首乌神应丹成分质量鉴别

2010-04-13刘兴文

实用中医药杂志 2010年4期

关键词：残渣川芎斑点

梅娇,刘兴文

(重庆市北碚区中医院,重庆北碚 400700)

首乌神应丹为我院主任医师傅灿鋆经验方制成的中药制剂,由何首乌、熟地、川芎、白芍等组成,具有养血补肾、祛风生发功效,临床用于血虚风盛之脱发、头皮发痒、头屑多、病后及产后脱发、斑秃、全秃。为控制制剂的质量,我们对其质量进行了鉴别,总结如下。

1 试验材料

器材:显微镜(OLYMPUS),UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村光电仪器厂),硅胶 G板(预制板,青岛海洋化工厂分厂)。

药品与试剂:对照品、对照药材(购自北京药品生物制品检定所),试剂均为 AR(购自重庆化玻公司),首乌神应丹为本院制剂室提供。

2 显微鉴别

取本品粉末少许,置显微镜下观察。草酸钙簇晶散在,直径 10～80(160)μm。淀粉粒单粒类圆形,直径 4～5μm,脐点人字形、星形,大粒可见层纹,复粒由 2～9分粒组成。草酸钙簇晶存在于薄壁细胞中,含晶细胞类方形或长方形,纵列成行,有的一个细胞内含 2个或数个簇晶。草酸钙针晶成束存在于黏液细胞中、或散在,长 25～75(93)μm。韧皮薄壁细胞纺锤形,壁略厚,表面有极微细斜向交错纹理,有的可见菲薄的横隔。

3 薄层鉴别

何首乌的鉴别:取本品 8g,研细,加甲醇 20mL,冷浸过夜,滤过,滤液蒸干,加 5%氢氧化钠溶液 5mL使溶解,移入分液漏斗中,加盐酸酸化,用乙酸乙酯 10mL振摇提取,分取乙酸乙酯层,浓缩至 2mL,作为供试品溶液。另取何首乌对照药材2g,同法制成对照药材溶液。按处方量,取除何首乌以外的其余药材,按制剂工艺及供试品溶液的制备方法,制得缺何首乌的阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录 VIB)试验,吸取上述 3种溶液各 5μL,分别点于同一用0.5%氢氧化钠溶液制备的硅胶 G薄层板上,以甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸(15∶2∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的橙色荧光斑点;置氨蒸气中熏后,日光下检视,斑点变为红色。阴性对照液色谱相应的位置上不显示斑点。

川芎及当归的鉴别:取本品 4g,研细,加乙醚 15mL,超声处理 15min,滤过,滤液挥干,残渣加乙酸乙酯 1mL使溶解,作为供试品溶液。另取川芎对照药材和当归对照药材各 0.5g,分别加乙醚 15mL,同法制成川芎对照药材溶液和当归对照药材溶液。按处方量,取除川芎、当归以外的其余药材,按制剂工艺及供试品溶液的制备方法,制得缺川芎、当归的阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录 VIB)试验,吸取上述四种溶液各 3μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以正己烷 -乙酸乙酯(9∶1)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。阴性对照液色谱相应的位置上不显示斑点。

白芍的鉴别:取本品 20g,研细,加硅藻土 8g,研匀,加乙醇40mL,超声处理 20min,滤过,滤液蒸干,残渣加水 20mL使溶解,用乙醚提取至乙醚层无色,弃去乙醚液,水层用水饱和的正丁醇提取 3次,每次 20mL,合并正丁醇提取液,用水洗涤 3次,每次 15mL,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加乙醇 1mL使溶解,加少许中性氧化铝,水浴上拌匀干燥,装入预先装填好的中性氧化铝小柱(200～300目,1g,内径 10～15mm)顶部,以甲醇 40mL洗脱,收集洗脱液,蒸干。残渣加乙醇 1mL溶解,作为供试品溶液。另取芍药苷对照品,加乙醇制成每 1mL含1.5mg的溶液,作为对照品溶液。按处方量,取除白芍以外的其余药材,按制剂工艺及供试品溶液的制备方法,制得缺白芍的阴性对照溶液。照薄层色谱法(中国药典 2005年版一部附录 VIB)试验,吸取上述供试品溶液和阴性对照溶液各4μL、对照品溶液 3μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以三氯甲烷 -乙酸乙酯 -甲醇 -甲酸(40∶5∶10∶0.2)为展开剂 ,展开,取出,晾干。喷以 5%香草醛硫酸溶液,在 110℃加热至斑点清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性对照液色谱相应的位置上不显示斑点。

天麻的鉴别:取本品 8g,研细,加 75%乙醇 20mL,超声处理 30min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇 2m L使溶解,作为供试品溶液。另取天麻素对照品,加甲醇制成每 1mL含 1mg的溶液,作为对照品溶液。按处方量,取除天麻以外的其余药材,按制剂工艺及供试品溶液的制备方法,制得缺天麻的阴性对照溶液。照薄层色谱法试验[1],吸取上述 3种溶液各 3～5μL,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以三氯甲烷 -甲醇(7∶3)为展开剂,展开,取出,晾干。喷以 10%磷钼酸乙醇溶液,在 105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性对照液色谱相应的位置上不显示斑点。

熟地的鉴别:取本品 15g,研细,加甲醇 100mL回流提取2h,回收甲醇后残渣加水 10mL溶解,用正丁醇提取 3次,每次10mL,合并正丁醇液,水浴挥干,残渣加水 5mL溶解,滤过,滤液加至预先装填好的活性炭柱(200～300目,10g,内径 10～15mm)的顶部,先以水 200mL洗脱,再以 5%乙醇 150mL洗脱,最后用 20%乙醇 80mL洗脱,收集 20%乙醇洗脱液,浓缩至 1mL,作为供试品溶液。另取熟地对照药材 1g,同法制成对照药材溶液。按处方量,取除熟地以外的其余药材,按制剂工艺及供试品溶液的制备方法,制得缺熟地的阴性对照溶液。吸取上述 3种溶液各 20μl,分别点于同一硅胶 G薄层板上,以醋酸乙酯 -甲乙酮 -甲酸 -水(5∶3∶1∶1)为展开剂,展开,取出,晾干。喷以 1%香草醛乙醇溶液及 3%过氯酸水溶液的等量混合溶液。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性对照液色谱相应的位置上不显示斑点。