猪呼吸道正常菌丛对抗菌药物敏感性的研究

2009-11-29龚大春周天明程太平

长江大学学报(自科版) 2009年11期

关键词：猪群耐药性敏感性

龚大春，江涛周天明程太平

(长江大学动物科学学院，湖北荆州 434025) (湖北生物科技职业学院，湖北武汉 430070) (长江大学动物科学学院，湖北荆州 434025)

猪呼吸道正常菌丛对抗菌药物敏感性的研究

龚大春，江涛周天明程太平

(长江大学动物科学学院，湖北荆州 434025) (湖北生物科技职业学院，湖北武汉 430070) (长江大学动物科学学院，湖北荆州 434025)

为探讨猪呼吸道正常菌丛对抗菌药物的敏感性，从3个猪场用棉拭法采取猪呼吸道分泌物90份，用K-B法进行了体外药物敏感试验。结果显示，同一个猪场的不同猪群、不同猪场猪群的呼吸道正常菌丛对同一种抗菌药物的敏感性差异极显著，且猪呼吸道正常菌丛对多种抗菌药物的敏感性表现为耐药、中敏和高敏。由此提示，在临床治疗细菌性疾病时，应合理选用抗菌药物，减少对正常菌丛的干扰和破坏。

抗菌药物；正常菌丛；猪；药敏试验

细菌耐药性已成为全球关注的公共卫生问题，专家估计细菌耐药在21世纪对人类生命健康的威胁将不亚于艾滋病、癌症和心血管疾病[1]。细菌耐药不仅给人类健康构成了严重的威胁，而且给畜牧生产造成了巨大的损失。目前有关猪致病菌的耐药性已有较多的研究报道，但有关正常菌丛的耐药性报道较少。为此，笔者对猪呼吸道正常菌丛对抗菌药物的耐药性进行了研究，旨在为兽医临床合理用药提供理论依据，减少抗菌药物对猪正常菌丛的干扰，以增强猪群的抗病力，保障养猪业的健康发展。

1 材料与方法

1.1 材料

(1) 试剂药品盐酸土霉素：白云山兽药厂生产；磺胺嘧啶钠：三峡兽药厂生产；痢菌净注射液：山西芮城亚宝兽药厂生产；蒽诺沙星：吉林四方兽药厂生产；先锋氧氟沙星：山东明发兽药厂生产；牛肉膏、蛋白胨、琼脂粉等由长江大学动物科学学院提供。

(2) 药敏纸片硫酸链霉素、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素、氯霉素、青霉素G钾、痢特灵、烟酸氟哌酸、盐酸环丙沙星等药敏纸片均由杭州微生物试剂有限公司生产。

(3) 受试菌料采集正常健康猪群的猪呼吸道分泌物共90份，其中江南埠河某猪场(A)3个猪群各10份、白水滩某猪场(B)3个猪群各10份、李埠某猪场(C)3个猪群各10份。

1.2 方法

(1) 药敏纸片与培养基的制备按文献[2，3]的方法，制备药敏纸片和培养基。

(2) 呼吸道正常菌丛的采取方法将猪保定，用无菌棉签蘸取灭菌生理盐水，在猪鼻腔内来回转捻几次取出，用灭菌剪刀剪下棉签的棉试部分，贮存于灭菌小瓶中。

(4)耐药性判断标准按文献[2，4～7]报道的标准进行耐药(R)、中敏(I)、高敏(S)的判断。

2 结果与分析

2.1 3个猪场不同猪群呼吸道正常菌丛的耐药性

同一个猪场不同猪群呼吸道正常菌丛对同一种抗菌药物的敏感性有些差异极显著，表现为高敏、中敏和耐药；有些差异不显著，使用较少的药物表现为敏感一致，使用较多的药物表现为耐药一致，这可能与不同的技术员用药习惯不同和猪群的来源不同有关(表1)。

表1 3个猪场不同猪群呼吸道正常菌丛药敏试验结果Table 1 Results of drug sensitization test of respiratory tract resident flora in different pig groups from three pig farms

