水蔓菁滴丸的制备工艺和质量评价研究

刁海鹏， 杜 艳， 孙体健， 牛栓成

(山西医科大学，山西太原030001)

水蔓菁为玄参科细叶婆婆纳属水蔓菁(Veronica linariifolia)全草入药(应具体说明其药用部位)，具有清热解毒、利尿、止咳化痰等作用［1］。主要化学成分为芹黄素、木犀草素苷等黄酮类化合物［2］，现水蔓菁已有制成片剂，临床用于治疗慢性气管炎、肺化脓症、咳吐脓血、急性肾炎、尿路感染等疾病［3］。为满足临床用药的需要，本课题组对水蔓菁药材中的黄酮类有效成分进行提取并富集，制备成止咳滴丸，同时对制备过程中影响滴丸成型的多种因素进行考察，优化工艺条件，并对制成的滴丸质量进行评价。

1 仪器与试药

仪器:旋转蒸发仪:RE－52－98型(上海亚荣仪器公司);真空干燥箱:DEG－402型(天津天宇技术实业有限公司);超声波清洗仪:KQ－100型(昆山市超声仪器有限公司);760CRT双光束紫外－可见分光光度计(上海精密分析仪器厂)。

材料与试剂:PEG 4000、PEG 6000(AR，天津基准化学试剂有限公司);甲基硅油、液状石蜡等均为药用规格;大孔吸附树脂HPD600购自南开大学;芦丁对照品(中国药品生物制品检定所 批号:1521－200401);水蔓菁药材，经山西省药检所鉴定为细叶婆婆纳属水蔓菁，产自山西省万荣县。

2 方法与结果

2.1 水蔓菁浸膏的制备

2.1.1 水蔓菁药材的提取

水蔓菁药材中最主要的有效成分是黄酮类化合物，通过单因素考察，水蔓菁提取工艺中主要的影响因素有:加水量、提取时间和提取次数，故以水蔓菁药材提取液中总黄酮含量为指标，以三因素三水平的L9(34)正交试验设计，来考察最佳提取工艺。

将水蔓菁药材粉碎，过20目筛，称取粗粉20 g，加水煎煮，按照表1、表2设计内容进行操作。将提取液过滤，减压浓缩，测其总黄酮含量［4］，结果见表 2、表 3。

表1 水蔓菁总黄酮水提取方法正交试验考察因素水平

试验结果表明，只有提取次数对水蔓菁中总黄酮含量有显著性影响，确定提取次数为3次;根据总黄酮含量直观分析表明，影响因素差别为:D＞B＞A，最后工艺为A2B2D3，即10倍量水，回流提取3次，每次1 h。

表2 提取工艺正交实验安排及结果

表3 药材总黄酮含量方差分析

2.1.2 水蔓菁提取物的纯化 将水蔓菁药材粉碎，过20目筛，称取300 g，加10倍量水煎煮3次，每次1 h，过滤，合并滤液减压浓缩药液比至1∶8(g/mL)，作为上样溶液。取处理好的大孔吸附树脂HPD600湿法装柱，使其径高比为1∶10，以1.5倍柱体积/小时的速度上样，同时用FeCl3溶液验漏，至变成墨绿色;然后用2倍柱体积的水洗，流速为2倍柱体积/小时，洗脱液弃取;然后用4倍柱体积的50%乙醇洗脱，流速为2倍柱体积/小时，收集洗脱液，浓缩，真空干燥得浸膏，研细，过80目筛，即得水蔓菁浸膏粉末，平均出粉率为31.4%，总黄酮含量按芦丁折算为20.66%。

2.2 水蔓菁止咳滴丸成型工艺考察［5，6］

2.2.1 水蔓菁滴丸基质种类的确定 本试验考察了水蔓菁浸膏粉末与不同基质混合后的成型情况。取适量2.1.2项下制得的浸膏粉末，称取PEG4000、PEG 6000各3 g，分别置50 mL小烧杯中，80℃水浴加热，熔化后加入浸膏，搅拌均匀后，80℃保温，滴头口径为3.0/4.0 mm，滴距6 cm，以20 d/min速度滴入0～5℃的液体石蜡中，冷凝液长为15 cm。

试验结果表明:PEG6000本身黏度较大，熔融温度偏高，熔融液颜色深，滴制时不宜成形，制成的滴丸大小不均匀，丸重差异大，圆整度不好，而且制成的滴丸溶散时间为8.4 min。而浸膏与PEG4000融合性好，药液稠度适宜，易于滴制，制成的滴丸溶散时间短，故水蔓菁滴丸的基质选择用PEG4000。

