血清乳酸脱氢酶及其同工酶在复治多发性骨髓瘤中的临床意义

林娜，于锦香，李艳，高峰，王柏勋

（中国医科大学 附属第一医院血液内科，沈阳 110001）

血清乳酸脱氢酶及其同工酶在复治多发性骨髓瘤中的临床意义

林娜，于锦香，李艳，高峰，王柏勋

（中国医科大学 附属第一医院血液内科，沈阳 110001）

目的 研究血清乳酸脱氢酶（LDH）及其同工酶，M，H亚单位值在复治多发性骨髓瘤（MM）中的临床意义。方法 收集复治多发性骨髓瘤患者141例随访资料，分析LDH及其同工酶、亚单位与DS分期、ISS分期、肌酐、骨髓浆细胞数，免疫球蛋白，β2微球蛋白等的关系。结果 血清总LDH与DS分期、ISS分期均未见显著联系。LDH1百分比与ISS分期呈显著负相关（P<0.01），LDH4百分比与ISS分期呈显著正相关（P<0.05）。骨髓瘤肾病肾功能不全患者LDH值及LDH4绝对值，H亚单位值与肌酐呈显著正相关（P<0.05）。LDH5百分比及绝对值与骨髓浆细胞数呈显著负相关（P<0.01，P<0.05）。结论 对于复治复发性骨髓瘤患者，血清LDH同工酶与ISS分期及肾功损害的程度密切相关，LDH同工酶测定比总LDH活性更具有临床价值。

乳酸脱氢酶；同工酶；多发性骨髓瘤

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）是一种糖酵解酶，催化乳酸至丙酮酸的可逆性转换，广泛分布于各种组织及人体肿瘤组织。LDH为四聚体，由M型和H型两种亚基组成，根据其亚基组成及电泳结果分 5个亚型：LDH1（H4），LDH2（H3M），LDH3（H2M2），LDH4（HM3），LDH5（M4）。M型催化丙酮酸转化为乳酸，进行无氧酵解，主要存在于经常供氧不足的组织如肌肉；H型催化乳酸转化为丙酮酸，进入三羧酸循环，主要存在于供氧丰富的组织如心脏。因此，在缺氧、贫血等情况下及多种恶性肿瘤中，常伴有M型比例的升高和LDH5的升高［1，2］。而LDH在肾脏中含量极为丰富，因此在肾脏疾病中也多伴有LDH及其同工酶谱的改变［3］。

多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是一种难治的B细胞恶性克隆性疾病。90%以上患者在病程中出现程度不一的贫血，肾脏病变也是该病常见且具特征性的临床表现［4］，因此推测MM患者可能会伴有LDH及其同工酶谱的改变。

LDH目前已经作为MM国际预后评价的重要指标之一。但对于LDH同工酶在MM中的意义，尚缺乏大样本的研究，尤其是对LDH在MM患者治疗过程中，即对复治患者的临床意义，尚未见报道。本文针对复治的141例MM患者随访资料进行分析，以期揭示LDH及其同工酶百分比、绝对值及M亚单位，H亚单位值的临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料

收集2001年5月至2008年10月，于中国医科大学附属第一医院就诊的复治多发性骨髓瘤患者141例随访资料，其中男65例，女76例；年龄42～79岁，平均年龄男（60±10.9）岁，女（59±7.9）岁。IgG型75例，IgA型22例，轻链型及其他或未分类的44例。诊断标准按张之南主编《血液病诊断及疗效标准》［5］。根据临床资料，按照 DS（Durie-Salmon）分期法［6］，ISS（International Staging System）分期法［7］进行临床分期。

1.2 检测指标及方法

清晨空腹抽静脉血，常规处理，待测。LDH同工酶，免疫固定电泳采用美国HELENA型全自动电泳仪，LDH、血清钙（calcium，Ca）和肌酐（creatinine，Cr）、尿酸、白蛋白检测用HITACHI日立7600全自动生化分析仪，免疫球蛋白、C反应蛋白（Creactive protein，CRP）采用 Beckman-Coulter Image双光径免疫浊度分析仪，β2微球蛋白（β2-microglobulin，β2M）采用美国ABBOTTAXSYM全自动免疫分析仪，血红蛋白采用XE-2100血液分析仪。

按常规取病人骨髓和周围血制片，用瑞士吉姆萨染色，Olympus光学显微镜油镜下分析浆细胞形态并计算骨髓浆细胞百分比（bone marrow plasma cell percentage，BMPC）。

1.3 统计学分析

相关性分析应用非参数统计Spearman检验，不同组别间的差异应用独立样本t检验。P<0.05为有统计学意义。本研究中，M，H亚单位值分别等于各同工酶绝对值乘以对应亚单位构成比之和，即M值=LDH1×0/4+LDH2×1/4+LDH3×2/4+LDH4×3/4+LDH5×4/4；H值=LDH1×4/4+LDH2×3/4+LDH3×2/4+LDH4×1/4+LDH5×0/4。

