非小细胞肺癌外周血内皮细胞关系初步探讨

程伟雄 吴北林

目前,内皮细胞(endothelial cells,ECs)相关的血管再生及损伤血管修复已经成为肿瘤等疾病中的研究热点[1-7]。本研究观察NSCLC患者外周血中CECs改变,并与临床相关指标进行综合分析，进一步论证其在肺癌病变发生发展中的作用以及临床价值。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选择2006年5月～2009年4月我院40例住院患者,全部患者均经病理组织学证实为NSCLC, 40例NSCLC患者根据临床资料分为Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期，每期各10例。并根据治疗前后分组。同时收集肿瘤标记物NSE、CYFRA 21-1、β2-MG、FIB等。NSCLC组40例，其中男25例，女15例，年龄(45.2±12.3)岁；对照组10例，为正常老年人，其中男6例，女4例，年龄(45.2±12.3)岁。两组一般情况具有可比性。

1.2 CECs的检测 细胞表面标志采用CD 45-Cy 5，CD31-FITC标记。内皮细胞(ECs): CD31+/CD45-。

1.3 检测方法 采用荧光抗体标记,流式细胞仪检测。抽取外周血3m l，抗凝，血标本用PBS液2倍稀释，Ficoll分离，1800r/m in离心20m in，PBS洗2次。将细胞加入96孔板中，每孔5×105个细胞，加入抗体5μl，4℃孵育30～60m in，用PBS液洗涤标本2次，100μl的1%多聚甲醛固定，流式细胞仪检测。

1.4 统计学分析 统计数据采用SPSS11.0统计软件包，用均数±标准差(±s)表示，t检验分析两组数据间均数的差异,方差分析法分析多组数据间均数的差异。采用Person相关系数进行相关性分析。

2 结果

2.1 肺癌组与对照组患者外周血中CECs变化情况

肺癌组外周血中CECs的含量治疗前Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分别为(0.126±0.004)、(0.187±0.007)、(0.225±0.010)、(0.273±0.008)。治疗后Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分别为(0.152±0.006)、(0.235±0.008)、(0.256±0.010)、(0.307±0.020)。对照组为(0.061±0.011)。肺癌患者外周血中的ECs含量均高于正常对照组(P＜0.05)，Ⅰ期与对照组比较无统计学差异(P＞0.05)，Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期与对照组比较有统计学差异(P＜0.05)。肺癌患者治疗前后两组比较无统计学差异(P＞0.05)，见表1。

表1 肺癌患者治疗前后两组外周血中CECs变化情况比较

2.2 肺癌患者治疗前外周血中ECs与肿瘤标记物NSE、CYFRA 21-1、β2-MG、FIB相关性分析 在肺癌患者中，ECs数值与β2-MG、FIB有正相关性，(r值分别为0.218，0.224，P＜0.05)，与肿瘤标记物NSE、CYFRA 21-1、无相关性。

3 讨论

肿瘤是一个异常细胞生长和扩散的增殖性疾病, 肿瘤的新生血管很大程度上和内皮细胞的功能紊乱有关，所以抑制肿瘤新生血管是治疗肿瘤的一个策略，也是目前研究热点[1-7]。目前，化疗和抑制血管生成抑制剂联合应用已成为肿瘤治疗的新方法。这一新方式使得受损肿瘤内皮细胞没有时间康复,因此剥夺了肿瘤生长与转移所必需的营养支持。那么,如何评定血管生成抑制剂对于血管内皮的疗效？目前，许多研究方法检测内皮细胞的产物或调控因子，较理想的方法是用EC的水平来估计新生血管抑制的程度和功能紊乱情况，随着内皮细胞免疫标志的证实，用流式细胞仪快速、准确测定内皮细胞本身成为可能[4-6]。本研究通过观察治疗前后EC水平的变化，并与对照组比较，发现内皮细胞在肺癌患者中数目增多，与文献报道一致。由于实际困难，未能使用更准确的CD146标记[8]。但随着对内皮功能的深入研究，以及对内皮抑素临床实验的完成，EC作为一个肿瘤新标记以及在药物疗效监测、治疗靶点等多方面的作用将越来越显现。

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