金蛋茄的离体培养与植株再生试验

丁云霞 陈国菊 雷建军 曹必好

（华南农业大学园艺学院，广东广州，510642）

金蛋茄的离体培养与植株再生试验

丁云霞 陈国菊 雷建军 曹必好

（华南农业大学园艺学院，广东广州，510642）

以珍稀观赏蔬菜金蛋茄（L.）为试验材料，探讨了不同生长调节物质对外植体分化的影响和不同外植体分化能力的差异。试验结果表明，较适合金蛋茄子叶分化的培养基是MS+ZT 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L，分化率为70.00%；适合下胚轴分化的培养基是MS+ZT 1.0 mg/L，分化率为35.15%；子叶的分化能力比下胚轴的强；适合生根的培养基是MS+IAA 0.5 mg/L，生根率为100%。

金蛋茄 子叶 下胚轴 植株再生

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料为金蛋茄，编号为0302011，从泰国引进。

1.2 试验方法

①无菌苗的获得 成熟种子用70%酒精消毒30 s，2%次氯酸钠溶液震荡消毒15 min，无菌水冲洗4～6次，播种在无激素的1/2 MS培养基上发芽。种子露白后开始计算苗龄。选取苗龄12 d左右的无菌苗的子叶和下胚轴作为外植体，接种到不同的分化培养基上。

②不定芽的诱导分化 诱导分化培养基共19种，基本培养基为MS，添加6-BA浓度为1.0，2.0，3.0，4.0 mg/L，ZT浓度为0.2，0.5，1.0 mg/L，IAA浓度为0.1，0.25，0.5，1.0 mg/L。外植体下胚轴切成1 cm左右的小段，横向放置，子叶切成1 cm×1 cm的小块，正面朝上放置在分化培养基上。培养条件为光照时间16 h/d，温度25℃，光照强度1500 lx。2周左右继代1次，4周后统计结果。

表1 不同生长调节物质对金蛋茄不定芽分化的影响

③生根和移栽 不定芽长至3 cm左右时，从基部切下，移至生根培养基中，生根培养基为MS培养基添加IAA。设置4个处理：IAA浓度为0.1，0.25，0.5，1.0 mg/L。15 d后统计生根情况。长出完整的根系后，打开瓶盖炼苗2～3 d，然后洗净根部培养基，移至已灭菌的营养土中，用塑料膜保湿5 d左右，10 d左右后移至室外，进行正常田间管理。

2 结果与分析

2.1 不同生长调节物质对金蛋茄不定芽分化的影响

外植体接种到诱导分化培养基上1周左右就可以产生愈伤组织，添加不同浓度的6-BA，IAA和ZT都可以诱导子叶和下胚轴产生愈伤组织，诱导率达到100%。子叶与下胚轴产生的愈伤组织明显不同。在所设置的19个培养基中，下胚轴上产生的愈伤组织都是松脆、柔软、黄色的（图1），这一点与余波澜等[4]的研究一致。而子叶在不同的培养基上产生的愈伤组织不同。在添加6-BA和6-BA+IAA的培养基中，子叶产生的愈伤组织中间为绿色，周围为白色（图2），比下胚轴产生的愈伤组织较坚硬、紧密。在添加ZT和ZT+6-BA的培养基中，子叶只产生少量绿色的愈伤组织就可分化出芽（图3）。

不同生长调节物质组合诱导金蛋茄分化出芽的类型不同。6-BA，6-BA+IAA诱导分化的芽是直接由愈伤组织上分化出的单生芽；ZT，ZT+6-BA诱导分化的芽是丛生芽，愈伤组织上分化出的芽的数目较多，一般有3～4个，但是只有1～2个芽能够正常生长。

不同生长调节物质组合诱导金蛋茄不定芽分化的结果统计表明（表1），较适合金蛋茄子叶分化的培养基是MS+ZT 1.0 mg/L+BA 2.0 mg/L，分化率为70.00%；适合下胚轴分化的培养基是MS+ZT 1.0 mg/L，分化率为35.15%。

