黑骨藤追风活络胶囊质量控制的研究

2010-02-10耿亚马永明

中外医疗 2010年21期

耿亚马永明

（漯河医学高等专科学校第二附属医院河南漯河 462002）

黑骨藤追风活络胶囊是根据苗族医药理论,选取苗族治疗风湿病的经典药材,按现代制药技术制成的苗药。本试验采用薄层色谱法对处方中的青风藤、黑骨藤、追风伞进行定性鉴别,用高效液相色谱(HPLC)法测定胶囊中青藤碱的含量。

1 临床资料

Agilent1100高效液相色谱仪、G2170AA色谱工作站(美国安捷伦公司)、黑骨藤追风活络胶囊（贵州老来福药厂生产）、青藤碱对照品(成都曼思特生物科技有限公司),槲皮素（中国药品生物制品检定）追风伞对照药材由贵州大学生化所提供，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 定性

2.1.1 黑骨藤的鉴别取本品内容物10g，研细，加氯仿超声辅助提取1h,滤过，滤液挥干，加甲醇10mL超声波催溶，为供试品溶液；另取黑骨藤对照药材5g研细，50mL氯仿提取，滤液蒸干，残渣加甲醇10mL使溶解，作为对照药材溶液;再取槲皮素2g,加甲醇10mL，催溶，得对照品溶液；阴性样品对照(除黑骨藤外,其他药材按比例进行提取)溶液。

2.1.2 青风藤的鉴定取本品内容物10g,研细，pH为5.7盐酸水溶液提取2h,氨水调pH8.1,离心，沉淀物氯仿萃取，过滤，滤液挥干，加10mL甲醇催溶，为供试品溶液;另取青风藤10g，研细，参照上述方法，得对照药材溶液；另取青藤碱2g溶解于10mL的甲醇中作为对照品溶液，阴性样品对照(除青风藤外,其他药材按比例进行提取)溶液。毛细管吸取上述3种溶液各2μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-甲酸甲酯(18∶5)为展开剂,展开,晾干,碘化铋钾显色。供试品与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰，Rf为0.65、0.64、0.64。

2.1.3 追风伞鉴定取本品内容物10g,研细，加甲醇超声辅助提取2h,过滤，为供试品溶液，另取追风伞10g，研细，参照上述方法，得对照药材溶液；阴性样品对照(除追风伞外,其他药材按比例进行提取)溶液。毛细管吸取上述3种溶液各2μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲醇-醋酸-水(10:5:2)为展开剂,展开,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰。

2.2 含量测定

2.2.1 青藤碱色谱柱：Agilent C18柱（150mm×4.6mm5μm），流动相：乙腈-水-三乙胺(21:79:0.05)，检测波长为262nm[1]，流速1.0mL/min，柱温30℃，进样量：20μL。

2.2.2 线性范围试验分别吸取青藤碱溶液0.1,1.5,2.5,3.5,4.5mL,分别置于5mL量瓶中,加70%甲醇稀释至刻度,分别精密吸取该对照品溶液20μL,按“2.2.1”项下色谱条件进样,测定青藤碱峰面积,以浓度峰面积(Y)对(X)作线性回归,得回归方Y=3907423X-78229（r=0.9998)。青藤碱在2～90μg.mL-1范围内呈良好的线性关系。

2.2.3 稳定性试验取青藤碱供试品溶液20μL,按照2.1.2项下条件在(2、8、14、20、24)h时进行测定，以考察其稳定性，结果RSD值为2.32%表明青藤碱在24h内稳定。

2.2.4 精密度试验对照品溶液20μL注入液相色谱，重复5次,结果测定峰面积积分值得RSD值为1.33%，表明仪器精密度良好。

2.2.5 重现性试验取同一批样品,按2.1.2项下方法平行制备5份供试品溶液,测定测得峰面积，计算其含量,平均RSD值为1.73%，表明该方法重现性良好。

2.2.6 加样回收率试验取已知含量的样品5份,准确称定各1.0g,加入不同剂量青藤碱对照品，按上述方法制备，参照2.2.1项下条件测定其含量并计算回收率,结果平均回收率99.25%，RSD1.27%。

2.2.7 样品测定对3批样品依“2.2.1”项下方法制备供试液,按外标法测定含量,测定三次，含量分别为（0.2873、0.2871、0.2891）mg.mL-1平均含量0.2878mg.mL-1,平均RSD1.27%。