维吾尔药罗勒对环氧化酶的影响

2009-04-29江国华依巴代提阿布力孜盛磊

亚太传统医药 2009年1期

江国华　依巴代提　阿布力孜　盛　磊

（1.新疆医科大学药理教研室；2.新疆医科大学科研中心，新疆乌鲁木齐 830054）お

摘要：目的：探讨维吾尔药罗勒醇提物在体外对环氧化酶的影响，从而研究罗勒抗血栓的作用机制。方法：测定人脐静脉内皮细胞6-keto-PGF1α、小鼠腹腔巨噬细胞PGE2 的含量。结果：罗勒对环氧化酶-1（COX-1）和环氧化酶-2（COX-2）都有不同程度的抑制作用。在剂量相同时，罗勒醇提物对COX-2的抑制率大于COX-1。结论：本实验从底物的角度证实了罗勒醇提物对COX-1 和COX-2 的作用,抗血栓部分机理可能是由于抑制环氧化酶而介导的。

关键词：罗勒；环氧化酶-1；环氧化酶-2；抗血栓

中图分类号：R973文献标识码：A文章编号：1673-2197（2009）01-0037-01オ

罗勒是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之一,是唇形科罗勒属植物Ocimum basilicum L^[1，2]。主要成分：全草，罗勒的化学成分主要为挥发油、黄酮、香豆素、甾体化合物等,其中挥发油的含量最大^[3]。本研究是通过罗勒在体外对环氧化酶（COX-1和COX-2）活性的影响来探讨罗勒抗血栓的作用机制，给临床选药组方提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

CO₂培养箱,全自动酶标仪,生物显微镜,超净操作台。

罗勒，阿司匹林，吲哚美辛；脂多糖(LPS)、花生四烯酸(AA);DMEM干粉；RPMI1640；小牛血清（四季青）；MTT、胰蛋白酶；6-keto-PGF1α和PGE2ELISA试剂盒。

1.2 方法

1.2.1 在体外对COX-1的影响

按文献方法制备内皮细胞COX-2模型^[4]。将培养至第4代的内皮细胞接种于24孔培养板中生长融合，再加入罗勒提取液,使其终浓度分别为0.1mg/mL、1mg/mL、10mg/mL,或非选择性环氧化酶抑制剂阳性对照阿司匹林(终浓度10-6mol/L)、COX-2抑制剂阳性对照吲哚美辛(终浓度10-7mol/L)或阴性对照溶媒。37℃、5%CO₂培养箱培养24h,取出每孔加入底物花生四烯酸,使其终浓度为10μmol/L,37℃继续培养20min。收集上清液,-20℃冻存待测^[5]，用ELISA法测定样品中6-keto-PGF1α。

1.2.2 在体外对COX-2的影响

按文献方法制备巨噬细胞COX-2模型^[6]，将细胞接种于24孔板中生长融合，再加入一定浓度的罗勒提取液,终浓度分别为0.1mg/mL、1mg/mL、10mg/mL，或阳性对照品阿司匹林(终浓度10-6mol/L)、吲哚美辛(终浓度10-7mol/L)或溶媒。37℃、5%CO₂培养箱培养24h,取出,每孔加入底物花生四烯酸(终浓度10μmol/L),37℃继续培养20min。收集上清液,-20℃冻存待测。用ELISA法测定样品中的PGE2。

1.2.3 统计学处理

数据用SPSS统计软件处理,所有结果用±s表示,采用独立样本t检验和方差分析。

2 结果

罗勒在体外对环氧化酶的影响，罗勒对环氧化酶-1（COX-1）和环氧化酶-2（COX-2）都有不同程度的抑制作用，另外,随着剂量的增加抑制率也增大,存在一定的量效关系。结果见表1。

注：与DMSO比较:*P < 0.05，**P<0.01。

3 讨论

环氧化酶(COX) 是花生四烯酸合成前列腺素过程中一个重要的限速酶,其催化的产物前列腺素H2是各种前列腺素的共同中间体,在各组织和器官中前列腺素H2 被不同的前列腺素合成酶作用生成各种前列腺素,以自分泌或旁分泌方式和靶细胞的前列腺素受体结合发挥各种各样的生理功能^{[7］。随着COX-2 的发现,现在普遍认为COX-1负责维持身体的正常机能,而COX-2 则是一种诱导酶,参与炎症反应,抑制COX-2 可以发挥抗血栓作用^[8] 。本实验表明,罗勒在3 个剂量都对COX-2 有抑制作用,并随剂量的增加而作用增强,抑制环氧化酶可能是其抗血栓的作用机制之一。}

参考文献：

［1］茹克娅木.维吾尔医常用药材学(上)(维吾尔文)［M］.乌鲁木齐:新疆人民卫生出版社,1993：426-429.

［2］新疆维吾尔自治区卫生厅.维吾尔药材标准［S］.乌鲁木齐：新疆科技卫生出版社，1993：183-187.

［3］汪涛，崔书亚，胡晓黎.罗勒挥发油成分的研究［J］.中国中药杂志，2003,28(8):740-742.

［4］侯琦,胡玉芳,郭颖,等.非普拉宗对环氧酶活性的影响［J］.药学学报,2000,35(7):481.

［5］龙启才,邱建波.雷公藤、防己醇提取物对淋巴细胞和环氧化酶的影响［J］.中药材,2004,27(11):851.

［6］胡玉芳,程桂芳.环氧酶选择性抑制剂筛选模型的建立［J］.药学学报,2000,35(5):343.

［7］ Funk C D. Prostaglandins and leukotrienes： advances in eicosanoidbiology［J］. Science， 2001， 294 (5548)： 1871.

［8］ Marx J . Anti-inflammatories inhibit cancer growth but how［J］. Science，2001， 291 (5504)： 581.

（责任编辑：姜付平）