2 结果

2.1 LDH及同工酶、亚单位与ISS分期的关系

相关性分析显示LDH1百分比与ISS分期呈显著负相关（r=-0.294；P<0.01），LDH4百分比与 ISS分期呈显著正相关（r=0.247；P<0.05）。

ISS各期LDH及其同工酶绝对值、百分比、亚单位情况如表1，2所示。Ⅰ期，Ⅱ期和Ⅲ期血清总LDH活性无显著差异。与Ⅰ期相比，Ⅱ期的LDH1和LDH2百分比显著下降，而LDH3和LDH4百分比显著上升；Ⅲ期的LDH4百分比及绝对值均显著增加。Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期中，Ⅱ期的LDH1、LDH2绝对值，H亚单位值显著降低，与Ⅰ期和Ⅲ期相比，均有统计学意义。

表1复治多发性骨髓瘤患者ISS不同分期LDH值及其同工酶绝对值、亚单位值（±s）Ta b.1LDHa n d i t s i s o e n z y me v a l u e s，s u b u n i t s i n r e t r e a t e d p a t i e n t s w i t h mu l t i p l e my e l o ma d i v i d e d b y ISSs t a g i n g s y s t e m（±s）StagenLDH（U/L）LDH1（U/L）LDH2（U/L）LDH3（U/L）LDH4（U/L）LDH5（U/L）M-subunit（U/L）H-subunit（U/L）Ⅰ 26 172.2±52 41.0±16 58.5±16 38.8±12 16.3±6 17.7±7 63.9±20 108.3±34Ⅱ 31 165.8±61 30.5±121） 49.6±212） 37.5±18 17.5±12 20.0±15 64.3±36 90.8±382）Ⅲ 43 195.1±83 40.3±133） 66.0±324） 46.6±27 21.0±122） 21.8±10 77.3±36 118.3±504）1）P<0.01compared with group stage I；2）P<0.05compared with group stage I；3）P<0.01compared with group stageⅡ；4）P<0.05compared with group stageⅡ .

表2复治多发性骨髓瘤患者ISS不同分期LDH值及其同工酶百分比（±s）Ta b.2LDHa n d i t s i s o e n z y me p e r c e n t a g e i n r e t r e a t e d p a t i e n t s w i t h mu l t i p l e my e l o ma d i v i d e d b y ISSs t a g i n g s y s t e m（±s）Stage n LDH（U/L） LDH1% LDH2% LDH3% LDH4% LDH5%Ⅰ 26 172.2±52 23.6±4 34.2±3 22.5±2 9.3±2 10.5±3Ⅱ 31 165.8±61 20.5±41） 32.2±41） 24.1±31） 10.8±21） 12.4±5Ⅲ 43 195.1±83 21.5±5 33.3±4 23.2±3 10.6±22） 11.6±41）P<0.01compared with group stage I；2）P<0.05compared with group stage I.

2.2 LDH及同工酶、亚单位与DS分期的关系

相关性分析LDH及其同工酶百分比、绝对值、亚单位与DS分期间均未见显著相关关系。

不同DS分期比较，LDH及其分数，M亚单位值，H亚单位值亦未见明显差异（数据未列出）。

2.3 LDH及其同工酶、亚单位与血清肌酐（Cr）的关系

对于所有患者相关性分析显示，LDH及同工酶、亚单位与血清Cr之间均未见显著相关关系。

将患者分为肾功能不全组（Cr≥133μmol/L）和肾功能正常组（Cr<133μmol/L），对肾功能不全组患者（n=31）相关性分析显示，LDH及 LDH1，2，3，4绝对值、H亚单位值均与血清Cr呈显著正相关（P<0.05），但LDH同工酶百分比与血清Cr未见显著相关关系（数据未列出）。

对血清肌酐（Cr）与ISS分期进行相关性分析显示 Cr与 ISS分期显著相关（r=0.539，P<0.001）。ISS分期Ⅲ期患者Cr均值为（248.4±153），与Ⅰ，Ⅱ期比较显著升高（P<0.01）。Ⅰ，Ⅱ期Cr均值分别为（75.7±73），（82.6±55）。

2.4 LDH及其同工酶、亚单位与骨髓浆细胞百分比的关系

骨髓浆细胞百分比（BMPC）即骨髓原始、幼稚及成熟浆细胞百分比的总和，相关分析显示，LDH5百分比（P<0.01）及绝对值（P<0.05）与骨髓浆细胞百分比均呈显著负相关（数据未列出）。