培养基中添加2.0 mg/L 6-BA能比较好的诱导金蛋茄子叶芽分化，并且能形成正常的植株；添加0.2～1.0 mg/L ZT都可以成功诱导金蛋茄子叶芽分化，形成比较多的不定芽，但是浓度过高，外植体愈伤化强烈，分化出的不定芽不正常。

2.2 不同外植体分化能力的比较

在相同生长调节物质组合的培养基中，子叶和下胚轴诱导形成的愈伤组织不同，子叶的分化能力比下胚轴的强。下胚轴分化形成的愈伤组织均为淡黄色、疏松状，并且平均芽分化率都较子叶的低，最高的也只有32.26%。子叶在6-BA的诱导下分化形成的愈伤组织为中间绿色周围白色、紧密而坚硬的愈伤组织；在ZT的诱导下，只形成少量的绿色愈伤组织；子叶的平均芽分化率最高为70.00%。

图1 下胚轴产生的愈伤组织及不定芽

图2 6-BA诱导的子叶产生的不定芽

图3 ZT诱导的子叶产生的不定芽

2.3 不定根的诱导

由表2可知，MS添加0.1～1.0 mg/L IAA均能够诱导不定根的产生。适合生根的培养基是MS+IAA0.5 mg/L，不定根发生早，且质量高，10 d左右就可以形成4～5条白色不定根，生根率为100%。

2.4 移栽试验

炼苗移栽后的再生植株，20 d后统计成活率，成活率为90%。

3 小结

Sharma等[6]的研究表明，茄子下胚轴诱导的不定芽比子叶和叶片诱导的多。余波澜等[4]也得到4个品种的下胚轴都比子叶容易出芽的结论。本试验结果表明，金蛋茄与茄子的组织培养有较大的差异，金蛋茄下胚轴的分化效果不如子叶，下胚轴分化效果最佳的培养基是MS+ZT 1.0 mg/L，分化率为35.15%；子叶分化效果最佳的培养基是MS+ZT 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L，分化率为70.00%。生根效果最佳的培养基是MS+ IAA 0.5 mg/L，生根率为100%。

表2 不同浓度IAA对金蛋茄不定根诱导的影响

[1]Kamat M G,Rao P S.Vegetative multiplication of eggplants (Solanum melongena)using tissue culture techniques[J]. Plant Sci Lett,1978,13:57-65.

[2]赵福宽，高遐虹，程继鸿，等.激素与低温胁迫在茄子叶片组织培养中的效应[J].北京农学院学报，2001（2）：27-30.

[3]刘独臣，房超，刘小俊，等.茄子花药培养研究进展[J].长江蔬菜，2006（7）：42-44.

[4]余波澜，张利明，孙勇如，等.茄子子叶和下胚轴的组织培养和植株再生[J].植物生理学通讯，2003，39（4）：317-320.

[5]姚春娜，孔英珍，王亚馥.茄子生物技术研究进展[J].生命科学，2002，14（4）：246-248.

[6]Sharma P,Rajam M V.Genotype explant and position effects on organogenesis and somatic embrygenesis in eggplant[J].Journal of Experimental Botany，1995,46(282): 135-141.

Tissue Culture and Plantlet Regeneration ofL.

DING Yunxia,CHEN Guoju,LEI Jianjun,CAO Bihao

Using the cotyledon and hypocotyls as explants,the influence of growth regulators were studied on differentiation and the regeneration inL..The optimum medium for cotyledon was MS+ZT 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,the rate of regeneration was 70.00%.The optimum medium for hypocotyl was MS+ZT 1.0 mg/L,the rate of regeneration was 35.15%.The optimum medium for rooting was MS+IAA 0.5 mg/L,the rate of rooting was 100%.

L.;Cotyledon;Hypocotyl;Plant regeneration

10.3865/j.issn.1001-3547.2009.18.009

广东省科技攻关项目（2005B20901004）

丁云霞（1981-），女，硕士研究生，研究方向为蔬菜遗传育种与生物技术

陈国菊（1967-），女，通信作者，副教授。E-mail:gjchen@scau.edu.cn

2009-07-02