2.2 3个猪场猪呼吸道正常菌丛的耐药性比较

3个猪场猪呼吸道正常菌丛对同一种抗菌药物的敏感性有的差异显著，表现为高敏、中敏和耐药，这可能与不同的猪场选用的药物种类不同、使用的频度不同有关；有些药物的敏感性差异不显著，长期使用的药物表现为耐药，尤其对磺胺嘧啶钠、土霉素、链霉素、卡那霉素这些常用抗菌素表现为耐药，而刚使用的药物如先锋氧氟沙星表现为高度的敏感(表2)。

表2 3个猪场猪呼吸道正常菌丛的耐药性比较Table 2 Comparison of drug-resistance of respiratory tract resident flora in different pig groups from three pig farms

3 讨论与小结

(1) 本试验结果表明，猪呼吸道正常菌丛对抗菌药物的敏感性表现为耐药、中敏和高敏，说明不同猪场的猪群、同一猪场的不同猪群、同一猪群的不同个体呼吸道正常菌丛可能携带的耐药基因是不同的。这提示广大的畜牧兽医工作者在兽医临床治疗细菌性疾病时，应合理选用抗菌药物，有条件的最好开展药敏试验，避免盲目用药，以减少对猪呼吸道正常菌丛的干扰和破坏，增强其抗病力，特别不要盲目使用新药、特效药，盲目使用这些药物的结果往往会导致呼吸道的正常菌丛失调，降低猪的抗病力。

(2)据报道，正常菌丛是动物体内潜在的耐药基因库[8]，动物体内正常菌丛表观耐药性与同期致病菌的表观耐药性呈现较高的相关性[9]。正常菌丛的耐药性与致病菌耐药性是否存在某种联系，这是一个有趣的值得探讨的问题。从理论上分析，细菌的耐药性来源于该细菌本身固有的耐药基因和获得性耐药基因。细菌固有的耐药基因具有稳定的遗传性，能代代相传，具有典型的种属特异性。获得性耐药基因既可以通过多种途径获得[10]，也可以在环境中为生存进化而产生耐药基因。正常菌丛的耐药基因与致病菌的耐药基因是否存在互相传递还缺乏实验证据，尚需要探讨。

[1]张永标，张扣兴，唐英春.产质粒介导AmpC酶和ESBLs 细菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型研究[J]. 中华微生物和免疫学杂志,2004，24(7)：562～577.

[2]韩文瑜．病原细菌检测技术[M]．吉林：吉林科技出版社，1992.79～82.

[3]姚火春．兽医微生物学实验指导[M]．北京：中国农业出版社，2002.19～22.

[4]宁鹏，宁顺章．几种细菌对环丙沙星的药敏试验[J]．中国兽医杂志，1999，25(2)：28.

[5]陈坤永，翁良树，吴慕贞，等．深圳地区奶牛临床型乳房炎病原菌分离鉴定与药敏试验[J]．中国兽医科技，1999，29(9)：36～38.

[6]贾俊元，毋艳萍，何虎成．猪源性大肠埃希氏菌对抗菌药物的敏感性测定[J]．中国兽医科技，1999，29(12)：32～33.

[7]龚大春，江涛，程太平.鸡直肠正常菌丛对抗菌药物敏感性的研究[J].长江大学学报(自然科学版)农学卷，2008，5(2)：39～41.

[8]汤景元，王红宁，张鹏举，等.95个猪场大肠杆菌耐药表型及氨基糖苷类药物耐药基因型调查[J].畜牧兽医学报，2008 ,39(4)：472～477.

[9]龚大春.鸡源性致病菌和直肠常在菌对抗菌药物敏感性的比较研究[J].湖北畜牧兽医， 2005，(12)：4～6.

[10]蒋红霞，曾振灵．细菌耐药机制及耐药性控制对策[J]．动物医学进展，2001，22，(4)：4～7.

2009-09-08

龚大春 (1963-)，男，湖北钟祥人，农学硕士，副教授，主要从事兽医临床研究.