2.5 LDH及其同工酶与其他预后指标的关系

LDH及其同工酶百分比与其他主要预后指标包括年龄（Age）、免疫球蛋白（IgG）（对于 IgG型患者）、血红蛋白（hemoglobin，Hb）、血小板（platelet，PLT）、总蛋白（total protein，TP）、β2M、尿酸（uric acid，UA）、阴离子间隙（anion gap，AG）的关系如表 3所示。可见，血清总LDH仅与PLT及TP有相关关系，余均未见显著相关关系。LDH1百分比与IgG，PLT，TP，β2M呈显著负相关，LDH2百分比与 PLT，TP，UA呈显著负相关，LDH3百分比与 Age，IgG，Hb，PLT，TP，β2M均呈显著正相关，与 AG呈显著负相关，LDH4百分比与IgG，PLT，β2M呈显著正相关，LDH5百分比与Age呈显著负相关，与TP呈显著正相关。

表3LDH及其同工酶百分比与其他临床指标的关系Ta b.3Co r r e l a t i o n b e t w e e n LDHa n d i t s i s o e n z y me p e r c e n t a g e s w i t h o t h e r c l i n i c a l p a r a me t e r s Prognostic indicator n LDH LDH1% LDH2% LDH3% LDH4% LDH5%Age 141 0.12 0.023 -0.063 0.2062） -0.029 -0.1902）IgG 75 -0.211 -0.3771） -0.224 0.5061） 0.2702） -0.089Hb 141 0.059 0.078 -0.019 0.2032） -0.092 -0.132PLT 141 0.2062） -0.2271） -0.2301） 0.3221） 0.1712） 0.017TP 141 -0.3571） -0.1962） -0.1812） 0.1842） 0.056 0.2401）β2M 141 0.039 -0.2532） -0.132 0.2012） 0.2312） 0.030UA 141 0.131 -0.117 -0.3292） -0.004 0.261 0.198AG 141 0.035 0.099 -0.140 -0.2372） 0.007 0.113Values shown are the correlation coefficient，1）P<0.01；2）P<0.05

3 讨论

造血系统恶性肿瘤血清LDH常常升高，且已作为非霍奇金淋巴瘤（NHL）和多发性骨髓瘤（MM）的预后因子，其增高多提示预后较差，已有报道非霍奇金淋巴瘤［8］及慢性骨髓增殖性疾病［9］LDH同工酶谱具有特征性的改变，但关于MM患者LDH同工酶改变情况，尚缺乏大样本研究。Copur等［10］对19例MM患者（10名初治，9名复治）研究发现，MM患者血清总LDH与临床分期（DS分期）无关，LDH1，LDH2百分比多下降，LDH3百分比多增高，可能与疾病进展相关。Bouafia等［11］对13例MM患者的LDH同工酶研究发现LDH2，LDH3值多增高。

本研究对141例复治MM患者随访资料分析发现，尽管LDH同工酶与DS分期未见显著相关关系，但是LDH1%与ISS分期呈显著负相关，LDH4%与ISS分期呈显著正相关，且ISS不同分期LDH同工酶谱呈现特征性的改变，但血清总LDH与ISS分期，DS分期均未见显著相关关系。因此，我们认为相对于总LDH，血清LDH同工酶测定，对复治MM的预后判定意义更大。这可能与恶性肿瘤贫血时，机体为了耐受供氧相对不足的条件，M型比例上调相关。

LDH在肾脏含量丰富，尤以肾小管含量最高，以LDH1，LDH2为主。在许多肾脏疾病中，存在LDH及其同工酶的改变，但对骨髓瘤肾病所致肾功能不全患者，血清LDH及其同工酶谱情况目前尚无报道。Adam等［12］研究认为骨髓瘤肾病大多是由于轻链在髓袢远端沉积，随后小管破坏，间质纤维化而引起。但本研究发现，肾功能不全患者，LDH值，LDH1～4绝对值和H亚单位值与Cr呈显著正相关，而LDH1，LDH2百分比与Cr未见显著相关关系，说明骨髓瘤肾病所致肾功能不全患者，血清LDH的增高，并非主要由于肾小管内LDH释放入血所引起，而是通过某种机制，造成H亚单位合成增加，含有H亚单位的LDH普遍增高所致。具体机制还需要进一步研究。此外，本研究还证明ISSⅢ期患者Cr显著升高，这种骨髓瘤肾病所致的LDH1，LDH2绝对值的显著增高一定程度上掩盖了骨髓瘤基础疾病所致的LDH1，LDH2绝对值下降，因而表现出ISSⅢ期患者LDH1，LDH2绝对值较Ⅱ期增高的现象。这种LDH1，LDH2绝对值正常的假象临床需要注意鉴别。

骨髓穿刺浆细胞计数，对骨髓瘤诊断具有重要意义，也用来评估肿瘤负荷及病情进展［13］。本研究发现，骨髓浆细胞百分比与LDH5百分比及绝对值呈显著负相关，进一步研究其机制，或许可能为临床瘤负荷的评估，提供一项简便实用的手段。

总之，对于复治MM患者，血清LDH同工酶与骨髓瘤肾病，临床分期，病情严重程度均有一定相关关系，比血清总LDH活性更具有临床价值。

［1］Kolev Y，Uetake H，Takagi Y，et al.Lactate dehydrogenase-5（LDH-5）expression in human gastric cancer：association with hypoxia-inducible factor （HIF-1alpha）pathway，angiogenic factors production and poor prognosis［J］.Ann Surg Oncol，2008，15（8）：2336-2344.

