毛细管电泳四色荧光检测法分析茶树ＳＳＲ标记

黄建安　李　娟　谭月萍等

摘要：将毛细管电泳四色荧光检测技术应用于茶树SSR标记分析，该方法采用三引物PCR扩增SSR位点，三引物即在5'端加有M13尾巴序列(5'-CACGACGTTGTAAAACGAC－3')的特异正向引物、特异反向引物及带有荧光标记的通用型M13引物；为了运用四色荧光检测系统使通过一次毛细管电泳能同时检测3个以上的SSR位点。采用蓝、绿、黑3种不同颜色的荧光染料分别对3个M13引物进行标记，应用该方法对42个茶树品种(系)的16个SSR位点进行遗传分析的结果表明：此法具有简便、可靠、低成本及高通量的优点；且随着所分析SSR位点数的增加，降低成本的效果更加显著，采用建立的方法，还筛选获得了11个多态性丰富的可应用于茶树遗传研究的SSR标记。

关键词：微卫星(microsatellite，SSR)；通用M13引物；毛细管电泳；四色荧光检测；茶树

中图分类号：S571.1；Q523

文献标识码：A

文章编号：1007-7847(2009)03-0251-07