Smad7和TGF-β1在宫颈癌中的表达及意义

孟茜 孟娟

Smad7和TGF-β1在宫颈癌中的表达及意义

孟茜 孟娟

目的 探讨Smad7和TGF-β1在宫颈癌中的表达，研究其在不同临床病理特征中的意义。方法 以88例宫颈癌标本作为实验组，以40例慢性宫颈炎组织作为对照组，应用免疫组织化学技术，分别检测Smad7和TGF-β1在二组中的表达及在肿瘤不同临床病理特征之间的关系。结果 宫颈癌中Smad7和TGF-β1表达的阳性率明显高于对照组(P＜0.05)，Smad7和TGF-β1的表达与宫颈癌临床分期、浸润宫颈管长度及淋巴结转移密切相关(P＜0.05)，Smad7和TGF-β1在宫颈癌中的表达具有正相关关系(P＜0.05)。结论 宫颈癌在发生发展过程中，Smad7和TGF-β1起重要的协同作用，联合检测Smad7和TGF-β1在宫颈癌中的表达可能对判断预后有重要价值。

宫颈癌；Smad7；TGF-β1；免疫组化

宫颈癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一，其发生与发展是多因素综合作用的结果。近来相关研究表明信号转导在肿瘤的发病中具有重要作用[1]。Smad7是抑制性Smads重要成员之一，它可以与TβR-I结合，通过竞争抑制方式使途径限制型Smads无法与TβR-I结合并磷酸化，对TGF-β1信号传递起重要作用[2]。本实验将应用免疫组织化学技术检测88例宫颈癌中Smad7和TGF-β1的表达，探讨二者在肿瘤发生发展中的作用。

1 材料和方法

1.1 临床材料

收集宫颈癌手术后的存档的蜡块作为实验组，共88例，年龄26～65岁，平均43.2岁。患者术前均未进行任何治疗。同时选取因子宫肌瘤行全子宫切除术后的慢性宫颈炎的标本40例作为对照组。二组患者在年龄、病史等相关因素的比较中，差别无明显意义，具有可比性。

1.2 免疫组化方法检测Smad7和TGF-β1的检测应用免疫组织化学技术的S-P法。具体步聚：脱蜡，水化组织切片，3%H2O2去离子水孵育10分钟，以阻断内源性过氧化物酶；抗原修复后分别滴加一抗，室温37度孵育1～2小时或过夜，PBS冲洗，5分钟×3次；滴加生物素标记的二抗，室温37度孵育20分钟，PBS冲洗，5分钟×3次；滴加辣根酶标记链霉卵白素，室温37度孵育20～30分钟，PBS冲洗，5分钟×3次；应用DAB显色剂显色；自来水充分冲洗、复染、脱水、透明、封片。补给中的检测均由同一病理技师完成，并在显微镜下显色观察，严格质控。

1.3 结果判定方法

结果的判断均由二位病理主治医师共同阅片得出。Smad7和TGF-β1的阳性信号均为细胞质内棕黄色颗粒或棕黄色片状分布。合并计算高倍镜下(×400)随机选择的5个视野中阳性细胞占全部计数肿瘤细胞的百分率，平均每个视野细胞质呈阳性反应的细胞数≥10%为阳性，无明显阳性反应或阳性反应的细胞数＜10%为阴性。

1.4 统计学方法

数据分析采用卡方检验，所有统计数据均用SAS6.12软件分析完成，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Smad7和TGF-β1在二组中的表达

Smad7和TGF-β1在实验组中表达的阳性率明显高于对照组。见表1。

2.2 Smad7和TGF-β1的表达与宫颈癌临床病理特征的关系由表2可见，Smad7和TGF-β1表达的阳性率与宫颈癌的临床分期、宫颈管浸润长度及淋巴结转移密切相关。

2.3 宫颈癌中Smad7和TGF-β1表达的关系Smad7和TGF-β1在宫颈癌组织中的表达呈正相关(r=0.42, P＜0.05)。而在正常宫颈中Smad7和TGF-β1的表达未见相关性(P＞0.05)。