2.2.2 冷凝剂的确定 根据水蔓菁浸膏为水溶性物质，制备滴丸时应选择油溶性冷凝剂，因植物油稳定性较差，故选择液体石蜡和甲基硅油，通过实验确定冷凝剂的种类。取适量2.1.2项下制得的浸膏粉末，按1∶3加入在80℃熔化的PEG4000中，搅拌均匀后，分别滴入液体石蜡、甲基硅油中，其它滴制条件不变。

试验结果表明:使用液体石蜡为冷凝剂时水蔓菁滴丸下降太快，形成子母丸，滴丸产生拖尾，丸的大小不均匀，圆整度低;而使用甲基硅油为冷凝剂，滴丸下降速度慢，丸形圆整度高，故确定甲基硅油为冷凝剂。

2.3 水蔓菁滴丸制备条件的优化

水蔓菁滴丸的制备:本课题组选择常用的水溶性基质PEG4000，冷凝剂为甲基硅油，并通过单因素试验，确定滴头内外径为3.0/4.0 mm，冷凝剂温度为0～5℃，滴距为6 cm，以丸重差异、溶散时限和外观质量为指标，对熔融温度(A)、滴速(B)、冷凝液高度(C)、保温温度(D)按正交设计L9(34)表做四因素三水平试验，试验设计见表4，试验结果见表 5，表 6。

表4 水蔓菁滴丸正交试验因素水平

表6的丸重差异方差分析数据表明，各因素对丸重差异系数的影响没有显著性差异。各因素对丸重差异的影响大小顺序为:B＞D＞C＞A，最优组合为A1B3C3D3，即药液熔融温度为80℃，保温温度为85℃，滴速为40 d/min，冷凝液高度为35 cm。

2.4 水蔓菁止咳滴丸质量评价［7］

2.4.1 3批样品重复性试验 按确定的处方制备3批水蔓菁止咳滴丸，进行外观评价和溶出度测定，结果见表7。

结果表明，批次之间滴丸外观和体外药物的溶出无明显差异，设计与优化结果是可靠的。

2.4.2 稳定性试验 药物制剂的基本要求是安全、有效、稳定，药物制剂稳定性对保证制剂安全有效是非常重要的。滴丸作为一种固体分散体剂型，其主要缺点是药物分散状态的稳定性不高，久贮易产生老化现象。

针对中药滴丸的特点，设计以下实验进行加速试验:在温度(30±2)℃、相对湿度60%±5%的条件下放置3个月，在试验期间第0，1，2，3个月取样，进行外观、含量考察，结果见表8;采用不带外包装，在照度3600Lx的光照条件下放置10天，于第0，5，10天取样，进行外观、总黄酮含量考察。结果见表9。

表5 水蔓菁滴丸正交试验结果(n=6)

表6 水蔓菁滴丸丸重差异方差分析

表7 3批样品重复性试验结果

表8 水蔓菁滴丸高温和高湿下的外观和含量

表9 水蔓菁滴丸强光下的外观和含量

结果表明，水蔓菁止咳滴丸在温度和湿度加速试验条件下，色泽、硬度等外观保持良好，含量稳定;在光照加速试验条件下，外观、含量均无明显变化。说明制备的水蔓菁滴丸在此试验条件下比较稳定。

3 讨论

本实验从影响滴丸的丸重差异系数、溶散时限和外观质量为评价指标考察了各因素的影响，确立制备水蔓菁滴丸的最佳条件为:基质为PEG4000，冷凝剂为甲基硅油，滴头内外径为3.0/4.0 mm，冷凝剂温度为0～5℃，滴距为6 cm，药液熔融温度为80℃，保温温度为85℃，滴速为40 d/min，冷凝液高度为35 cm。

本课题组对水蔓菁滴丸质量从重现性、稳定性两方面进行评价，该滴丸重现性良好，在高温、高湿环境下三个月内、强光下10 d内滴丸外观不变，其总黄酮含量基本保持不变，但其有效期的确定还有待通过加速试验和长期试验继续加以探讨。

通过上述工艺条件确定的滴丸成型度好，所制滴丸符合《中国药典》(2005版)滴丸质量标准。

［1］江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海:上海科技出版社，1986:1032.

［2］马翠英.水蔓菁中黄酮类化合物的研究［J］.药学学报，1991.26(3).203－208.

［3］杨丁铭，朱开贤.水蔓菁的化学成分研究(Ⅱ)［J］.中草药，1991.(22).2－3.

［4］杨荣平，李 琳.紫外分光光度法测定补骨脂中总黄酮含量［J］.中国药业，2007，16(1):22－23.

［5］姜 泓，孟 舒，陈再兴.妇康滴丸的制备与质量控制［J］.中成药，2009，31(5):813－815.

［6］刘华亮，袁 珂，朱建鑫，等.枸杞子滴丸成型工艺的研究［J］.时珍国医国药，2009.20(3):601－602.

［7］中国药典［S］.二部.2005:附录IK.