BactoScan 8000S在原料奶细菌总数快速检测中的应用

2010-04-13赵泽民徐亚麦李洪奎王力黑龙江龙丹乳业科技股份有限公司

中国乳业 2010年3期

■ 赵泽民徐亚麦李洪奎王力黑龙江龙丹乳业科技股份有限公司

原料奶生产和运输的过程中，不可避免地会被空气、容器、乳房本身、挤奶人员、工具以及牛舍中的粪便和草料等中的微生物污染，从而影响原料奶的酸度、粘度、气味、游离脂肪酸含量及保存期。如何才能迅速、准确判断出原料奶的卫生质量，是所有乳品企业和奶农最关心的问题。本文从国内外乳品企业最常用的微生物检测方法比较入手，重点介绍了BactoScan 8000S仪器的工作原理、检测过程、数据分析等，并论述了使用这种仪器对成品质量控制的重要意义。

▲ BactoScan 8000S仪器

表1 常用菌落总数测定方法

1 现有测定方法比较

常用菌落总数测定方法如表1所示。

由该表可以看出，国标方法和美兰试验检测周期较长，不适合企业快速了解原料奶质量；显微镜计数法是通过对原料奶进行涂片、染色，然后进行显微镜观察计数的，该方法方便、快捷，但不适用于企业大批量检验；BactoScan 8000S仪器测定方法的原理是显微镜计数方法，但它的染色及计数过程都是由仪器自动完成，适合企业大批量检验，并且可以在收奶现场快速完成测定，为生产部门快速完成所需奶质的筛选。

尤其要提到的是，BactoScan 8000S仪器测定方法和显微镜计数方法的计数结果是按单个细菌计数的，即它的计数结果既包含活的菌体，也包含死亡的菌体。而国标平板方法的计数结果是按菌落计数的（每个菌落不一定是一个菌体，可能包含若干个菌体）；同时，由于该测定方法所规定的培养条件下生长的仅是一部分或一群能在营养琼脂上生长发育的、适中温性需氧细菌，一些对营养和生长条件较为苛刻的或活力较弱不能在固体培养基上发育的细胞不能被检出。因此，BactoScan 8000S仪器的计数结果更加准确，对于控制原料奶质量具有重要的实际意义。

2 BactoScan 8000S仪器测定原理

样品从吸管吸入，进入混合室，同时梯度液（Gradient）、酶液（Enzy）、冲洗液（Lying）也进入混合室，经混合后进入离心室。在3种药液的作用下，经过高速离心，使细菌沉淀下来，其余部分直接进入孵化器底部后再传到废液桶。细菌沉淀下来的部分再经由过滤器过滤，之后进入孵化器的每一个小瓶中，同时染色剂（Dye）也从其固定容器室传至每一个小样瓶中，同样品一起倒入孵化器中的漏斗中。然后从漏斗中的吸管吸出，直线传至显微镜下的转盘上，光束的脉冲被转换成电子脉冲，然后统计计数，并显示在电脑的屏幕上。

3 检测过程

3.1 检测条件及所需材料

测量对象：原料奶；测量温度：2～42℃；测量速度：80个样/h；试剂：稀释液粉（Lysing Powder），缓冲液粉（Buffer Powder），梯度液母液（Gradient Stock Solution），染色液（Enzyme Stock Solution），乳化剂（BSC 8000 Emulsifier），清洁剂（BSC 8000 Detergent），酶剂母液（Staining Medium Stock solution）。

表2 原料奶细菌数量检验情况

表3 原料奶投入生产后成品（奶粉产品）菌落总数测定情况

3.2 操作步骤

样品分析前需要摇匀或预热，使用一个空白样品来清除悬浮液样品的遗留物，然后测试4个空白样品，所有的测试结果必须低于20，并且平均值低于10。空白数值符合要求后将准备检测的样品放在传送带右边，在电脑上设定做样批次、数量，然后按自动测量按钮，机器就自动做样了。

4 结果与讨论

表2～3列出了采用国标法和BactoScan 8000S仪器法检测原料奶细菌数量的对比情况，及根据不同指标的原料奶配料后成品的微生物指标情况。

总体来看，BactoScan 8000S仪器测定的结果比国标平板法的数值高一个数量级，这主要是因为BactoScan 8000S仪器测定的计数结果是按单个细菌计数的，其中还包含死去的菌体。千万不要小看这些死去的菌体，他们产生的酶类在适当的条件下可能被激活，酶的存在可使产品中的营养成分发生分解，产生不良的气味和口感，影响产品的品质。

检测过程中发现，BactoScan 8000S仪器测定结果好于国标平板法，它更能反应出原料奶的卫生状况和新鲜程度。3号原料奶的平板测定结果好于5号原料奶，但通过BactoScan 8000S检测的结果却是趋于一致的，而最终在成品粉上也反应出结果的一致性。这说明3号原料奶中存在部分衰亡的菌体，国标平板法未能完全检出。

另外，由于BactoScan 8000S仪器测定结果包含活力较弱或死亡的细菌，所以该方法仅限于原料奶的检测，而不适用于乳制品成品的检验。