照组。然而，从全期（0～12周龄）来看，平均日增重、平均日采食量和料重比各组之间不存在显著差异（P＞0.05）。

表2 中草药添加剂对泰和乌骨鸡日增重及日采食量的影响

接上表

从表3可知，除中药Ⅰ组外、中药Ⅱ组、中药Ⅲ组全期死亡率与对照组相比均有下降的趋势，其中中药Ⅱ组的死亡率最低，比对照组下降了4.44个百分点。腹泻率以对照组最高，占总鸡数的3.89%，中药Ⅲ组的腹泻率最低，比对照组下降了8..89个百分点。这可能是因为饲料中添加的复方中草药添加剂，能驱虫杀菌、增强机体免疫力，对于缓解乌骨鸡试验期初期的腹泻与应激具有一定效果，增强了适应能力，从而降低了腹泻率与死亡率。

表3 中草药添加剂对泰和乌骨鸡死亡率及腹泻的影响

2.2 中草药添加剂对泰和乌骨鸡黑色素含量的影响

如表4示，全期来看，中药Ⅰ组、中药Ⅲ组泰和乌骨鸡肌肉中的黑色素含量均高于对照组，而不同中药之间肌肉中黑色素含量差异均不显著（P＞0.05）。9～12周龄时，三个中药组肌肉中的黑色素含量均高于对照组，其中，中药Ⅰ组、中药Ⅲ组肌肉黑色素含量显著高于对照组（p＞0.05）。从总体来看，三个中草药添加剂均能够不同程度上提高泰和乌骨肌肉黑色素的合成，随着日龄的增大，各组乌骨鸡肌肉中黑色素的含量均有不同程度的下降趋势。

表4 中草药添加剂对泰和乌骨鸡黑色素的影响（%）

2.3 中草药添加剂对泰和乌骨鸡酪氨酸酶活力的影响

从表5知，4周龄、8周龄时，中药Ⅰ组泰和乌骨鸡肌肉中的酪氨酸酶活力均显著高于对照（p＜0.05）。12周龄时，中药Ⅱ组乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶活力高于其它三个试验组，并显著高于对照组（p＜0.05）。从总体上看，三个中药组肌肉中酪氨酸酶活力全期均略高于对照组，而三个中药组之间差异不显著（P＞0.05），且各试验组泰和乌骨鸡肌肉中的酪氨酸酶活力随周龄的增加而呈现出下降的趋势。

将上述结果同表4进行比较可发现，这三种不同复方中草药添加剂确实能在不同程度上提高泰和乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶的活力，从而促进黑色素的合成。由此说明作为黑色素生成过程中第一限速酶的酪氨酸酶，其活力大小确实对于黑色素的合成起着决定性的作用。

表5 中草药添加剂对泰和乌骨鸡酪氨酸酶活力的影响

3 讨论

中草药饲料添加剂作为绿色、安全的饲料添加剂，如今已成为国内外的研究热点。大量研究表明，动物饲料中添加中草药可提高动物体免疫功能，增加营养物质消化利用率，提高畜禽生产性能和降低饲料成本。本研究通过饲料途径来促进乌骨鸡酪氨酸酶活性以及黑色素的合成，从而探讨利用中草药饲料添加剂在乌骨鸡药用价值和营养价值的可行性。试验结果表明，本研究所用的三个中草药添加剂在乌骨鸡前2周能一定程度提高雏鸡的免疫力和抗病力，减少腹泻鸡只数量、程度与死亡率，提高其日增重与日采食量。中药组采用食量要略低于对照组。然而从全期（0～12周龄）来看，三种中草药添加剂总体上并未对泰和乌骨鸡的生产性能造成不利影响。

黑色素的生成是黑素细胞的一个复杂生化过程，黑色素由酪氨酸经酪氨酸酶的作用，经过一系列的复杂的生物转化反应而形成。在黑色素的生物合成过程中，有三种酶对黑色素的合成起着重用作用，即酪氨酸酶、多巴色素互变酶和5，6一二羟基吲哚羧酸氧化酶，其中，酪氨酸酶是各种生物体黑色素生成的限速酶或关键酶[1]，对酪氨酸酶活性调节可直接影响黑色素的合成。在医学上，大量研究表明许多中草药对酪氨酸酶具有激活作用，并能促进酪氨酸酶相关蛋白基因的表达，并进而促进黑色素的合成，本研究中，三个不同复方中草药添加剂（0.5%添加水平）在试验全期也均能不同程度提高泰和乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶的活性从而促进黑色素的合成，表明本研究中这三种中草药饲料添加剂确实对酪氨酸酶具有激活作用并进而促进黑色素的合成。

在本研究中，三种不同复方中草药添加剂在试验全期均能不同程度提高泰和乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶的活性以及黑色素的合成，但是对酪氨酸酶的激活能力与体内促进黑色素的合成的能力并不完全平行。8周龄时中药Ⅰ组乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶的活性与对照组有显著差异（P＜0.05）。但是其黑色素含量在12周龄时才与对照组形成显著差异（P＜0.05）。12周龄时中药Ⅱ组乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶的活性与对照组形成显著差异（P＜0.05），但是同时期其黑色素含量高于对照组但未有显著差异。这可能是因为黑色素由酪氨酸酶的作用，经过一系列的复杂的生物转化反应才能形成，这需要一个过程，因此对黑色素合成的影响要滞后一些，从而造成对乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶的激活能力与体内促进黑色素合成的能力并不平行。中药Ⅲ组乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶的的活性三个阶段均高于对照组但未形成显著差异，而其黑色素含量在全期均高于其他试验组，并在12周龄时显著高于对照组（P＜0.05），解释该现象的原因是可能中药促进黑色素生成的机理，不仅限于对酪氨酸酶的激活作用，还可能存在其他的作用机制，从而造成对乌骨鸡肌肉酪氨酸酶的激活能力与体内促进黑色素合成的能力并不完全平行。因此，中草药添加剂对泰和乌骨鸡酪氨酸酶活性与黑色素合成过程中其它相关酶的调节作用值得进一步研究，以利于深入揭示中草药促进泰和乌骨鸡黑色素合成的可能机制，从而为中草药在提高泰和乌骨鸡黑色素含量中的推广应人提供更为确切的科学依据。

4 结论

本试验所用三种不同复方中草药添加剂以0.5%水平添加至泰和乌骨鸡日粮中，总体上未对泰和乌骨鸡的生产性能造成不利影响，且能在一定程度上提高雏鸡的免疫力和抗病力，降低其腹泻率与死亡率，并且不同程度地提高泰和乌骨鸡肌肉中酪氨酸酶的活性，促进其黑色素的合成。中草药添加剂促进泰和乌骨鸡黑色素合成的作用机制值得我们进一步研究，以利进一步筛选作用更强的中草药添加剂配方，为中草药在提高泰和乌骨鸡黑色素含量中的推广应用提供更为确切的科学依据。

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