［2］Kotyza J，Havel D，Kulda V，et al.Differentiated expression of the lactate dehydrogenase subunit Min pleural fluids of neoplastic aetiology［J］.Scand JClin Lab Invest，2009，69（1）：73-78.

［3］Mohás M，Szigeti N，Markó L，et al.Serum total LDHactivity and LDH-2isozyme in nephrotic syndrome［J］.Kidney Blood Press Res，2008，31（1）：47-54.

［4］Adam Z，Pour L，Krejcí M，et al.Kidney damage in multiple myeloma and other monoclonal gammopathies ［J］.Vnitr Lek，2008，54（9）：847-861.

［5］张之南，沈悌.血液病诊断及疗效标准［M］.2版.北京：科学出版社，1998：373-380.

［6］Durie Bg，Salmon Se.Aclinical staging system for multiple myeloma.Correlation of measured myeloma cell mass with presenting clinical features，response to treatment，and survival. ［J］.Cancer，1975，36（3）：842-854.

［7］Greipp PR，San Miguel J，Durie BG，et al.International staging system for multiple myeloma［J］.JClin Oncol，2005，23（15）：3412-3420.

［8］Dumontet C，Drai J，Bienvenu J，et al.Profiles and prognostic values of LDHisoenzymes in patients with non-Hodgkin’s Lymphoma［J］.Leukemia，1999，13（5）：811-817.

［9］Mazzotta S，Guerranti R，Gozzetti A，et al.Increased serum lactate dehydrogenase isoenzymes in Ph-negative chronic myeloproliferative diseases：Ametabolic adaptation? ［J］.Hematology，2006，11（4）：239-244.

［10］Copur S，Kus S，Kars A，et al.Lactate dehydrogenase and its isoenzymes in serum from patients with multiple myeloma ［J］.Clin Chem，1989，35（9）：1968-1970.

［11］Bouafia F，Drai J，Bienvenu J，et al.Profiles and prognostic values of serum LDHisoenzymes in patients with haematopoietic malignancies［J］.Bull Cancer，2004，91（7-8）：E229-E240.

［12］Adam Z，Pour L，Krejcí M，et al.Kidney damage in multiple myeloma and other monoclonal gammopathies ［J］.Vnitr Lek，2008，54（9）：847-861.

［13］蒋元强，李建勇，吴雨洁，等.多发性骨髓瘤患者外周血与骨髓中瘤细胞的检测及临床意义［J］.中国实验血液学杂志，2006，14（5）：908-912.

（编辑 裘孝琦，英文编辑 郑华川）

Clinical Significance of Serum Lactate Dehydrogenase and Its Isoenzymes in the Retreated Patients with Multiple Myeloma

LINNa，YUJin-xiang，LIYan，GAOFeng，WANGBai-xun
（Department of Hematology，The First Affiliated Hospital，China Medical University，Shenyang 110001，China）

ObjectiveTo investigate the clinical significance of serum lactate dehydrogenase （LDH）and its isoenzymes，Mor Hsubunits in the retreated patients with multiple myeloma（MM）.Methods141medical records of retreated patients with multiple myeloma were collected，and the relationship of LDHand its isoenzymes，subunits with DSstaging system，ISSstaging system，creatinine，bone marrow plasma cell percentage，immunoglobulin and microglobin was analyzed.ResultsSerum total LDHactivity was not significantly related to DSstaging system and ISSstaging system.LDH1percentages was negatively correlated with ISSstaging system（P<0.01），and LDH4percentages positively associated with ISSstaging system （P<0.05）.LDHactivity，absolute value of LDH1，LDH2，LDH3，LDH4，and Hsubunits were positively linked to serum creatinine in myeloma kidney disease patients with renal inadequacy （P<0.05）.Both percentage and absolute value of LDH5were negatively correlated with bone marrow plasma cell percentage（P<0.01andP<0.05respectively）.ConclusionThe detection of serum LDHisoenzyme is more valuable than total LDHactivity in retreated patients with multiple myeloma.

lactate dehydrogenase；isoenzymes；multiple myeloma

R733.3

A

0258-4646（2010）01-0031-03

辽宁省科技攻关计划项目（2004225004-11）

林娜（1984-），女，住院医师，硕士.

李艳，E-mail：liyan2@medmail.com.cn

2009-08-15