3 讨论

恶性肿瘤在体内发生发展是一个错综复杂的过程，受多种相关基因的调控[3]。TGF-β是一族结构和功能密切相关的活性多肽，广泛参与细胞的分化、增殖、形态改变、黏附、转移、细胞外基质产生及凋亡等。有研究认为TGF-β能引起小鼠成纤维细胞产生表型转化，在机体的免疫调节、细胞生长和分化、肿瘤免疫等方面起重要作用[4]。而且有观点认为TGF-β受体共同介导超家族成员的跨膜信号传导，胞内Smads信号则将信号从细胞表面受体传导到细胞核内部，完成转录过程[5]。当前在已发现8种Smad蛋白，从结构和功能上分为3个亚型：①受体调节型Smad，包括Smad1、2、3、5、8，作为TβRI激酶的底物，活化后入核，调节特异基因的表达。②共同介导的Smad，主要指Smad4，能与受体调节型相互作用，形成异聚体。③抑制性Smad包括Smad6、7，对前两种Smad介导的基因表达具有抑制作用[6]。还有学者认为Smad7是一种侯补癌基因[4]。有研究认为Smad7是TGF-β胞内信号转导的中心分子[7]，而TGF-β在抑制细胞增殖和肿瘤发生中起着重要的作用。赵倩等[8]认为Smad7和TGF-β1在子宫内膜异位症中的具有重要作用，具二者的表达具有负相关。而张勇等[9]认为Smad7和TGF-β1在鼻咽癌中的表达呈正相关，因此，关于二者的研究及相关性存在争议，尤其在宫颈癌中的作用，尚不明确。

表1 Smad7和TGF-β1在实验组与对照组中的表达

表2 Smad7和TGF-β1在实验组中不同临床病理特征中的表达

本实验应用免疫组织化学技术检测宫颈癌中Smad7和TGF-β1的表达，结果显示Smad7和TGF-β1的表达部位均定位于细胞质中，且宫颈癌中Smad7和TGF-β1的表达明显高于慢性宫颈炎组织，提示Smad7和TGF-β1参与了宫颈癌的发生发展。Smad7和TGF-β1与宫颈癌的临床分期、宫颈管浸润长度及淋巴结转移密切相关，提示Smad7和TGF-β1参与了宫颈癌的进展及淋巴道播散。由于临床分期及浸润转移与患者预后相关，因此，提示临床中对宫颈癌标本进行Smad7和TGF-β1的检测，可能对判断预后有重要价值。实验结果显示宫颈癌中Smad7和TGF-β1的表达具有正相关，提示Smad7和TGF-β1具有明显的协同作用。Smad7在TGF-β1诱导表达后，反过来直接与TGFβR结合形成稳定的复合物，并且具有与其他信息分子不同的调节作用[10]，是一种潜在的与癌发生相关的基因。TGF-β1与其相应受体、胞内信号转导分子Smad7共同组成了一个影响肿瘤形成和发展的通路，通路中任何一个组成元件发生紊乱，均可导致信号转导紊乱，影响其生物学效应。

总之，Smad7和TGF-β1在宫颈癌中高表达，且具有协同作用。实验结果也表明细胞转导的异常对宫颈癌的发生发展具有重要作用。

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Objective To detect the expressions of Smad7 and TGF-β1in cervical carcinoma, and investigate their relationship in different clinical characteristic of neoplasm. Methods The study included 88 cases of cervical carcinoma as experimental group and 40 cases of chronic cervicitis tissues as control group. We analyzed their expressions of Smad7 and TGF-β1in different pathological character by using the IHC. Results Comparisons of the primary tumors with cervical carcinoma and chronic cervicitis tissues showed that there were signif i cant high-regulation of Smad7 and TGF-β1(P＜0.05). The expressions of Smad7 and TGF-β1were associated with clinical stage, infiltration degree and lymph node metastasis(P＜0.05).There was positive correlationship between Smad7 and TGF-β1in cervical carcinoma(P＜0.05). Conclusion Smad7 and TGF-β1may promote the development of cervical carcinoma. The combined examination of Smad7 and TGF-β1may be helpful to predict the prognosis in patients with cervical carcinoma.

cervical carcinoma; Smad7; TGF-β1; IHC

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.21.055

272013 山东济宁医学院 (孟茜)274000 山东菏泽医学专科学校 (孟娟)