正交设计试验优化樱花多糖提取工艺的研究

沈　波　曹　莹　江海涛

【摘要】本文主要利用正交设计试验优化樱花多糖的提取工艺，为樱花多糖的提取研究提供相关的实验数据。

【关键词】樱花多糖 正交设计 提取工艺

樱花（学名Cerasua serrulata）为蔷薇科（Rosaceae）樱属（Cerasus）植物，在世界各地都有栽培，具有很高的观赏价值。目前，对樱花的研究主要集中在樱花的栽培上[1-3]，对于樱花成分及功能的研究鲜有报道。本文主要通过正交试验优化樱花多糖的提取工艺，为樱花多糖的提取研究提供相关的实验数据。

1.实验材料和方法

1.1材料

櫻花采自南京晓庄学院北圩校区

1.2仪器

电子精密天平、数显恒温水浴锅（HH-4）、紫外可见分光光度计，离心机等。

1.3方法

1.3.1樱花多糖的提取工艺

材料准备→前处理→浸提（蒸馏水提取）[4-6] →离心取上清液（重复提取3 次，合并上清液浓缩→3倍乙醇沉淀→离心分离→干燥→提取物的初步鉴定。

1.3.2正交设计因素水平表

采用正交设计[7-8]考察提取时间、提取温度以及料液比三个因素对樱花多糖提取程度的影响。精确称取干燥的樱花花瓣3g，分别以不同的提取时间，提取温度，料液比为因素做3因素3水平正交试验，每个处理重复3次。试验设计（见表1）：

1.3.3 标准曲线制备

精密称取105℃干燥到恒重的标准葡萄糖10mg，在100mL容量瓶中加纯净水溶解并稀释至刻度，配成100ug.mL^-1的标准品溶液；分别精密吸取该溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL，依次加蒸馏水稀释至1mL。另取1mL水为空白，置冰水浴中5min；取出后，分别精密吸取4ml蒽酮试剂，沸水浴10min，取出，用自来水冷却，室温放置10min，用722型分光光度计于620nm处测定吸光度，以进样浓度C（ug.mL^-1）对吸光度值A进行线性回归。

2.结果

2.1葡萄糖标准曲线绘制

经回归处理，得回归方程为：

y=134.35x-20.424R2=0.975线性范围：10-70ug.mL^-1

y为葡萄糖浓度（ug.mL^-1） x为葡萄糖

2.2不同因素对樱花多糖提取的影响

利用正交设计软件对试验数据进行分析，结果见表2和表3。

3.讨论

多糖的提取受到多种因素的影响。本实验结果表明提取温度、提取时间以及料液比三个因素对樱花多糖的提取都有一定的影响。表2及表3分析可以看出，三个因素对还原糖提取的影响次为：提取温度>提取时间>料液比。统计结果显示，温度对樱花多糖的提取有显著影响（P〈0.05），而提取时间和料液比的影响较小，无统计学差异。通过正交结果分析，樱花多糖提取的最佳条件为A3B3C2 ，即3g干燥的樱花花瓣置于烧杯中，加蒸馏水240ml，在90℃的水浴锅中提取3h，过滤，浓缩，加3倍乙醇沉淀。有关提取工艺的研究将进一步深入。

参考文献：

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作者简介：沈波，（1987-），男，汉族，南京晓庄学院生命科学系大四学生。